APS BIOMED_ANÁLISES TOXICOLÓGICAS E AMBIENTAIS

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BIOMEDICINA
ATIVIDADE PRÁTICA SUPERVISIONADA
ANÁLISES TOXICOLÓGICAS E AMBIENTAIS
Implantação
20181
	OBJETIVOS DE APRENDIZAGEM	COMPETÊNCIAS RELACIONADAS
	Analisar aspectos de toxicocinéticas e toxicodinâmica. Diferenciar as principais substâncias de interesse toxicológico.
Formular estratégias para prevenir o contato com toxicantes.
	VI, XXV, XXIV. VI, X.
I, II, IV, XII, XX.
 ATIVIDADES A SEREM DESENVOLVIDAS	
As Atividades Práticas Supervisionadas - APS têm seu detalhamento publicado no ambiente virtual de aprendizagem (Blackboard) da disciplina. São publicadas na primeira quinzena de aulas e devem ser realizadas pelos estudantes até o limite do prazo determinado pelo professor, em conformidade com o calendário acadêmico.
As APS devem ser realizadas pelos estudantes no próprio ambiente virtual de aprendizagem (Blackboard) ou ter seu upload realizado lá, onde terão as rubricas de avaliação disponibilizadas após o encerramento do prazo estipulado para o estudante realizar o upload, ficando registradas em sua integralidade.
ATIVIDADE 1: O aluno deverá ler os textos propostos, discutir em grupos de até 4 pessoas, responder as questões e postar as respostas, na data solicitada.
Texto introdutório: A Organização Mundial da Saúde (OMS) estima que mais da metade de todos os medicamentos é prescrita ou dispensada de forma inadequada, além do fato de metade dos pacientes não usar esses produtos corretamente. Com o crescimento da indústria farmacêutica e, consequentemente, da disponibilidade de medicamentos, a sociedade passa a ter maior acesso a tratamentos, no entanto, o acesso indiscriminado a medicamentos, induz o paciente a se expor a produtos não adequados para a sua situação patológica e/ou fisiológica ou em quantidades excessivas, situação capaz de ocasionar uma intoxicação medicamentosa.
Bibliografia recomendada: “Eventos toxicológicos relacionados a medicamentos no Estado de São Paulo”, disponível em:
http://www.scielo.br/readcube/epdf.php?doi=10.1590/S0034-89102006000700014&pid=S0034- 89102006000700014&pdf_path=rsp/v40n6/14.pdf&lang=pt
ATIVIDADE 2: Responder as questões
1. Quais são as principais causas de intoxicação por medicamentos?
R.: Acidental e suicídio.
2. Escolha um dos princípios ativos da Tabela 3 do artigo e descreva sua utilização clínica e seu DL50.
R.: Diazepan - O diazepam é indicado para alívio para os sintomas da ansiedade, tensão e outras queixas. Utilizado, também no tratamento da agitação associada a desordens psicológicas e/ou psiquiátricas.
O diazepamé um ansiolítico do grupo dos benzodiazepínicos. Tais medicamentos atuam no SNC (Sistema Nervoso Central), possuem propriedades ansiolíticas, sedativas, relaxantes, anticonvulsivantes, além de efeitos amnésicos. 
DL 50 - Em toxicologia, dose letal (DL50) é a dose necessária de uma dada substância ou tipo de radiação para matar 50% de uma população em teste (normalmente medida em miligramas de substância por quilograma de massa corporal dos indivíduos testados).
Com o Diazepan, não foram encontradas dose específica associada com a morte. Poucos são os casos fatais documentados. 
3. No Brasil, os medicamentos são vendidos em quantidades superiores as recomendadas para o tratamento. Na sua opinião, esta situação pode colaborar para a ocorrência de intoxicação, acidental ou não, de crianças e adolescentes? Justifique.
R.: Sim. Pois se os medicamentos fossem vendidos nas quantidades necessárias ao tratamento do paciente, não haveria sobra, consequentemente evitaria o risco de uma intoxicação além do uso acima do tempo determinado, evitando, ainda possíveis acidentes, como a possibilidade de chegar ao alcance de crianças e adolescentes seria menor.
Mesmo com as informações veiculadas, os indivíduos continuam se auto medicando sem uma distinção do que se pode ou não ser consumido ou/e vendido sem a prescrição médica. Fazendo com que alguns pacientes sejam intoxicados, por desconhecerem muitas vezes, como o medicamento que estão administrando agem no organimo.
