Resumo 4 - Ontogenia dos Linfócitos

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Resumo da Malu – 2020.2 
Ontogenia dos Linfócitos
Características dos Linfócitos 
 
● São células capazes de reconhecer e distinguir de modo 
específico diversos determinantes antigênicos (epítopos) 
● Essa capacidade de reconhecer é altamente especifica devido 
a necessidade de uma complementariedade perfeita da 
estrutura espacial do receptor do linfócito com o epítopo → 
especificidade 
● Durante o processo de ativação do linfócito, essas células uma 
vez ativadas pelo antígeno, desenvolvem memória 
imunológica 
● Seus receptores de antígeno são distribuídos em clones → 
cada célula durante o seu desenvolvimento, desenvolve um 
receptor característico para ela própria 
● Isso ocorre, pois os genes que codificam seus receptores são 
formados por recombinação de segmentos de DNA durante o 
desenvolvimento dos linfócitos 
● Possuem um repertório de receptores altamente diverso 
● Estruturalmente: 
- Pequeno linfócito = linfócito inativo (fase G0) 
- Linfoblasto = linfócito ativado (fase G1) 
 
Classes de Linfócitos 
 
→ Linfócitos T: clássicos 
1. Linfócitos T auxiliares CD4+: 
● Funções: 
- Diferenciação de célula B (imunidade humoral) 
- Ativação de macrófago (imunidade celular) 
- Estimulação da inflamação 
● Receptor de antígeno: 
- Heterodímeros 𝛼𝛽 
● Especificidade: 
- Diversa para complexo peptídeo-MHC-II 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD3+, CD4+, CD8+ 
 
2. Linfócito T citotóxicos CD8+: 
● Funções: 
- Morte de células infectadas por vírus ou bactérias 
intracelulares 
● Receptor de antígeno: 
- Heterodímeros 𝛼𝛽 
● Especificidade: 
- Diversa para complexo peptídeo-MHC-II 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD3+, CD4+, CD8+ 
 
3. Células T regulatórias: 
● Funções: 
- Suprime a função de outras células T 
- Regulação das respostas imunes 
- Manutenção da autotolerância) 
● Receptor de antígeno: 
- Heterodímeros αβ 
● Especificidade: 
- Específicos para Ags próprios e alguns antígenos 
estranhos (complexo peptídeo-MHC-II) 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD3+, CD4+, CD25+ 
- FoxP3+ (mais comum, mas há outros fenótipos) 
 
4. Células NKT: 
● Funções: 
- Suprimem ou ativam as respostas imunes inata e 
adaptativa 
● Receptor de antígeno: 
- Heterodímeros 𝛼𝛽 
● Especificidade: 
- Limitada para complexos glicolipídio-CD1 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD56, CD16 (receptor Fc para IgG), CD3 
 
5. Linfócitos Tγδ: primitivos 
● Funções: 
- Funções auxiliares e citotóxicas (imunidade inata) 
● Receptor de antígeno: 
- Heterodímeros 𝛾𝛿 
● Especificidade: 
- Limitada para antígenos peptídicos e não peptídicos 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD3+, CD4+, CD8+ 
- Variável 
 
→ Linfócitos B: 
1. Células B foliculares: clássicos 
● Funções: 
- Produção de anticorpo (imunidade humoral) 
● Receptor de antígeno: 
- Ig de superfície 
● Especificidade: 
- Diversas para muitos tipos de moléculas 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- Receptores Fc 
- MHC de classe II 
- CD19, CD23 
 
 
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2. Células B da Zona Marginal: 
● Funções: 
- Produção de anticorpo (imunidade humoral) 
● Receptor de antígeno: 
- Ig de superfície 
● Especificidade: 
- Limitada para um grupo restrito de moléculas 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- CD27 e IgM 
 
3. Células B-1: primitivo 
● Funções: 
- Produção de anticorpo (imunidade humoral) 
● Receptor de antígeno: 
- Ig de superfície 
● Especificidade: 
- Limitada para um grupo restrito de moléculas 
● Marcadores de fenótipo selecionado: 
- IgM 
- CD43, CD20, CD27, CD70- 
 
