TED - MÉTODOS DE ESTUDO E TRATAMENTO DAS DOENÇAS GENÉTICAS (1)

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1. Descreva detalhadamente: 
a. Técnica do DNA recombinante para clonagem genica; 
Resposta: A técnica do DNA recombinante permite a manipulação do DNA, a título 
de exemplo, produção de insulina humana. Objetiva produzir copias idênticas de um 
determinado trecho de DNA selecionado (clonagem genica). O método de estudo e 
tratamento das doenças genicas, é feito a partir das enzimas de restrição que 
reconhecem e cortam fitas duplas de DNA em sequencias especificas. 
1. Corte do plasmídeo por enzima de restrição 
2. Corte do DNA a ser clonado com a mesma enzima de restrição 
3. União do plasmídio com o DNA a ser clonado = DNA recombinado (plasmídio + 
DNA a ser clonado) 
4. Introdução do DNA recombinante na bactéria hospedeira 
5. Bactéria hospedeira com DNA recombinante se multiplicação. 
b. Técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) 
Resposta: O PCR vai ser a amplificação de um segmento específico de DNA dentro 
de um genoma - “fotocopiadora” molecular. É feito bilhões de copias de sequencias 
especificas de DNA. O aparelho utilizado para esse método é termocicladores 
(temperatura e ciclos), ou seja, alterações de ciclos pela temperatura. Processo a 
ser realizado: dentro do eppendorf é adicionado primeiramente uma fita de DNA – 
molde, em seguida 1 par de primers (são iniciadores, identificam a parte correta 
para clonagem), Taq polimerase (faz o papel de clonar através dos primes), é 
adicionado dNTPs (necessário para formar novas fitas), íons magnésio (como forma 
de energia) e solução tampão (para evitar desnaturação, oxidação...). 
 
Ted Odontogenética 
Aluna: Ingrid de Carvalho Maranhão 
S3 – Benfica – Métodos de estudo e tratamento das doenças genéticas 
Etapas no termociclador 
1. Desnaturação (95 C) 
2. Anelamento (55 – 65 C) 
3. Extensão (72 C) 
Número de ciclos: 25-40