ELISA TESTE

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TESTE
ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
Técnica Imunoenzimática utilizada para detecç ão de ANTICORPO ( no soro) ou ANTÍGENO, para verificar se o 
indivíduo está ou se já esteve infectado, identificando quanto de Antígeno (ELISA DIRETO) ou de Anticorpo (ELISA 
INDIRETO) que ele tem no sangue. 
Aplicação do teste
A Ferramenta Imunológica dessa 
técnica é o Anticorpo ligado à Enzima. O 
anticorpo será marcado com uma 
enzima na porção amina (Fosfatase 
alcalina, peroxidase ou ß galactosidase) 
Essa técnica é muito usada no 
diagnóstico do HIV, mas também usada 
para outras doenças e para ver se a 
vacina deu certo. 
É uma técnica de baixo custo e para ser 
realizada são usadas placas com poços e nele são realizadas reações
É UMA TÉCNICA COLORIMÉTRICA . 
HIV (metodologia)
 Indireto: 
Técnica: 
Primeiro é feita a Coleta de Sangue do paciente, qu e é c entrifugado, pegando o plasma, que é onde 
está o anticorpo, podendo ser dosada também a célula de memória. 
No poço da placa de poliestireno é colocado o antígeno, no caso foi usado GP120 que é uma pr oteína 
presente na estrutura do HIV, com um fixador. D epois se adiciona ao poço a amostra de plasma do 
indivíduo testado
OBS: Se o Indivíduo tiver o Anticorpo Específico, ele va i se ligar ao antígeno pela porção Fab e assim, 
mesmo após a lavagem o anticorpo vai ficar aderido à placa. C aso contrário, após a lavagem só 
estará aderido à placa o antígeno primeiramente colocado 
METODOLOGIA CONTINUAÇÃO
É produzido um Anticorpo Anti Porç ão Fc do Anticorpo Anti GP120, por exemplo, Anti-IgG. Esse 
Anticorpo é adicionado ao poço, juntamente com uma Enzima, para que s e ligue ao Anticorpo Anti-
GP120. 
É feita outra Lavagem. 
OBS2: Se estiver contido no poç o o Anticorpo Anti-GP120 o novo anticorpo com a enzima vai se ligar 
e ficar aderido na placa. Se não tiver Anticorpo Anti-GP120, o Anti Anticorpo não sei se ligar e vai 
sair do poço, junto com a enzima, durante a lavagem 
Adiciona-se o Substrato daquela enzima junto com um Cromógeno. 
Realiza-se a terceira lavagem. 
OBS3: Se no poço tiver Anticorpo Anti-GP120 ligado ao Anti Anticorpo com a enzima, na adição do 
substrato vai haver uma reação Alterando o Cromógeno e fazendo com que ele produza uma 
coloração. Se não tiver os anticorpos e a enzima, não vai ter reação e não vai gerar cor 
RESULTADO: Se houver reação Enzima-Substrato altera cromógeno, gera cor e o teste é considerado 
Positivo para HIV. Se não houver reação, não muda a coloração e o teste é considerado Negativo para 
HIV.