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1. Que reação a glicose sofre ao entrar em uma célula? Glicose + ATP =======➔ Glicose-6P Verificar a diferença entre a enzima que catalisa esta reação no fígado e pâncreas e a que catalisa a reação em outros tecidos, quanto à inibição alostérica. Hexoquinase- Pi Glicoquinase- 2. Alguns “tecidos” e células só utilizam glicose como fonte de energia: tecido nervoso central (120 g/dia) e hemácia (36 g/dia). Outros tecidos ou células têm poucas mitocôndrias e também dependem de glicose: músculos brancos, medula renal, cristalino, córnea e retina, testículos. GLICONEOGÊNESE- PE 3. É possível converter lactato em glicose por uma via metabólica chamada gliconeogênese. Como é possível esta transformação se há reações irreversíveis na glicólise? Frutose 1,6 bisfosfato + H2O ====➔ Frutose 6-P Frutose 1,6-bisfosfatase Glicose-6-fosfato + H2O ======➔ Glicose 6-P Glicose 6-fosfatase Fosfoenol-piruvato + ADP ====➔ Piruvato + ATP Piruvato Carboxilase Piruvato (mit) + CO2 + H2O + ATP =================➔ Oxaloacetato + ADP + Pi + H+ (mit) Translocase Oxaloacetato (Mit) ================➔ Oxaloacetato (Cit) Fosfoenolpiruvato-carboxiquinase Oxaloacetato + GTP =================================➔ Fosfoenolpiruvato + GDP + CO2 • 3-Todos os tecidos operam esta conversão? Que outros compostos podem ser convertidos em glicose pela gliconeogênese? Glicerol==➔ Figado 4. Mostrar a sequência de reações que permite a conversão de piruvato em glicose. Comparar as reações irreversíveis da glicólise com as reações que as substituem quanto aos reagentes, produtos e enzimas. Piruvato Carboxilase Piruvato (mit) + CO2 + H2O + ATP =================➔ Oxaloacetato + ADP + Pi + H+ (mit) Translocase Oxaloacetato (Mit) ================➔ Oxaloacetato (Cit) Fosfoenolpiruvato-carboxiquinase Oxaloacetato + GTP =================================➔ Fosfoenolpiruvato + GDP + CO2 Glicose-6-fosfatase Glicose-6P + H2O =================➔ Glicose + Pi 5. Qual é o saldo em ATP da conversão de piruvato em glicose? Comparando este saldo com o da conversão de glicose em piruvato, explicar a vantagem do processo. GD- Glicolise e Gliconeogênese 1-Escrever a Equação Geral de conversão de Lactato a Glicose 2Lactato + 6 ATP + 6H2O =======➔ Glicose + 6ADP + 6 Pi + 2 H+ 2 Piruvato + 6ATP + 6H2O +2NADH ========➔Glicose + 6ADP +6 Pi + 2 NAD+ + 2H+ Frutose 1,6-bisfosfatase Frutose-1,6-bisfosfato + H2O ========================➔Frutose-6P + Pi Lactato desidrogenase 2Lactato + 2NAD+====================➔ 2Piruvato (citossol) + 2NADH + 2ADP + 2Pi + 4 H+ Translocase 2Piruvato (citossol) ============================➔ 2Piruvato (mitocôndria) Piruvato Carboxilase 2Piruvato (mit) + 2CO2 + 2H2O + 2ATP ____________________________ ➔ 2Oxaloacetato + 2ADP + 2Pi + 2H+ (mit) Translocase 2Oxaloacetato (Mit) ================➔ 2Oxaloacetato (Cit) Fosfoenolpiruvato-carboxiquinase 2Oxaloacetato + 2GTP =================================➔2 Fosfoenolpiruvato + 2GDP + 2CO2 Enolase 2Fosfoenol-piruvato + 2H2O ======================➔ (2) 2-Fosfoglicerato Fosfoglicerato mutase (2) 2-Fosfoglicerato =======================➔ (2) 3-Fosfoglicerato 3-Fosfoglicerato-quinase (2) 3-Fosfoglicerato + 2ATP ==================➔ (2) 1,3-bisfosfoglicerato+ 2ADP Gliceraldeido-3P desidrogenase (2) 1,3-bisfosfoglicerato +2 NADH + 2H+ ============================➔ 2Gliceraldeido-3P + 2Pi + 2NAD+ Triose-fosfato isomerase Gliceraldeido 3-P =======================➔ dihidroxiacetona-P Aldolase Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P ============➔ Frutose-1,6-bisfosfato Frutose 1,6-bisfosfatase Frutose-1,6-bisfosfato + H2O _______________ ➔Frutose-6P + Pi Fosfoglicoisomerase Frutose-6P ======================➔ Glicose-6P Glicose-6-fosfatase Glicose-6P + H2O _________________________ ➔ Glicose + Pi 2Lactato + 6 ATP + 6H2O =======➔ Glicose + 6ADP + 6 Pi + 2 H+ 6. 3-Mercaptopicolinato inibe a conversão de glicose 6-fosfato em glicose, mas não inibe a conversão de glicose em glicose 6-fosfato. Explicar. 7. Mostrar as semelhanças e diferenças entre as reações catalisadas pela fosfofrutoquinase 1 e fosfofrutoquinase 2 e entre as catalisadas por frutose 1,6 bisfosfatase e frutose 2,6 bisfosfatase [Definição de fosfatase - página 26]. 8. A concentração de frutose 2,6 bisfosfato nos hepatócitos varia com a disponibilidade da glicose: é pequena no jejum e alta após as refeições. 9. Efetuadores alostéricos (fígado): Positivos Negativos Fosfofrutoquinase 1 Frutose 2,6 bisfosfato ATP - Citrato Frutose 1,6 bisfosfatase Frutose 2,6 bisfosfato 10. Indicar a localização celular das enzimas da via glicolítica e da gliconeogênese. Via Glicolítica: Gliconeogênese: 11. Citar as vitaminas necessárias para as seguintes conversões: a) glicose → lactato b) lactato → glicose GD- Glicolise e Gliconeogênese 1-Escrever a Equação Geral de conversão de Lactato a Glicose 2Lactato + 6 ATP + 6H2O =======➔ Glicose + 6ADP + 6 Pi + 2 H+ 2 Piruvato + 6ATP + 6H2O +2NADH ========➔Glicose + 6ADP +6 Pi + 2 NAD+ + 2H+ GD- Gliconeogenese Hexoquinase Glicose + ATP ===========➔ Glicose-6P + ADP Fosfoglicoisomerase Glicose-6P ============ ➔ Frutose -6P Fosfofrutoquinase Frutose-6P + ATP =================➔Frutose-1,6-bisfosfato + ADP Aldolase Frutose-1,6-bisfosfato ============➔ Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P Triosefosfato-isomerase Di-Hydroxicetona-P ===================➔ Gliceraldeido-3P Gliceraldeido-3P desidrogenase (2) Gliceraldeido-3P + 2Pi +2 NAD+ =======➔ (2) 2,3-bisfosfoglierato + 2NADH + 2H+ 3-Fosfoglicerato-quinase (2) 2,3-bisfosfoglierato+ 2ADP =====================➔ (2) 3-Fosfoglicerato + 2ATP Enolase (2) 3-Fosfoglicerato ======================➔ (2) Fosfoenol-piruvato + 2H2O Piruvato- quinase (2) Fosfoenolpiruvato + 2ADP =================➔ (2) Piruvato + 2ATP Lactato desidrogenase (2) Piruvato + 2NADH =================➔ (2)Lactato + 2NAD+ Glicose + 2 ADP + 2 Pi ================➔2 Lactato + 2 ATP + 2H2O 1-Escrever a Equação Geral de conversão de Glicose a Lactato Entra SAI Glicose + ATP Glicose-6P + ADP Glicose-6P Frutose -6P Frutose-6P + ATP Frutose-1,6-bisfosfato + ADP Frutose-1,6-bisfosfato Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P Di-Hydroxicetona-P Gliceraldeido-3P (2) Gliceraldeido-3P + 2Pi + 2NAD+ (2) 2,3-bisfosfoglierato + 2NADH + 2H+ (2) 2,3-bisfosfoglierato+ 2ADP (2) 3-Fosfoglicerato + 2ATP (2) 3-Fosfoglicerato (2) Fosfoenol-piruvato + 2H2O (2) Fosfoenolpiruvato + 