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Sandy Caroline • NUTRIÇÃO E CULTURA DE MICRO -ORGANISMOS As reações metabólicas envolvem a liberação de enérgica (catabólicas), como o consumo de energia (anabólicas) NUTRIÇÃO MICROBIANA A nutrição microbiana corresponde à parte da fisiologia microbiana que envolve o fornecimento de monômeros que as células necessitam para o crescimento Macronutrientes são necessários em grandes quantidades, e os micronutrientes são requeridos em pouca quantidade CARBONO E NITROGENIO Uma célula normal é composta por cerca de 50% de carbono, sendo o carbono o principalmente elemento em todas as classes de macromoléculas Após o carbono, o elemento mais abundante nas células é o nitrogênio (12%) FATORES DE CRESCIMENTO O nitrogênio é encontrado na natureza nas formas orgânica e inorgânica, mas, a maior parte do nitrogênio disponível encontra-se sob a forma de compostos inorgânicos, como a amônia, o nitrato ou o nitrogênio OUTROS MACRONUTRIENTES: P,S,K,MG,CA,NA O Fósforo é encontrado sob a forma de fosfatos orgânicos e inorgânicos, sendo requerido pela célula para a síntese de ácidos nucleicos e fosfolipídios O enxofre é necessário devido ao seu papel estrutural dos aminoácidos cisteína e metionina, e por estar presente em vitaminas Todos os organismos requerem potássio; O magnésio atua na estabilização de ribossomos, membranas e ácidos nucleicos, sendo também necessário à atividade de muitas enzimas O cálcio auxilia na estabilização das paredes celulares de muitos microrganismos e desempenha papel essencial na termoestabilidade de endósporos FATORES DE CRESCIMENTO São compostos orgânicos que compartilham com os metais traço o fato de serem necessários somente em pequenas quantidades Elementos traço: são os vários outros metais necessários ou metabolizados pelos microrganismos Os fatores de crescimento incluem vitaminas, aminoácidos, purinas e pirimidinas MEIOS DE CULTURA Correspondem às soluções nutrientes utilizadas para promover o crescimento de microrganismos em laboratório CLASSES DE MEIOS DE CULTURA Meios definidos e meios complexos Meios definidos: são preparados pela adição de quantidades precisas de compostos químicos inorgânicos ou orgânicos altamente purificados à água destilada Um meio definido simples geralmente apresenta uma única fonte de carbono A natureza da fonte de carbono e a sua concentração dependem do organismo a ser cultivado Meios complexos: empregam digestos de produtos animais ou vegetais, como a caseína, carne, soja, células de leveduras ou outras Sandy Caroline • substâncias altamente nutritivas, porém impuras Uma importante limitação no uso de um meio complexo consiste na perda do controle em relação a sua precisa composição nutricional Frequentemente os meios de cultura são produzidos de modo a tornarem-se seletivos ou diferenciais Meio de cultura: solução aquosa contendo vários nutrientes adequado ao crescimento de microrganismos Um meio seletivo contém compostos que inibem seletivamente o crescimento de alguns microrganismos, mas não o de outros Já o meio diferencial corresponde aquele ao qual um indicador, normalmente um corante, é adicionado, permitindo a diferenciação de reações químicas particulares que ocorreram durante o crescimento Os meios diferenciais são bastantes uteis na distinção de espécies de bactérias BIOENERGÉTICA Em microbiologia o foco é na energia livre, a qual é definida como a energia liberada, disponível para a realização de trabalho Reações exergônicas geram energia, enquanto as reações endergônicas requerem energia COMPOSTOS RICOS EM ENERGIA E ARMAZENAMENTO DE ENERGIA A energia liberada das reações redox deve ser conservada pela célula, caso seja utilizada para dirigir atividades celulares que demandem energia Nos organismos vivos, a energia química liberada é conservada primariamente na forma de determinados compostos fosforilados que são ricos em energia ADENOSINA TRIFOSFATO (ATP) É o mais importante composto de fosfato rico em energia O ATP é a principal moeda energética em todas as células, sendo gerado durante reações