Obtenção de amostras para extração de DNA

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As amostras obtidas para serem testadas em laboratório são muito
sensíveis e podem degradar com relativa facilidade. Assim, esse
material deve ser guardado de forma adequada até o momento de
ser submetido à extração do DNA. Amostras de sangue e de outros
tecidos animais devem ser refrigeradas até chegarem ao laboratório
para realização dos testes. Para que se realizem os testes de
amplificação de DNA por meio da técnica de reação em cadeia da
polimerase (PCR), as amostras devem ser mantidas sob baixas
temperaturas, variando de –20°C a –80°C, dependendo do tempo
de armazenamento. Para utilização de amostras conservadas em
estoque (amostra em grande volume), é interessante que se realize
o fracionamento em pequenas alíquotas, ou seja, separar uma
“amostra maior” em pequenas amostras, para que o material não
sofra descongelamentos sucessivos. O fato de congelar e
descongelar diversas vezes sua amostra contribui para a oxidação
do tecido e para a degradação do DNA, perdendo o material. O
manuseio dessas amostras deve ser feito com o uso de luvas, para
que os ácidos nucleicos não sejam degradados por enzimas
denominadas “nucleases”, que estão presentes no corpo humano,
principalmente nas mãos das pessoas. Alguns cuidados devem ser
tomados durante e após a extração do material genético como o
DNA, separando um espaço isolado somente para essa finalidade.
Salas e ambientes separados e climatizados para a extração do DNA
são essenciais, sendo que as extrações devem ser trabalhadas em
Eppendorfs, pequenos tubos de material plástico (polipropileno)
esterilizados ou preferencialmente novos (não deve ser usado
material reciclado), para que as amostras não apresentem
contaminações durante suas análises. Ultimamente, os laboratórios
procuram comprar Eppendorfs RNASE e DNASE free, para não
correrem o risco de degradação do material genético
OBTENÇÃO DE AMOSTRAS PARA
EXTRAÇÃO DE DNA
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