Hematopoiese 
 
• Evolução das células que dão origem às células sanguíneas, 
oriundas de uma célula-tronco comum e que se diferenciam 
na origem de acordo com a fase antes do nascimento e após 
o nascimento 
• Antes do nascimento: 
- Essas células se originam das ilhotas sanguíneas do saco 
vitelino 
- À medida que a gestação avança, entre o 3º e 4º mês de 
gestação, quem assume esse papel é o fígado fetal 
• Próximo do nascimento e após o nascimento: 
- A medula óssea assume a produção das células sanguíneas 
• Medula Óssea: 
- Onde se originam todas as células do sangue 
- Estrutura reticular esponjosa 
- Rede de sinusóides preenchidos por sangue e revestidos por 
células endoteliais ligadas a uma membrana basal 
descontínua 
- É constituída por – adipócitos, fibroblastos, precursores e 
plasmócitos 
• Logo após o nascimento, as células sanguíneas são produzidas 
em todos os ossos, mas à medida que se avança na idade e no 
desenvolvimento humano, essa produção vai se tornando 
restrita aos ossos chatos 
• Célula hematopoiética pluripotente (CTH): 
- Possui dois marcadores específicos dessa etapa precoce de 
célula-tronco hematopoiética → marcadores CD34 e c-Kit 
- Há ausência de marcadores de linhagens específicas 
- É auto renovável 
• Ao decorrer do desenvolvimento, surgem outros marcadores 
que serão os marcadores definitivos das linhagens celulares 
prontas já diferenciadas 
 
 
 
• A fase intermediária representa as etapas celulares em que 
ocorre o principal momento de proliferação celular, que 
fornece uma quantidade suficiente de progenitores que vão 
suprir todas as células sanguíneas maduras finais do 
• As células do estroma da medula óssea produzem grandes 
quantidade de citocinas importantes para o desenvolvimento 
dos linfócitos (estímulo) 
• A diferenciação dessas células depende do estímulo que elas 
vão receber: 
♥ Estímulo: 
- Realizado pelas citocinas liberadas por células do estroma 
e macrófagos da medula óssea 
♥ IL-3 (fator hematopoiético de crescimento de progenitores): 
- Diferencia progenitores mieloides que vão originar todas 
as outras células do sangue 
♥ IL-7 (fator de crescimento para linfócitos T): 
- Atua na célula que já está comprometida com a linhagem 
linfocítica, diferenciando o progenitor linfoide comum que 
vai dar origem aos linfócitos de uma maneira geral 
- Produzida pelo timo (onde é chamada de linfopoetina) e 
pela medula óssea 
● A célula pluripotente CTH pode dar origem à: 
- Linhagem mielóide – quando estimulada pela IL-3 
- Linhagem linfóide – quando estimulada pela IL-7 
 
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• As primeiras células linfoides que são produzidas e deixam o 
fígado fetal, originam os linfócitos T e B primitivos 
• Linfócitos primitivos: 
- LT primitivo – linfócito Tγδ 
- LB primitivo – linfócito B-1 
- Não chegam a amadurecer totalmente 
- São localizados nos tecidos periféricos possibilitando uma 
resposta imune, mesmo com um receptor imaturo e pouco 
diverso 
- Permite uma resposta específica na porta de entrada dos 
patógenos, embora seus receptores sejam relativamente 
limitados 
 
 
Maturação dos Linfócitos 
 
● Evento Central – Expressão dos receptores de reconhecimento 
de antígenos 
● A formação do receptor envolve etapas citoplasmáticas até o 
receptor ser expresso na superfície do linfócito, e essa 
expressão final coincide com o amadurecimento do linfócito 
● Processo regulado pela expressão gênica 
● Gera um grande repertório de receptores de antígenos 
● Um repertório de receptor é formado em cada clone celular 
separadamente, visto que, são oriundos de recombinação de 
segmentos de DNA, e em cada célula essa recombinação é 
aleatória 
● Nesse processo gera-se linfócitos que reconhecem antígenos 
estranhos, mas não antígenos próprios 
● Ao final da montagem do receptor e do seu amadurecimento, 
ele passa por processos de seleção que os preparam para não 
interagir com componentes próprios do organismo 
 
 
 
→ Células B: 
● Forma o BCR 
● Formado por cadeias polipeptídicas: 
- 2 cadeias pesadas (VH) – inseridas na membrana 
- 2 cadeiras leves (VL) – associada à cadeia pesada, e 
possui cerca da metade do numero de aminoácidos da 
cadeia pesada 
● Essas cadeiasestão unidas entre si por pontes dissulfeto 
● Receptores – imunoglobulinas (podem ser do tipo M ou D) 
● A região da extremidade N terminal está localizada a 
porção variável da molécula efetora → porção essa 
gerada por recombinação de segmentos de DNA 
● A região carboxi terminar (COOH) que está inserida na 
membrana, está localizada a porção constante que quase 
não varia dentro da molécula 
 
