Independe de fatores como o cuidado nas pipetagens, a qualidade e integridade das amostras, desenho dos primers, e as condições de termociclagem.

Não expressa falsos sinais positivos a partir da amplificação de um gene no caso da contaminação da amostra.

É incapaz de detectar produtos inespecíficos como dímeros de primers.

Permite a detecção dos produtos de reação apenas no final de todos os ciclos de termociclagem.

Quanto menor a concentração de primers, melhor a capacidade de amplificação.

O PCR (reação em cadeia de polimerase) em tempo real quantitativo, foi descrito pela primeira vez em 1993 por Russell Higuchi e seus colaboradores. Por ser uma técnica de elevada sensibilidade, a PCR em tempo real usando Sybrgreen tem sido uma ferramenta aplicada em diversas áreas biomédicas, destacando-se na pesquisa básica e no diagnóstico clínico-laboratorial.

Com relação a esta técnica, marque a alternativa correta.