Parâmetros para desenho de primers

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Parâmetros para desenho de primers 
 
 
 
 
 
 
 
 
1- Tamanho do primer: 
• 18 a 22 pares de bases; 
• Quanto maior, menos específico. 
 
2- Temperatura de metting: 
• Temperatura necessária para 
dissociação das fitas de DNA; 
• 50 a 62ºC. 
 
3- Temperatura de anelamento: 
• 55 a 65ºC; 
• Quanto maior a temperatura, 
maior a probabilidade de 
formação de produtos 
inespecíficos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
4- Conteúdo de CG: 
• 50% CG; 
• Influencia na temperatura de 
anelamento dos primers. 
 
- Foward iniciador 5’ 
- Reverse iniciador 3’ 
 
- Formação de Harpins (grampos): 
Bases complementares dentro dos 
primers.