2ADP (2) Piruvato + 2ATP (2) Piruvato + 2NADH (2) Lactato + 2NAD+ Glicose + 2 ADP + 2 Pi ================➔2 Lactato + 2 ATP + 2H2O GD- 1-Escrever a Equação Geral de conversão de Glicose a Lactato 4- Incubando uma suspensão de Hemácias com fosfato inorgânico radioativo, é possível obter frutose 1,6-bisfosfato com 2 átomos de fósforo radioativos? P Pi H 2 O NAD+ P P NAD+ P = PO 3 2- P C-O- P Glicose 6-fosfato Di-hidroxiacetona fosfato Gliceraldeído 3-fosfato 1,3 Bisfosfo glicerato Fosfoenol piruvato Piruvato 11 Frutose 1,6-bisfosfato 2-Fosfoglicerato Frutose 6-fosfato HO-CH 2 ATP ADP -O-CH 2 O CH 2 -OH-O-CH2 ATP ADP O -O-CH 2 CH2-O- H 2 C-OH C=O H 2 C-O- HC=O HC-OH H 2 C-O- 1 2 3 4 5 HC-OH H 2 C-O- NADH ATPADP 6 7 COO- HC-OH H 2 C-O- H 2 C-OH HC-O- P COO- CH 2 COO- ADP ATP CH 3 C=O COO- CH 3 HC-OH COO- NADH 8 9 10 -O-C=O P P P P P 3-Fosfoglicerato Glicose Lactato 5- O lactato produzido pelo músculo pode ser convertido a glicose pelo fígado. a. Em que condições o músculo produz lactato? b. Escrever a equação geral da conversão de lactato =====➔ glicose c. Por que esta conversão não é feita no musculo? d. Além do músculo que outros tecidos (ou células) produzem lactato? Lactato desidrogenase Lactato + NAD+====================➔Piruvato (citossol) + NADH + ADP + Pi + 2 H+ Translocase Piruvato (citossol) ============================➔ Piruvato (mitocôndria) Piruvato Carboxilase Piruvato (mit) + CO2 + H2O + ATP =================➔ Oxaloacetato + ADP + Pi + H+ (mit) Translocase Oxaloacetato (Mit) ================➔ Oxaloacetato (Cit) Fosfoenolpiruvato-carboxiquinase Oxaloacetato + GTP =================================➔ Fosfoenolpiruvato + GDP + CO2 Enolase Fosfoenol-piruvato + H2O ======================➔ 2-Fosfoglicerato Fosfoglicerato mutase 2-Fosfoglicerato =======================➔ 3-Fosfoglicerato 3-Fosfoglicerato-quinase 3-Fosfoglicerato + ATP ==================➔ 1,3-bisfosfoglicerato+ ADP Gliceraldeido-3P desidrogenase 1,3-bisfosfoglicerato + NADH + H+ ============================➔ Gliceraldeido-3P + Pi + NAD+ Triose-fosfato isomerase Gliceraldeido 3-P ===========================➔ dihidroxiacetona-P Aldolase Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P ============➔ Frutose-1,6-bisfosfato Frutose 1,6-bisfosfatase Frutose-1,6-bisfosfato + H2O ========================➔Frutose-6P + Pi Fosfoglicoisomerase Frutose-6P ======================➔ Glicose-6P Glicose-6-fosfatase Glicose-6P + H2O =================➔ Glicose + Pi 5b. Escrever a equação geral da conversão de lactato =====➔ glicose 5- O lactato produzido pelo músculo pode ser convertido a glicose pelo fígado. a. Em que condições o músculo produz lactato? b. Escrever a equação geral da conversão de lactato =====➔ glicose c. Por que esta conversão não é feita no musculo? d. Além do músculo que outros tecidos (ou células) produzem lactato? GD - Glicolise e Gliconeogênese 6- Descrever as consequências metabólicas em fígado, músculo e hemácias, da falta de atividade da: a)Triose-fosfato isomerase b)Frutose-1,6-bisfosfatase P Pi H 2 O NAD+ P P NAD+ P = PO 3 2- P C-O- P Glicose 6-fosfato Di-hidroxiacetona fosfato Gliceraldeído 3-fosfato 1,3 Bisfosfo glicerato Fosfoenol piruvato Piruvato 11 Frutose 1,6-bisfosfato 