Apesar de haver um controle maior sobre os medicamentos "Psicotropicos", com a retenção da receita para a obtenção dos mesmos, é possível adquirir em algumas drogarias de maneira ilegal, sem receita, apenas pagando um valor maior. 
No Brasil temos a ANVISA, que é uma agência reguladora tendo como finalidade a de fiscalizar a produção e consumo de produtos submetidos a vigilância sanitária como medicamentos, agrotóxicos e cosméticos. Mesmo assim, é possível adquirir medicamentos sem receita ou prescrição médica. 
4. Defina:
a) Substância tóxica – São substâncias que podem induzir a morte ou danos à saúde humana se ingeridas, inaladas ou por contato com a pele, mesmo em pequenas quantidades. 
b) Xenobiótico - Composto químico estranho a um organismo ou sistema biológico. Pode ser encontrado num organismo, mas não é normalmente produzido ou esperado existir nesse organismo. Exemplos: Pesticidas, inseticidas, agrotóxicos e etc.
c) Medicamento – São substâncias elaboradas, atendendo especificações técnicas obtidos ou elaborados com finalidade profilática, curativa, paliativa ou para fins de diagnóstico. 
d) Por que um medicamento pode ser tóxico ao organismo?
R.: Como todo medicamento tem um poder tóxico, dependendo da dose, as substâncias químicas, ainda que produzidas pelo nosso organismo, todas elas possuem um limite onde deixam de ser saudáveis e se tornam toxicas. 
Devido a fatores genéticos, o metabolismo do medicamento pode ser feito de uma forma mais lenta, causando um acumulo do mesmo no organismo, causando assim a toxicidade. Pode acontecer, também, quando dois ou mais medicamentos são administrados de forma simultânea e interagem entre si, formando compostos químicos tóxicos ao organismo. Existe também o caso de duplicação, quando dois medicamentos com o mesmo ingrediente ativo são administrados simultaneamente, causando uma duplicação do composto, podendo então gerar uma toxicidade. 
ATIVIDADE 3: Estudos de Caso 1 e 2 – Em grupo, estudar o caso e responder as questões.
Estudo de Caso 1: C.A., feminino, 18 anos, estudante, solteira, nascida em Bristol (sudoeste da Inglaterra). Foi encontrada pela equipe de resgate desmaiada em cima de um banco de praça e transportada imediatamente para um pronto socorro, sendo necessário uso de ventilação artificial. Ao lado da paciente encontrava-se um pacote plástico com alguns comprimidos, identificados como benzodiazepínicos e também uma pistolinha de brinquedo contendo vestígios de vodka. O estado constatado era de anestesia, hálito alcoólico, incapacidade de coordenação dos movimentos musculares voluntários e insuficiência respiratória grave.
Questões Norteadoras – Estudo de Caso 1
1. As sintomatologias associada aos dados da cena permitem suspeitar de intoxicação etanólica associada ao uso de benzodiazepínicos? Inclua na sua resposta o mecanismo de ação central do álcool e dos benzodiazepínicos.
R: Sim. Os benzodiazepínicos e o álcool são considerados substâncias psicoativas que atuam modificando, indiretamente, a passagem de cloro através dos receptores GABA para o interior das células nervosas, o que as tornam hiperpolarizadas e dificulta a comunicação neuronal, diminuindo o ritmo de atividade do Sistema Nervoso Central (SNC). Portanto, o álcool pode potencializar a ação do benzodiazepínico causando acentuado comprometimento das funções psíquicas e a diminuição da atividade dos sistemas cardiovascular e respiratório, o que pode levar a uma depressão cardiorrespiratória grave podendo resultar em coma e até a morte. 
2. A administração de lavagem gástrica foi realizada no caso, porém sem sucesso na reversão do caso. Por que isto ocorreu?
R: Pois tanto os benzodiazepínicos como o etanol são substâncias depressoras do SNC, nos quais afetam diversos neurotransmissores no cérebro, entre eles, o GABA – neurotransmissor inibitório. Logo, por possuir uma ação mais abrangente no SNC, a lavagem gástrica não poderia ser uma solução para esse caso.
3. Flumazenil foi administrado e a insuficiência respiratória é revertida.Explique o mecanismo de ação deste antidoto.
R: O flumazenil é um antagonista benzodiazepínico que bloqueia especificamente, por inibição competitiva, os efeitos centrais das substâncias que agem via receptores benzodiazepínicos. 