→ Células T: 
● Forma o TCR 
● Formado por 2 tipos de cadeia: 
- 2 cadeias α 
- 2 cadeias β 
• As duas cadeias são transmembrana, estando inseridas na 
membrana celular 
• Estão muito próximas, em uma associação bastante íntima 
por conta de ilhotas lipídicas presentes na membrana, que 
permite a movimentação dessa região transmembrana 
• Só funcionam juntas 
• Região N terminal – porção variável 
• Região COOH terminal – porção constante 
 
 
 
Estágios da Ontogenia 
 
• Todos os linfócitos durante seu desenvolvimento passam por 
determinados estágios até chegar à aquisição da sua 
competência funcional 
 
1. Comprometimento de células progenitoras linfoides comuns 
com a linhagem B ou T: 
▪ A célula T amadurece no timo, logo, em algum momento 
durante o início do estágio de desenvolvimento ela vai sair 
da medula e vai migrar para o timo 
▪ O linfócito B permanece na medula óssea até se 
transformar em uma célula “imatura”, lembrando que ele 
quando o LB sai da medula, ele já é uma célula competente, 
mas que sofre uma segunda maturação nos órgãos 
periféricos 
 
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2. Rearranjo sequencial e ordenado dos genes dos receptores 
de antígenos: 
▪ Momento do início da recombinação das sequencias de 
DNA formando ao final um receptor específico para cada 
célula, devido o rearranjo ser aleatório 
3. Eventos de seleção: 
▪ Seleção das células que vão proliferar ou não 
4. Proliferação de células progenitoras e imaturas em estágios 
iniciais específicos: 
▪ É quando os progenitores e as células que vão iniciar em 
cada estágio de maturação, precisam proliferar para 
fornecer uma quantidade de células grande para seguir 
com o amadurecimento delas 
5. Aquisição de competência funcional: 
▪ Com a diferenciação das células B e T em subpopulação 
funcional e fenotipicamente distintos 
▪ Ao final da formação do receptor, esse receptor pronto 
começa a adquirir sua competência funcional → é a 
capacidade de se ligar ao antígeno 
▪ Após isso, a célula passa novamente por um processo de 
seleção que vai indicar se a célula está ou não apta a 
completar seu desenvolvimento 
▪ Seleção negativa – os linfócitos que desenvolveram 
receptores que se unem fortemente à antígenos próprios 
são eliminados, para impedir que após a liberação do 
linfócito ele venha a reconhecer antígenos próprios do 
indivíduo, eliminando-os 
▪ Existem falhas nesse processo, e quando isso ocorre há o 
desenvolvimento de doenças autoimunes 
▪ De uma maneira geral a regulação de todos esses estágios 
da ontogenia ocorre de forma eficiente, adquirindo uma 
célula competente capaz de responder ao que é estranho, 
mas não responder ao que é próprio 
 
 
 
Comprometimento com as Linhagens 
 
● O comprometimento com a linhagem T ou B depende de 
receptores específicos de superfície celular 
● A CTH pluripotente dá origem ao progenitor linfoide comum 
● O progenitor linfoide comum pode se diferenciar em: 
- LT, LB ou célula linfoide inata (características de T pronta) 
● O comprometimento depende de fatores de transcrição que 
são ativados na célula 
● Durante o trajeto do progenitor linfoide comum pelo estroma 
da medula óssea, ele encontra células que estão produzindo 
diversas substancias 
● O contato do progenitor com os fatores de crescimento 
liberados pelas células do estroma inicia a ativação do fator 
EBF e E2A, que sequencialmente ativam o Pax5 fazendo com 
que essa célula fique comprometida com a linhagem B → 
continua na medula óssea fazendo seu desenvolvimento 
● Por outro lado, algumas células progenitoras podem ativar 
fatores de transcrição Notch 1 e posteriormente GATA3, 
fazendo seu comprometimento com a linhagem T 
● Ou as células progenitoras podem ativar fator de transcrição 
Id2, comprometendo-a a ser uma célula linfoide inata 
● Células B1 (primitivo) – liberado no começo da formação das 
células linfoides ainda a fase gestacional, seguem para os 
tecidos periféricos e ali são autorrenováveis (proliferam nos 
tecidos se autorrenovando) 
● Células B2 – se localiza no folículo linfoide da zona timo-
independente dos órgãos periféricos (linfonodo ou baço) 
● Célula B da Zona Marginal – migra para a região timo-
independente, mas não entra no folículo, ficando retida na 
zona marginal 
● Células Tαβ (clássico) – são linfócitos clássicos que possuem 
receptores αβ, sendo originados a partir do pró-T na medula 
● Células Tγδ (primitiva) – linfócitos primitivos que possuem 
receptores 𝛾𝛿, sendo originados a partir do pró-T no fígado 
● Células Linfóides Inatas – células que saem com característica 
de linfócitos efetores, mas ainda não possui um receptor 
desenvolvido e eficaz, sendo originadas a partir da pró-T 
 