2-Fosfoglicerato Frutose 6-fosfato HO-CH 2 ATP ADP -O-CH 2 O CH 2 -OH-O-CH2 ATP ADP O -O-CH 2 CH2-O- H 2 C-OH C=O H 2 C-O- HC=O HC-OH H 2 C-O- 1 2 3 4 5 HC-OH H 2 C-O- NADH ATPADP 6 7 COO- HC-OH H 2 C-O- H 2 C-OH HC-O- P COO- CH 2 COO- ADP ATP CH 3 C=O COO- CH 3 HC-OH COO- NADH 8 9 10 -O-C=O P P P P P 3-Fosfoglicerato Glicose Lactato GD-Gliconeogênese 9- A uma solução contendo todas as enzimas da glicólise foram adicionados 100 mmoles de glicose, 20 mmoles de ATP, 20 mmoles de ADP, 1 mmol de NAD+ e 10 mmoles de fosfato (Pi). a) Qual seria a quantidade máxima de lactato que poderia ser produzida nestas condições? b) Que outros compostos e em que concentrações apareceriam ao final da reação? P Pi H 2 O NAD+ P P NAD+ P = PO 3 2- P C-O- P Glicose 6-fosfato Di-hidroxiacetona fosfato Gliceraldeído 3-fosfato 1,3 Bisfosfo glicerato Fosfoenol piruvato Piruvato 11 Frutose 1,6-bisfosfato 2-Fosfoglicerato Frutose 6-fosfato HO-CH 2 ATP ADP -O-CH 2 O CH 2 -OH-O-CH2 ATP ADP O -O-CH 2 CH2-O- H 2 C-OH C=O H 2 C-O- HC=O HC-OH H 2 C-O- 1 2 3 4 5 HC-OH H 2 C-O- NADH ATPADP 6 7 COO- HC-OH H 2 C-O- H 2 C-OH HC-O- P COO- CH 2 COO- ADP ATP CH 3 C=O COO- CH 3 HC-OH COO- NADH 8 9 10 -O-C=O P P P P P 3-Fosfoglicerato Glicose Lactato 2Lactato + 6 ATP + 6 H2O ===========➔ Glicose + 6 ADP + 4 H + 11- A Fosfofrutoquinase pode ser inibida alostericamente por ATP, que é a própria coenzima da reação. Explicar esta aparente incoerência. Vo [ATP] (mM) 12- Descrever a regulação da glicólise e da gliconeogênese em função da relação ATP/ADP Positivos Negativos Fosfofrutoquinase 1 Frutose 2,6 bisfosfato ATP - Citrato Frutose 1,6 bisfosfatase Frutose 2,6 bisfosfato 13- Descrever a regulação da glicólise e da gliconeogênese em função da concentração Da Frutose-2,6-bisfosfato 13- Descrever a regulação da glicólise e da gliconeogênese em função da concentração Da Frutose-2,6-bisfosfato Positivos Negativos Fosfofrutoquinase 1 Frutose 2,6 bisfosfato ATP - Citrato Frutose 1,6 bisfosfatase Frutose 2,6 bisfosfato Hexoquinase Glicose + ATP ===========➔ Glicose-6P + ADP Fosfoglicoisomerase Glicose-6P ============ ➔ Frutose -6P Fosfofrutoquinase Frutose-6P + ATP =================➔Frutose-1,6-bisfosfato + ADP Aldolase Frutose-1,6-bisfosfato ===============➔ Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P Triose-fosfato-isomerase Di-Hydroxicetona-P ========================➔ Gliceraldeido-3P Gliceraldeido-3P desidrogenase (2) Gliceraldeido-3P + 2Pi + 2NAD+ ======================= ➔ (2) 2,3-bisfosfoglicerato + 2 NADH + 2H+ 3-Fosfoglicerato-quinase (2) 2,3-bisfosfoglicerato+ 2ADP =====================➔ (2) 3-Fosfoglicerato + 2ATP Enolase (2) 3-Fosfoglicerato ======================➔(2) Fosfoenol-piruvato + 2 H2O Piruvato- quinase (2) Fosfoenol-piruvato + 2ADP =================➔ (2)Piruvato + 2ATP (Citossol) Piruvato desidrogenase (2)Piruvato (mit) + 2HSCoA + 2NAD+ =================➔ (2)Acetil-CoA + 2NADH + 2CO2 (Mit) Glicose +4 NAD+ + 2HSCoA + 2 ADP + 2 Pi =========→ (2)Acetil-CoA +2 CO2 +2 ATP + 4 NADH+ H2O GD-3-Escrever a Equação de Conversão de Glicose a Acetil-CoA ⦁ INTRODUÇÃO Em estudos sobre o condicionamento físico de cinco voluntários foram medidas as concentrações plasmáticas de lactato e creatina quinase no repouso (R). Os voluntários fizeram, a seguir, um exercício exaustivo. No término deste exercício (0 h) e após duas e quatro horas novas medidas foram feitas. Os resultados estão apresentados nos gráficos seguintes. 