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Formulário para Atividade Online – AO05 Nome da Disciplina: Microbiologia Natureza: Obrigatória Estudante: Atividade: As questões abaixo deverão ser analisadas a partir do estudo e interpretação do artigo: “Associação do vírus Epstein-Barr (EBV) com tumores sólidos”. a) O EBV é transmitido pela saliva, infectando inicialmente as células epiteliais da orofaringe, nasofaringe e glândulas salivares, por receptores ainda não identificados, onde frequentemente ocorre replicação. Posteriormente, os vírus alcançam tecidos linfóides adjacentes e infectam linfócitos B através da ligação entre a glicoproteína viral gp350/220 e o receptor CD21 (CR2) do componente C3d do sistema complemento. Após essa associação, o vírus penetra nos linfócitos B por fusão do envoltório com a membrana celular e o capsídeo é então liberado no citoplasma. O genoma antes linear é transportado para o núcleo tornando-se circular, permanecendo em estado latente, sob a forma de DNA epissomal extracromossômico. Segundo Murray e Young (2000), o EBV possui tropismo para linfócitos B e células epiteliais, podendo coexistir na forma latente e replicativa ou lítica. (0,4) ( ) A afirmação é correta. ( ) A afirmação é incorreta. b) Alguns possíveis receptores utilizados pelo vírus EBV ao parasitar as células humanas são: LMP-1 – Que atua como membro da família de receptores TNF, ativando o fator transcricional; NF- kB, induzindo a expressão de receptores celulares (CD40, CD23, EGFR), moléculas de adesão (CD57, ICAM-1, LFA 1 e 3) e citocinas (IL-6 e IL-10). O LMP-2 que regula negativamente a atividade de proteínas tirosino-quinases citoplasmáticas (PTK), tais como as da família Syk. Promove a sobrevivência de linfócitos B e inibe a reativação viral e também, pode induzir transformação em células epiteliais. O BARF1, descrito como gene latente exclusivamente em neoplasias de origem epitelial, sendo descrito como um gene lítico precoce nas infecções de linfócitos-B. Atua como homólogo funcional do receptor do fator estimulador de colônia 1 (CSF-1) humano. Exerce efeitos imortalizantes em células epiteliais primárias humanas in vitro e induz tumorigenicidade em linhagens de fibroblastos e CD 21 que são moléculas de superfície das células B. (0,4) ( ) A afirmação é correta. ( ) A afirmação é incorreta. c) São propostas a existência de quatro tipos de latência, com padrões distintos de expressão dos genes virais, tais como: Tipo I: Associada ao Linfoma de Burkitt (Klumb et al., 2004), carcinoma gástrico (Lopes et al., 2004); Tipo II: Associada ao Carcinoma de Nasofaringe e Doença de Hodgkin (Elgui de Oliveira et al., 2002; Gandhi et al., 2004; Andersson, 2006); Tipo III: Associadas a doenças linfoproliferativa pós-transplante e linfoma não Hodgkin associado à AIDS (Ometto et al., 1997; Liebowitz,1998; Fachirot et al., 2004) e Tipo IV: Associado a hepatocarcinoma e leiomiossarcoma em pacientes imunocomprometidos. (0,4) ( ) A afirmação é correta. ( ) A afirmação é incorreta. d) As técnicas utilizadas para demonstrar a participação dos vírus EBV no desenvolvimento de neoplasias incluem: 1) Amplificação de sequência do genoma viral através de reação em cadeia da polimerase (PCR); 2) Hibridização in situ (HIS), utilizando sondas complementares tanto na seqüência do genoma viral, quanto nos segmentos de RNAm viral; 3) Imunohistoquímica e imunofluorescência, utilizando anticorpos monoclonais específicos para proteínas virais expressas; Western blotting; 4) Southern blot. Técnica também, aplicada para avaliar a clonalidade do EBV encontrado nas neoplasias, a presença de infecção lítica e investigar a ocorrência de integração do genoma viral ao genoma da célula hospedeira; 5) A clonalidade do vírus é verificada através da manutenção do número de repetições de 500pb, descritas como TR (tandem repeat), que se encontram nas extremidades do genoma viral. (0,4) ( ) A afirmação é correta. ( ) A afirmação é incorreta.
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