Estudo de caso 2: R.C.L. 34 anos, é preso por suspeita de furto, seguido de morte. A suspeita é de crime facilitado por drogas. O indivíduo foi encontrado 4 dias após o relato de latrocínio, em pronto-socorro apresentando pressão de 168X95 mmHg, FC 180 bpm, pupilas em midríase, temperatura em 39⁰C, rigidez muscular. Paciente em quadro eufórico, agitado, delirante e com tremores. No pronto-socorro o paciente entre em convulsões. A convulsão é controlada com diazepam 0,2 mg/Kg iv. Apresentava malformações nasais e resíduo de pó branco nas fossas nasais. As suspeitas são de intoxicação por: cocaína e crack, uma amostra de urina e cabelo são coletadas.
Figura 1 - Cromatograma branco contaminado com 10ng/mg de cocaína, benzoilecgonina e cocaetileno analisada por cromatografia gasosa e espectofotometro de massa.
Figura 2 - Cromatograma do caso sobreposto ao branco 10ng/mg de cocaína, benzoilecgonina e cocaetileno
analisada por cromatografia gasosa e espectofotometro de massa.
Benzoilecgonina urinário: negativo 
Questões Norteadoras – Estudo de Caso 2
1. Porque se deve fazer a descontaminação da matriz de cabelo como pré-tratamento? 
R: A descontaminação da amostra de cabelo deve fazer-se pelos eguintes motivos: 
a) eliminar os resíduos de produtos utilizados para o cabelo (como champô, ceras, lacas);
b) remover suor, sebo ou poeiras pelo fato de fato da droga poder aderir à matriz a partir do ambiente externo, o que pode contribuir para resultados falsos positivos.
2. Porque se deve realizar a digestão das fibras do cabelo com uréia e tioglicolato antes de realizar a extração metanólica?
R: Os desnaturantes como a ureia e tioglicolato, contribuem na extração capilar de fármacos em meio aquoso. Sendo expostos a estes agentes resulta na quebra de ligações de hidrogênio e dissulfureto no cabelo. Esta abordagem provou ser particularmente bem sucedida para a extração de benzodiazepínicos.
3. O paciente tem confirmado a intoxicação por cocaína e seus metabólitos benzoilecgonina e cocaetileno?
R: Sim. Pois de acordo com a cromatografia gasosa e espectofotometro de massa, a amostra do paciente (cabelo) apresenta picos de cocaína e seus metabólitos no mesmo tempo que o padrão, observou isso no gráfico sobreposto. Logo, isso sugere que o paciente possui essas substâncias, porém numa absorbância menor que a padrão. 
4. Por que o resultado na urina deu negativo?
R: O teste utilizado usando urina como amostra é um teste qualitativo, que fornece apenas dados preliminares que deve ser confirmado por outros métodos mais específicos e sensíveis como a cromatografia. Por isso, o mesmo não apresenta tanta eficácia. Além disso, o benzoilecgonina tem uma meia-vida biológica curta (5-8 horas), dependendo do tempo em que essa amostra foi analisada, o metabólito já poderia ter sido eliminado.Para entender melhor o caso:
O sangue não é uma matriz de escolha de preferência na toxicologia forense devido a sua curta janela de detecção, além de ser invasivo e exigir o preparo da amostra. Apesar da saliva e da urina serem matrizes que não requerem nenhuma preparação de extração e enriquecimento da amostra, são matrizes de fácil adulteração com uma janela de detecção de poucos dias, entre dois a quatro dias. Assim, deve ser realizada a coleta de cabelo para determinação da presença de drogas de abuso em HLPC. De fácil coleta, de fácil confirmação para um re-teste e de difícil adulteração. O cabelo incorpora bioativos por longo tempo de exposição, indicando se tratar de um possível usuário crônico da droga. Inicialmente a amostra de cabelo sobre um pré-tratamento de descontaminação com solvente combinada com lavagem com água e sabão seguido de digestão da fibra do cabelo com uréia e tioglicolato, que rompe as pontes dissulfeto da estrutura capilar. Posteriormente passar pelo processo de extração com solventes, normalmente metanol acidificado em sonicação. O extrato metanólico é submetido ao HPLC.
A toxicologia para validação do método analítico se utiliza de valores cut-off. Valores abaixo dos cut-off são considerados não detectáveis, acima positivos.
Sugestão de valores cut-off
Cocaina 0,5 ng/mg
Benzoilecgonina 0,05 ng/mg
Cocaetileno 0,05 ng/mg
Alunos: 
Alfredo Fernandes Siqueira - 2018 202724
Deisy Dantas da Cruz - 2018101367
Roberta Carvalho Saraiva - 2019202135