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UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO ESCOLA SUPERIOR DE AGRICULTURA LUIZ DE QUEIROZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – LCB LCB0208 - BIOQUÍMICA EXERCÍCIOS RESOLVIDOS FOSFORILAÇÃO OXIDATIVA EXERCÍCIOS 1. Quais compartimentos mitocondriais contribuem para a ocorrência da fosforilação oxidativa? R.: A fosforilação oxidativa integra a matriz mitocondrial, a membrana interna e o espaço inter membranas da mitocôndria. 2. Os elétrons transportados pela cadeia transportadora de elétrons (CTE) do cloroplasto são provenientes da fotólise da água e são aceptados por uma molécula de NADP+, formando NADPH. Apresente os doadores de elétrons e o aceptor final dos mesmos referentes à CTE da mitocôndria. R.: Na cadeia transportadora de elétrons da mitocôndria, os elétrons são normalmente provenientes da oxidação de NADH e FADH2. Esses elétrons, ao fim do processo, são capturados pelo gás oxigênio, reduzindo-o à água. 3. Por que uma molécula de FADH2 produz uma menor quantidade de ATP do que uma molécula de NADH? R.: FADH2, ao contrário do NADH, é oxidado no complexo II da cadeia transportadora de elétrons, de modo que uma menor quantidade de prótons é bombeada da matriz mitocondrial ao espaço intermembranas. Assim, menos prótons são transportados, via ATP sintase, do espaço intermembranas à matriz mitocondrial, o que confere uma menor proporção de ATP gerado por molécula de FADH2. 4. Moléculas podem ser transportadas através de membranas por diferentes mecanismos. Apresente o mecanismo de transporte de fósforo inorgânico do espaço intermembranas para a matriz mitocondrial e indique como isso favorece a formação de ATP. R.: O fósforo inorgânico, presente no espaço intermembranas, é transportado com o auxílio de uma proteína transportadora via simporte, juntamente com H+, em direção à matriz mitocondrial. Na matriz, esse fósforo inorgânico é utilizado pela ATP sintase para fosforilar uma molécula de ADP, formando ATP. 5. Com base no diagrama abaixo, referente à fosforilação oxidativa, explique como o sentido de transferência de elétrons é estabelecido ao longo dos complexos proteicos da membrana interna. R.: O sentido de transferência de elétrons é único e estabelecido pelo potencial redox dos complexos proteicos. Pelo diagrama, percebe-se que os elétrons são transportados de moléculas de menor potencial redox (menor afinidade por elétrons) para complexos de maior potencial redox (maior afinidade por elétrons). 6. Destaque a importância da oxidase alternativa para plantas termogênicas (plantas capazes de elevar a temperatura de seus tecidos) e para alguns fungos, como o Moniliophthora perniciosa, causador da vassoura de bruxa do cacaueiro. R.: A oxidase alternativa em plantas termogênicas é capaz de dissipar energia na forma de uma grande quantidade de calor, o qual é responsável por volatilizar compostos orgânicos, que podem promover a atração de agentes polinizadores. Para alguns fungos, a oxidase alternativa tem grade importância em sua sobrevivência, uma vez que alguns fungicidas têm como alvo apenas os complexos III ou IV da CTE. Apesar de uma provável uma menor multiplicação do fungo e consequente menor disseminação, o mesmo continuará a realizar suas atividades metabólicas, haja vista a manutenção da produção de uma certa quantidade de ATP, o que favorece a continuidade do patógeno na lavoura. 7. Além da oxidação de açúcares para a síntese de ATP, outras moléculas também são capazes de gerar ATP através da fosforilação oxidativa. Indique quais são elas e como são responsáveis pela geração de ATP. R.: A oxidação de proteínas e lipídeos também é responsável pela síntese de ATP. Através da oxidação dessas moléculas, tem-se a redução de aceptores de elétrons (NAD+ e FAD+ a NADH e FADH2, respectivamente), os quais funcionam como doadores de elétrons para a CTE na mitocôndria, onde ocorre o bombeamento de prótons, seguido da geração de ATP. 8. As moléculas de NADH e FADH2 produzidas pelo ciclo do ácido cítrico passam pela fosforilação oxidativa, a qual necessita da atuação direta do oxigênio para capturar os elétrons provenientes dessas duas moléculas. No entanto, no ciclo de Krebs, apesar de não haver o uso de oxigênio, é uma via metabólica que ocorre apenas em indivíduos aeróbios. Explique a razão disso. R.: A fosforilação oxidativa contribui para a manutenção do ciclo de Krebs através do fornecimento de NAD+ e FAD+, cujas formas reduzidas são oxidadas na CTE da mitocôndria 9. Dentre as funções do complexo II, assinale a alternativa correta: a. Oxidação e redução de substratos b. Oxidação e prevenção de extravasamento elétrons. c. Oxidação do succinato e formação de ubiquinol d. Todas as alternativas anteriores. Alternativa d) No complexo II, existe a oxidação do succinato e redução da ubiquinona, formando ubiquinol. Além disso, apesar de apresentar heme b, não existem evidências de que o mesmo atue no transporte de elétrons, mas sim no contexto de evitar o extravasamento dos mesmos, o que poderia promover a formação de espécies reativas de oxigênio e ocasionar danos à cadeia transportadora de elétrons. 10. Em relação ao complexo IV, assinale a alternativa correta: a. Utiliza elétrons do citrocromo c e consume prótons da matriz mitocondrial para a redução de O2 a H2O b. É incapaz de realizar a transferência de elétrons ao longo de sua estrutura proteica c. Sua função depende da oxidação do succinato d. Nenhuma das alternativas anteriores. Alternativa a) Esse complexo apresenta grupos heme responsáveis pelo transporte de elétrons; sua função não depende exclusivamente da oxidação do succinato que ocorre no complexo II, já que NADH é oxidado no complexo I e seus elétrons são doados ao O2 pelo complexo IV.
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