2 4 6 8 10 [Lactato] (mmol/mL) R Oh 2 h 4 h 12 Tempo após a exaustão 200 R Oh 2 h 4 h Tempo após a exaustão 100 300 400 500 600 Creatina quinase plasmática (U/L) Examinando os dados, um estudante ficou intrigado com (1) a relação entre a intensidade do exercício e a concentração de lactato e (2) com o fato de ter sido dosado lactato e não ácido lático. Também estranhou (3) as concentrações de lactato no repouso e, principalmente, (4) nos tempos 2h e 4h, pois sabia que os voluntários se queixaram de fortes dores musculares no dia seguinte ao exercício. Resultados não expressos no gráfico indicaram que a concentração plasmática de creatina quinase continuou aumentando após 4h do término do exercício. Como estes dados podem ser interpretados? 1. Por que a inibição da piruvato translocase provoca o acúmulo de lactato? Piruvato + NAD+ Lactato + NADH +H+ GD-Gliconeogênese 2. Escrever a reação de formação de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar: 2a. as 5 coenzimas necessárias; 2b. as vitaminas envolvidas; 2c. a sua localização celular. 2. Escrever a reação de formação de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar: 2a. as 5 coenzimas necessárias; 2b. as vitaminas envolvidas; 2c. a sua localização celular.c 2Lactato + 6 ATP + 6 H2O ===========➔ Glicose + 6 ADP + 4 H + b. Escrever a equação geral da conversão de lactato =====➔ glicose GD- Glicolise e Gliconeogênese 1-Escrever a Equação Geral de conversão de Lactato a Glicose 2Lactato + 6 ATP + 6H2O =======➔ Glicose + 6ADP + 6 Pi + 2 H+ 2 Piruvato + 6ATP + 6H2O +2NADH ========➔Glicose + 6ADP +6 Pi + 2 NAD+ + 2H+ Lactato desidrogenase Lactato + NAD+====================➔ Piruvato (citossol) + NADH + ADP + Pi + 2 H+ Translocase Piruvato (citossol) ============================➔ Piruvato (mitocôndria) Piruvato Carboxilase Piruvato (mit) + CO2 + H2O + ATP =================➔ Oxaloacetato + ADP + Pi + H+ (mit) Translocase Oxaloacetato (Mit) ================➔ Oxaloacetato (Cit) Fosfoenolpiruvato-carboxiquinase Oxaloacetato + GTP =================================➔ Fosfoenolpiruvato + GDP + CO2 Enolase Fosfoenol-piruvato + H2O ======================➔ 2-Fosfoglicerato Fosfoglicerato mutase 2-Fosfoglicerato =======================➔ 3-Fosfoglicerato 3-Fosfoglicerato-quinase 3-Fosfoglicerato + ATP ==================➔ 1,3-bisfosfoglicerato+ADP Gliceraldeido-3P desidrogenase 1,3-bisfosfoglicerato + NADH + H+ ============================➔ Gliceraldeido-3P + Pi + NAD+ Triose-fosfato isomerase Gliceraldeido 3-P =======================➔ Dihidroxiacetona-P Aldolase Di-Hidroxiacetona-P + Gliceraldeido 3P ============➔ Frutose-1,6-bisfosfato Frutose 1,6-bisfosfatase Frutose-1,6-bisfosfato + H2O ========================➔Frutose-6P + Pi Fosfoglicoisomerase Frutose-6P ======================➔ Glicose-6P Glicose-6-fosfatase Glicose-6P + H2O =================➔ Glicose + Pi 2 Piruvato + 6ATP + 6H2O +2NADH ========➔Glicose + 6ADP +6 Pi + 2 NAD + + 2H+
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