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Esfregaço citológico (coleta, fixação, coloração e montagem) - Citopatologia

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O exame de citologia cérvico-vaginal é 
constituído por diversas etapas. Essas etapas devem 
ser realizadas sob rígido e minucioso controle de 
qualidade interno e externo, levando ao diagnóstico 
fidedigno que represente a real condição citológica 
da paciente. 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS PARA A 
COLETA CITOLÓGICA 
 Maca ginecológica; 
 Espéculo; 
 Espátula de Ayre; 
 Escova endocervical; 
 Lâmina de vidro com extremidade fosca; 
 Formulário para a requisição de exames; 
 Par de luvas; 
 Fixador apropriado; 
 Local para acondicionamento das lâminas; 
 Jaleco. 
PRÉ-REQUISITOS PARA COLETA 
 Evitar relações sexuais, uso de duchas ou 
medicamentos vaginais e anticoncepcionais 
locais nas 72 horas anteriores ao exame; 
 Durante a idade reprodutiva, os esfregaços 
devem ser obtidos preferencialmente no meio do 
ciclo menstrual; 
 Não estar no período menstrual; 
 A coleta poderá ser realizada durante 
sangramento fora do período menstrual. 
 
PROCEDIMENTOS PARA COLETA 
 Cadastrar a paciente: dados pessoais e clínicos/ 
registro. 
 Nome e idade; 
 DUM ou da menopausa; 
 Anamnese (cirurgias ginecológicas, gravidez, 
amamentação, data do último exame e o 
resultado, queixas); 
 Uso de medicamentos; 
 Existência de uma lesão. 
LOCAIS DE COLETA 
 Vulva, clitóris, grandes lábios, pequenos lábios, 
hímen, glândulas de Bartholin, vagina, fundo de 
saco, ectocérvice, endocérvice, endométrio, etc. 
 
COLETA DO ENDOMÉTRIO 
 Raspado com escova maior; 
 Aspiração com cânula; 
 Aspiração com pipeta de Papanicolaou; 
 Lavados endometriais (Gravelee jet wash). 
 
esfregaço citológico 
AULA 3 - CITOPATOLOGIA 
 coleta, fixação, coloração e montagem 
 
 
 
 
 
COLETA DO CORPO DO ÚTERO, 
TROMPAS E OVÁRIOS 
 Todos coletados com agulha fina guiada por 
ultrassonografia. 
PREPARO DA LÂMINA 
 Lâmina com extremidade fosca; 
 Identificação correta da lâmina: 
 Iniciais da paciente 
 Idade 
 Protocolo do exame realizado pela paciente 
(atribuído pelo laboratório) 
TIPOS DE COLETA 
 Ectocérvice → Células escamosas. 
 Endocérvice → Células endocervicais. 
 Fundo de saco lateral → Citologia hormonal. 
FUNDO DE SACO 
 Fundo de saco lateral → Citologia hormonal 
 Esse tipo de coleta não é indicado para a 
realização do citopatológico. 
 Fundo de saco posterior → Células descamadas 
naturalmente das mucosas vaginais e cervicais e 
raramente células endometriais, tubárias, 
ovarianas ou peritoneais. 
 As coletas dessas regiões são ricas em muco, 
leucócitos, macrófagos e detritos celulares 
necróticos. Pobre em células malignas quando 
existe um tumor cervical. 
 
 
CERVICAL 
 Raspa-se a mucosa de modo a soltar as 
células da ectocérvix e da endocérvix. Oferece 
melhores resultados para a detecção de células 
displásicas e neoplásicas do que a simples colheita 
das secreções vaginais. 
 Ectocérvix → Células escamosas. 
 Endocérvix → Células endocervicais. 
 
 
COLETA 
 
 
 
 
 ESPÉCULO 
 
 
 
 
COLETA ECTOCERVICAL 
 Espátula de Ayre: a espátula foi especialmente 
projetada para esse fim e foi desenvolvida pelo 
médico canadense Ernest Ayre, na década de 
1940; 
 Na coleta, é necessário realizar uma rotação 
completa de 360º, sem traumatizar a mucosa, 
para obter material suficiente; 
 O material deve ser espalhado sobre a lâmina de 
modo regular, com boa espessura e rapidamente 
para evitar sua dessecação. 
 
