Processamento histológico e microscopia

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Histologia - métodos de estudo
PROCESSAMENTO HISTOLÓGICO
Preparação de tecidos pl exame de microscópio → estrutura e composição in vivo
1) Fixação : Dois métodos → químico ou físico
- -
ex: formol ex : congelamento
Função → manter a estrutura e composição tecidual original
evitar autólise ~ degeneração
eliminar microorganismos
endurecimento do material v ligações cruzados ou desnaturação proteico
endurecimento pl permitir cortes
Volume fixador d 10x Volume da peça
2) Desidratação : Para permitir o uso de parafina posteriormente
Graduações crescentes de álcool etílico
3) Dia fundação /clarificação : Remoção do álcool v para o uso da parafina
3 banhos de xilol Itoluoll tolueno
4) Infiltração) Impregnação : Banhos de parafina
Permite o blocomenta e o corte fino depois
5) Inclusão : Enblo comento da peça d parafina
6) Microfonia : Corte do bloco em fatias super finas que permitam a passagem da luz v 5- E um
Equipamento que faz os cortes → micrótomo
cortes ficam "enrugados
"
→ colocados em banho maria pl esticar
depois são pescados d uma lâmina de vidro
lâmina é levado pl uma estufa v promove a adesão do tecido à lâmina
jú começa a remoção do povo fino
7) Remoção : Remove a parafina ~ peça precisa estar hidratado pl o uso de corantes
Banhos de Xilol
8) Reidratação : Graduações decrescentes de álcool etílico OBS : para tecido mineralizados é preciso ser realizado o
para remover o xilol e hidratar a peça etapa de descalcificação antes da fixação pl os elementos
9) Coloração celulares serem estudados. Também pode ser feito o des.
6) Desidratação : Graduações crescentes de álcool etílico goste até restar uma camada fina, mas não há preservação
11) Dirofoni ração / clarificação i Banhos de xilol dos elementos celulares
12) Montagem : lâmina t resina t lamínula = lâmina pronto
COLORAÇÃO
Pode ser → Simples v um corante
ex : Hematoxilina
,
Eosina
,
Azul de Alain
,
Azul de Toluidina
-
metacromática - algumas estruturas
trocam a cor do corante (metacromo sino)
Azul de Toluidina
Duplo ~ dois corantes
ex : Hee ( Hematoxilina t Eosina) → t utilizado
Tri crônica v três corantes
ex : T.de Masson
,
T
. de Mallory
Policromia vt de três corantes
Papanicolau
ex: Papanicolau
Evidenciam componentes teciduais e facilitam a distinção entre eles
corantes ácidos e básicos → ligações eletrostáticas dos radicais ionizados dos tecidos
He E → Eosina no rosa lvtoronjodo
corante ácido
caro estruturas básicas = estruturas acidófilvs (ex : mitocôndrias
, colágeno)
Hematoxilina no azul / violeta
corante básico
corro estruturas ácidas = estruturas bvsó filas (ex : DNA
,
RNA
, glicosaminoglicanos)
↳ células que produzem proteínas são bosó filas
cheios de ribossomos
coloração por proto → Utilizado pl tecidos do sistema nervoso central
MICROSCOPIAS
Poder de resolução → capacidade de separar detalhes
limite de resolução → menor distância entre dois pontos pl que apareçam como estruturas separadas
ligado a riqueza de detalhes
Tipos : Microscopia de luz → comum
sem tantos detalhes v resolução de 92mm
Microscopia eletrônica de transmissão -o outro tipo de preparação v fixação por glutoroldeído com tetróxido de ósmio e inclusão
em resina
permite ver detalhes do interior das células
Microscopia eletrônica de varredura → preparação diferente v utilização de metais
Feixe de elétrons não entro na célula ~ rebatidos pelos metais
imagem do contorno / porte externo
Microscopia de fluorescência -o uso de substâncias fluorescentes / fluoró foros
anticorpos associados o fluoró foros se ligam diretamente a estrutura analisado
↳
imagens são sobrepostos