resumo flavonoides

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RESUMO - DEMONSTRAÇÃO TÉCNICA FLAVONÓIDE 
Nome: LUCAS SILVA DE OLIVEIRA e VANESSA CRISTINA CRUZ 
Turma: TB/PB 
Os flavonoides são compostos fenólicos sintetizados pelas plantas e compreendem seis classes principais 
de compostos: flavonóis, flavonas, flavanóis (catequinas), antocianidinas, flavononas e isoflavonas. Com 
exceção dos flavanóis, estes compostos são encontrados nos alimentos principalmente na forma 
glicosilada, isto é, ligados a moléculas de açúcar. As principais fontes na dieta são as frutas, hortaliças, 
verduras, chás e vinhos. 
Para a realização da análise vegetal, se seguem alguns passos. Em primeiro momento é feita a 
identificação, a exemplo, na Calêndula officinalis são realizados cerca de quatro testes para determinar os 
marcadores químicos, como: três testes de identificação botânica e a identificação química. 
Na identificação química precisa de cerca de 1g do material vegetal (C. officinalis) no qual será pesado e 
transferido para um balão de fundo redondo. A extração é feita sobre refluxo, utilizando – se um 
condensador de bolas para evitar perdas do material. 
Após a extração, a análise é feita por cromatografia em camada delgada empregando a amostra em uma 
solução de referência – Rutina + ácido caféico + ácido clorogênico. Por fim, se aplica a solução na placa de 
sílica, se espera os solventes evaporarem – se e é feito a eluição até o ponto de marcação. 
Na análise da placa de sílica, se aplica cloreto de alumínio, no qual se forma um complexo de fluorescência 
amarela intensa. Em luz visível, não é possível visualizar manchas. No entanto, em luz violeta, em uma 
fluorescência esverdeada, é possível visualizar diversas manchas (a amostra). 
Após a utilização do revelador, cloreto de alumínio, em luz violeta 365nm é possível visualizar as manchas 
dos ácidos fenólicos e as anchas da rutina. Além disso, é possível visualizar demais flavonoides. 
Na análise, é possível dizer que a banda (mais polar) com maior rf é o ácido caféico, logo o ácido clorogênio 
e, por fim, com menor rf a rutina. 
Na análise quantitativa realizada por espectrofotometria de absorção UV será quantificado o volume total 
de flavonoides na amostra. Para isso, usa – se a amostra os reagentes, junto com o material vegetal e são 
extraídos por refluxo. 
Os reagentes têm por função, promover a hidrólise dos O – heterosídeos (ácido clorídrico) e solubilização e 
extração das agliconas liberadas após hidrólise (acetona). A metenamina é utilizada para impedir a 
 
 
formação de interferentes que podem prejudicar a análise da amostra, por isso, se usa um reagente para 
não permitir a formação de interferentes. 
Na análise quantitativa utiliza – se três ciclos de extração, logo ele é filtrado e adicionado acetona para 
iniciar um novo ciclo de extração. Porém, a cada ciclo o tempo total do procedimento é reduzido, pois o 
primeiro é extração e hidrolise com cerca de 30min, o segundo tem uma duração de cerca de 10 min, pois 
se utiliza apenas aceto e o terceiro tem o mesmo procedimento do segundo ciclo. No fim dos ciclos, o 
material é filtrado e o volume é completado com o solvente da reação. 
Outra extração é realizada, líquido – líquido, com acetona de etila visando obter as agliconas e para 
separar de outras impurezas, como açúcares. Mede – se um pouco da amostra anterior e adiciona um 
novo solvente, acetato de etila 10mL, para ser realizada a separação das fases. Repete se procedimento 3x 
utilizando 10mL de acetato de etila. Realiza o mesmo procedimento por quatro vezes. 
Logo, utiliza acetato de sódio para a eliminação de possíveis moléculas de água da fração orgânica. E tem – 
se uma fração orgânica limpa. 
Na quantificação, utiliza – se cloreto de alumínio para identificar – se os flavonoides. Usa – se um branco 
para zerar a amostra e identificar somente os flavonoides desejados. Após a mistura e a evaporação é 
realizada a leitura da absorbância. 
Tem – se um produto de amarelo intenso, sendo que a banda com a amostra e cloreto de alumínio a 
quantificação da amostra e uma maior seletividade devido ao maior comprimento de onda, também, uma 
maior sensibilidade. Por isso, usa – se um reagente para intensificar a qualidade, a sensibilidade, 
seletividade da amostra. 
Por fim, com a leitura de absorbância da amostra calcula – se a quantificação das agliconas e todos os 
flavonoides. 
Leitura de absorbância: 0,171 
A equação: 𝑻𝑭𝑻 = 𝑨 ∗ 𝟏, 𝟐𝟓 ÷ 𝒎 ∗ 𝟓𝟎𝟎 de acordo com a farmacopeia brasileira essa fórmula está com 
erro. 
Sendo 𝑻𝑭𝑻 = 𝑨 ∗ 𝟔, 𝟐𝟓 ∗ 𝟏𝟎𝟎 ÷ 𝒎 ∗ 𝟓𝟎𝟎 a correta. Nessa fórmula deve – se multiplicar por 100 para 
obter o valor percentual final. A fórmula final fica sendo: 𝑻𝑭𝑻 = 𝟎, 𝟏𝟕𝟏 ∗ 𝟏, 𝟐𝟓 ÷ 𝟎, 𝟒 ∗ (𝟏 − 𝟎, 𝟎𝟖𝟓) = 
0,58% 
Conclui – se, que após o cálculo do teor total de flavonoides da amostra, pelo resultado, afirma – se que é 
o mínimo preconizado da farmacopeia brasileira, ou seja, a droga vegetal atende aos requisitos 
farmacopeicos de qualidade.