exergônicas e consumido em reações endergônicas A energia necessária à síntese ou hidrólise de ATP é de 32 kJ/mol COENZIMA A Derivados da coenzima A, que apresentam ligações tioéster, podem produzir outros compostos de alta energia A energia liberada na hidrolise da coenzima A é conservada na síntese de ATP O ATP é continuamente clivado para conduzir as reações anabólicas CONSERVAÇÃO DE ENERGIA Reações associadas à conservação de energia em quimiorganotróficos: fermentação e respiração Na fermentação, o processo redox ocorre na ausência de aceptores exógenos de elétrons; enquanto na respiração, o oxigênio molecular ou outro aceptor exógeno atua como aceptor terminal de elétrons FOSFORILAÇÃO EM NÍVEL DE SUBSTRATO E FOSFORILAÇÃO OXIDATIVA A fermentação e a respiração diferem quanto ao mecanismo de síntese de ATP Na fermentação, o ATP é produzido por fosforilação em nível de substrato, ou seja, o ATP é sintetizado diretamente a partir de um intermediário rico em energia Na fermentação a força próton motiva não está envolvida A fotofosforilação e a fosforilação oxidativa baseiam-se na força próton motiva para conduzir a síntese de ATP Sandy Caroline • GLICÓLISE COMO UM EXEMPLO DE FERMENTAÇÃO A substância fermentada atua tanto como doadora como receptora de elétrons Nem todas as substâncias podem ser fermentadas, mas, vários compostos podem ser, como os açucares e a glicose A glicólise é um processo anaeróbio e pode ser dividida em três estágios: estágio I envolve as reações preparatórias, no estágio II ocorrem as reações redox e no estágio III as reações redox ocorrem novamente Estágio I: não são reações redox e não liberam energia, mas levam à produção de duas moléculas de um intermediário-chave a partir da glicose Estágio II: ocorrem as reações redox, a energia é conservada na forma de ATP, e duas moléculas de piruvato são formadas Estágio III: as reações redox ocorrem novamente, havendo a formação dos produtos de fermentação FERMENTAÇÃO DA GLICOSE: RESULTADOS LÍQUIDOS E PRÁTICOS A glicólise corresponde à principal via de fermentação, em que o seu resultado final consiste na liberação de uma pequena quantidade de energia, conservada na forma de ATP e na formação dos produtos de fermentação Durante a glicólise, a glicose é consumida, dois ATPs são sintetizados e produtos de fermentação são gerados A fermentação é mais que um mero processo de obtenção de energia, ela também corresponde a um processo de geração de produtos naturais úteis aos seres humanos RESPIRAÇÃO E CARREADORES DE ELÉTRONS ASSOCIADOS À MEMBRANA A fermentação ocorre anaerobiamente na ausência de aceptores externos de elétrons utilizáveis A oxidação utilizando O2 como aceptor terminal de elétrons é denominada respiração aeróbia CARREADORES NO TRANSPORTE DE ELÉTRONS Os sistemas de transporte de elétrons estão associados à membrana Os sistemas de transporte de elétrons medeiam a transferência de elétrons do doador primário ao aceptor terminal e conservam parte da energia liberada durante o processo, utilizando-a na síntese de ATP As quinonas fazem parte dos carreadores de elétrons não proteicos Os sistemas de transporte de elétrons consistem em uma série de carreadores associados à membrana, que atuam de forma integrada, transferindo elétrons do doador primário de elétrons para um aceptor terminal de elétrons, como o oxigênio A FORÇA PRÓTON MOTIVA Força próton motiva: é o gradiente de pH e o potencial eletroquímico Os carreadores de elétrons se orientam de forma que os elétrons são transportados e os prótons são separados dos elétronsO resultado do transporte de elétrons consiste na geração de um gradiente de pH e de um potencial eletroquímico através da membrana A face interna da membrana fica negativa e alcalina, enquanto a face externa torna-se ácida e positiva A célula utiliza a força próton motiva para sintetizar ATP, pela ação da ATPase Os inibidores bloqueiam o fluxo de elétrons e o estabelecimento da força próton motiva Os desacopladores impedem a síntese de ATP, sem afetar o transporte de elétron
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