Material de coleta, tipos de coleta e coloração

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Citopatologia 
Material de coleta, tipos de coleta e coloração 
 
Materiais de coleta 
-Espéculo vaginal 
 
- Escova endocervical: 
coleta de material oriundo do canal 
endocervical 
 
-Espátula de Ayre: 
Coleta de material ectocervical 
 
- Lâminas de vidro: 
 
- Gel supragel (gel de água): 
Facilita a introdução do espéculo 
 
-Fixador citológico 
Fixação 
 
- Béquer com álcool a 95% 
Fixação 
 
 
Tipos de coleta 
Coleta cérvico-vaginal: 
Raspado de células colhidas com espátula de 
madeira ou plástico. 
Será necessário: 
- Espéculo; 
- Espátula de Ayre; 
- Gaze umedecida ou algodão (para 
assepsia); 
- Lâmina; 
- Escova endocervical; 
- Gel separador 
Procedimento: 
1- Confirmar as informações contidas na 
solicitação médica (nome, idade, DUM, 
queixas, etc...); 
A paciente deve se deitar em uma 
marca ginecológica e estender as 
pernas (“abrir as pernas”); 
 
 
2- Iluminar a região da pelve com 
lâmpada.; 
3- Introduzir o espéculo e afastar as 
paredes vaginais.; 
 
4- Visualizar o colo do útero; 
5- Introduzir a Espátula de Ayre colocada 
no orifício central onde gira-se em 
360° para colher material ectocervical. 
 
 
6- Rapidamente o material deve ser 
estendido na lâmina levemente, e esta 
deve estar identificada com todas as 
informações do paciente (Registro e 
abreviatura) 
 
7- Após a coleta da região ectocervical 
introduzir escova endocervical no 
canal e girar 1 a 2 vezes em 360° e 
vagarosamente distender sobre a 
lâmina. 
 
 
 
 
Citologia em meio líquido 
 
Segue o mesmo padrão da coleta 
cérvico-vaginal, porém utiliza uma 
espátula que colhe ambas as regiões 
(ectocervical e endocervical) 
 
Materiais necessários: 
- Espátula de Ayre modificada para Meio 
Líquido 
- Recipiente com liquido de preservação 
celular 
- Equipamentos apropriados para realização 
da lâmina em monocamada. 
Técnicas: 
- ThinPrep Pap Test© 
- MonoPrep Pap Test© 
- SurePath Pap Test© 
 
Procedimento: 
 
 
 
 
 
 
 
Fixação 
Função: preservar as características celulares 
- Deve ser imediata após a coleta 
- Álcool 95%: preserva a lâmina por até 60 
dias; 
- Spray aerossol (polietileno glicol): preserva a 
lâmina por 72 horas; 
- Tempo mínimo para fixação de 15 minutos. 
Coloração 
- Papanicolau 1942: coloração tricromática 
- Componentes: 
 1- Hematoxilina de Harris (filtrada, basofílica): 
cora o núcleo; 
 2- Orange G6 (corante ácido): corante de 
queratina; 
 3- EA: formado por dois corantes → 
solução de eosina (facilita a coloração do 
citoplasma) e o verde luz (corante básico 
que cora macromoléculas como 
glicoproteínas, carboidratos, muco secreções, 
proteoglicanos, etc.). 
 
Resultado: 
- Núcleo: Azul, preto; 
- Células queratinizadas: laranja ou amarelo; 
- Células não queratinizadas: verde, azulado; 
- Hemácias: laranja intenso 
Coloração básica de 
Papanicolau: 
1) Remover fixador em álcool 50% - 2 min 
2) H2O – 1 min (hidratar a lâmina para facilitar 
a coloração / células absortivas) 
3) Hematoxilina de Harris – 5 min 
4) H2O – 2 min 
5) HCL 0,5% - 10 a 20 seg 
6) H2O – 2 min 
7) Álcool 30% - 1 min 
8) Álcool 50% - 1 min 
9) Álcool 70% - 1 min 
10) Álcool 96% - 1 min 
11) Orange G6 – 1 min 
12) Álcool 96% - 30 seg 
13) Álcool 96% - 30 seg 
14) EA (36/50/65) – 2,5 min 
15) Álcool 96% - 1 min 
16) Álcool 96% - 1 min 
17) Xilol – 1 min (solução de limpeza, retira os 
restos de corante). 
18) Xilol – 1min 
19) Xilol – 1 min 
20) montagem e secagem 
 
Coloração Papanicolau 
simplificada 
1) Remover fixador spray – álcool 50% - 
10 minutos 
2) Água – 1 minuto 
3) Hematoxilina- 15 segundos 
4) Água corrente 
5) Álcool 99,5% - 2 minutos (2 X) 
6) Orange G 6 – 5 mergulhos 
7) Álcool 99,5% – 2 minutos (2 x) 
8) EA (36/50/65) – 4 minutos 
9) Álcool 99,5% – 2 minutos (2 x) 
10) Xilol + álcool – 2 minutos 
11) Xilol P. A – 2 minutos 
Cores das células: 
-Azul: cianofílica; 
- Rosa: eosinofílica; 
- Vermelha: orangeofílica 
Obs.: O núcleo pode ser classificado em: 
basofílico intenso (cromatina envelhecida) e 
basofílico leve (produzindo RNAm). 
 
Montagem 
- Função de proteger o material 
- Deve ser mixível com o clarificante (xilol) 
- Meio entre a lâmina e a lâmínula 
- Colas translúcidas utilizadas: Bálsamo de 
Canadá, Entellan, etc 
 
Secagem: 
A secagem da lâmina dura 8 horas. É o 
tempo necessário para que o Xilol evapore