Teste de Diagnóstico Molecular para HPV

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Trabalho de Diagnóstico Molecular baseado no artigo: Identificação do 
papilomavírus humano por biologia molecular em mulheres assintomáticas 
1) Qual a importância deste teste para a infecção/doença escolhida no artigo? 
Entre os dois métodos de tipagem viral do DNA do HPV, observou-se que os casos 
que testaram positivo para a CH II não foram os mesmos que testaram positivo pelo 
método PCR. Isto pode ser explicado pela diferença entre os métodos, já que o CH 
II utilizado testa apenas tipos de HPV de alto grau (16, 18 entre outros) e o PCR 
identifica HPV de alto grau e de baixo grau, ou seja, todos os tipos de HPV presentes 
nas células cervicais. 
2) O protocolo de teste é aplicável na rotina laboratorial? Explique se sim ou não. 
Não pois o presente artigo faz uma comparação entre duas técnicas utilizadas para 
detecção do papilomavirus humano para mostrar qual das duas é mais funcional 
para o caso de mulheres assintomáticas. 
3) Escreva sucintamente as etapas da PCR até o resultado. 
 Desnaturação: o DNA genômico contendo a sequência a ser amplificada é 
desnaturado por aquecimento a cerca de 95°c por cerca de 30 segundos. A 
dupla fita é aberta (desnaturada), tornando-se uma fita única. 
 Anelamento ou hibridização: após a separação das fitas, um par de 
iniciadores ou primers (uma fita de DNA específica para o gene que se quer 
estudar) complementam a fita oposta da sequência de DNA a ser 
amplificada. Ou seja, um deles é complementar à sequência em uma fita da 
dupla-hélice de DNA e o outro é complementar à sequência na outra fita. O 
molde é determinado pela posição dos iniciadores que se anelam a fita. Essa 
etapa ocorre a uma temperatura de 60°c. 
 Extensão ou polimerização: com o molde já identificado, a enzima DNA-
polimerase adiciona as bases complementares, formando uma nova fita e 
então tem-se novamente a duplicação da fita de DNA. Esse processo 
acontece a uma temperatura de 72°c. 
 O ciclo inteiro é então reiniciado, os produtos do primeiro ciclo de replicação 
são então desnaturados, hibridizados e novamente replicados com DNA-
polimerase. O procedimento é repetido muitas vezes até que o nível 
desejado de amplificação seja obtido. 
REFERENCIA 
https://kasvi.com.br/3-etapas-pcr/ 
https://www.scielosp.org/pdf/rsp/2002.v36n1/95-100/pt 
 
ALUNA: Mariana Regina Silvana Sasso 
MATRICULA: 19000109