 
 
 
 
 
 
 COLETA ENDOCERVICAL 
 Coleta mais apropriada para encontrar lesões 
situadas na endocérvice; 
 É necessário realizar uma rotação completa, sem 
traumatizar a mucosa, para obter material 
suficiente; 
 Pequenas hemorragias podem ocorrer após a 
coleta. 
 
 
 
 
FIXAÇÃO 
 Fixador – mantém a forma e a estrutura dos 
elementos constituintes das amostras para estudo 
citológico. Evita o dessecamento. 
 O dessecamento causa deformidade das 
células e altera as afinidades tintoriais. 
 O fixador recomendado para preparações 
citológicas é o etanol absoluto ou etanol a 95% 
devido à sua eficiência, baixo custo e ausência 
de toxicidade; 
 Fixadores tipo spray – o álcool usado nestes 
fixadores não é o etanol, mas sim um de seus 
substitutos. 
FIXAÇÃO COM ÁLCOOL 
 O mais utilizado é o etanol a 95%; 
 Fixação imediata; 
 Tempo de fixação: 15 a 30 minutos. 
FIXAÇÃO COM AEROSSOL (SPRAY) 
 Consiste em álcool isopropílico (fixador) e o 
polietilenoglicol (filtro protetor); 
 Risco de enxotar as células da lâmina, de lesá-
las ou de provocar artefatos de imagens difíceis 
de interpretação; 
 Deve ser imediata após a coleta, durante alguns 
segundos; 
 Distância de aproximadamente 20 cm entre o 
spray e a lâmina. 
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU 
 Em 1942, George Papanicolau desenvolveu 
sua coloração tricomática. 
 Hematoxilina de Harris (aquoso) – cora o núcleo 
e bactérias. 
 corante base que vai corar estruturas ácidas. 
 Orange G6 (OG6) – cora o citoplasma, hemácias 
e queratinização. 
 corante ácido que vai corar estruturas bases. 
 EA de Gill’s (alcoólico) – cora o citoplasma. 
 
 
 
 
 ETAPAS 
1. Hidratação em água (1 min); 
2. Hematoxilina de haris (15 seg.); 
3. Lavagem em água corrente (1 min); 
4. Álcool absoluto (1 min); 
5. Álcool absoluto (1 min); 
6. Orange G6 (5 mergulhos); 
7. Álcool absoluto (1 min); 
8. Álcool absoluto (1min); 
9. EA 36 ou 65 (4 min); 
10. Álcool absoluto (1 min); 
11. Álcool absoluto (1 min); 
12. Xilol (2 min). 
XILOL 
 Torna as células translúcidas. 
 Não é um corante, é um diafanizador. 
 Participam da etapa de clareamento ou 
diafanização. 
RESULTADOS DA COLORAÇÃO DE 
PAPANICOLAOU 
 Núcleo – azul/cinza/preto. 
 Citoplasma (não queratinizado) – verde/azulado. 
 Citoplasma (queratinizado) – rosa/laranja. 
 Hemácias – laranja/rosa. 
 
MONTAGEM 
 O meio de montagem é a substância que 
funciona como um vínculo permanente entre a 
lamínula e a lâmina. Deve ser mixível com o agente 
clarificante. 
 Bálsamo do Canadá ou Entelan; 
 Verniz vitral. 
LEITURA DAS LÂMINAS 
 A varredura deve ser sistemática; 
 Vertical ou horizontal 
 A vertical permite determinar melhor as 
zonas já examinadas. 
 A varredura deve ser feita com a objetiva de 10x; 
 As células e/ou zonas atípicas ou duvidosas são 
submetidas a exame mais minucioso com a 
objetiva de 40x. 
 
 
ESFREGAÇO CITOLÓGICO 
 As secreções obtidas contêm: 
 Células descamadas das mucosas vaginais 
e cervicais 
 Muco 
 Leucócitos e macrófagos 
 Detritos celulares necróticos em vias de 
eliminação 
 Mais raramente, células endometriais, 
tubárias e ovarianas 
 Bactérias, fungos, vírus e parasitas 
ESFREGAÇO DA ECTOCÉRVICE 
 
 
 
 
 ESFREGAÇO DA ENDOCÉRVICE

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