 
 
 
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Pontos de Controle da Maturação 
 
● São as etapas do desenvolvimento do linfócito em que ele 
precisa entrar em rearranjo e ter condições de ser selecionado 
positivamente para continuar → o rearranjo de genes que 
ocorre no citoplasma, deve ser traduzido em PTNs produtivas 
(sua montagem permite que ela seja expressa na superfície da 
célula formando pré-receptores) 
● Então, toda vez que ocorre a proliferação, e que se inicia o 
rearranjo das células para formar pré-receptor, a formação 
desse pré-receptor que define quais pró-T ou pró-B que vão 
continuar proliferando 
● A célula pró-B ou pró-T entra em proliferação e durante esse 
processo ela começa a sofrer o rearranjo do seu receptor, e 
nesse momento não há proliferação → esse é o momento em 
que enzimas de recombinação estão atuando recombinando 
genes 
● As células que durante a recombinação conseguem expressar 
proteínas produtivas para formar o pré-receptor que será 
expressado na superfície da célula, recebem sinais de 
sobrevivência se transformando em pré-B ou pré-T 
● A célula que não consegue expressar proteínas produtivas 
para formar pré-receptor, não recebe sinais de sobrevivência 
das células do estroma de onde estão de desenvolvendo, 
morrendo por apoptose 
● O sinal de proliferação é dado quando esse receptor consegue 
se ligar em algo 
● A célula que conseguiu formar o pré-receptor, vão entrar em 
proliferação novamente e vão fazer uma nova recombinação 
de segmentos de DNA, formando o receptor completo que 
precisa ter a capacidade de se ligar a componentes do tecido 
onde ele está se desenvolvendo 
- O LT no timo e o LB na medula óssea 
● As células que não conseguem formar o receptor totalmente 
são eliminadas por falta de sinal positivo (falta da capacidade 
de se ligar a algo) 
● As células que conseguiram formar o receptor vão amadurecer 
totalmente, passando por um processo de seleção positiva, 
onde ocorre sua amplificação em quantidade 
● No final passam por um processo de seleção negativa, onde as 
células que formaram receptores que se ligam à antígenos 
próprios serão eliminados 
● Pontos de Controle – Momentos nos quais as células são 
testadas e continuam a amadurecer APENAS se essa etapa for 
bem sucedida 
- 1º PONTO – Expressão de pré-receptor, que promove a 
proliferação e a exclusão alélica (dos dois alelos, apenas o 
que formou uma proteína produtiva é mantido, o outro que 
não conseguiu formar é excluído para não dar um receptor 
com algum tipo de erro) 
- 2º PONTO – Expressão do receptor completo, e seleção 
positiva e seleção negativa (evitar a autoimunidade) 
● A seleção positiva facilita a sobrevivência dos linfócitos 
potencialmente úteis, está ligada ao comprometimentoda 
linhagem 
● Já a seleção negativa é o processo que elimina ou altera os 
linfócitos imaturos cujos receptores se ligam fortemente a 
antígenos próprios 
● Se os receptores não reconhecerem nenhum antígeno, elas 
morrem por falta de sinalização de sobrevivência 
● Deve haver reconhecimento fraco de antígenos próprios 
 
 
 
 
Ontogenia dos Linfócitos B 
 
 
 
● Originados da medula óssea (substancia mole que preenche os 
ossos) 
● Medula óssea – arcabouço colagenoso produzido pelas células 
do estroma da medula (tecido conjuntivo), sendo altamente 
ramificadas e acomodam a maioria das células que passam 
pelo processo de diferenciação 
● As células se formam no endósteo (região mais periférica), e à 
medida que elas vão migrando em direção ao seio central, elas 
vão entrando em contato com várias substancias da medula 
óssea, sofrendo o processo de amadurecimento e depois saem 
através do seio central para completar seu desenvolvimento 
● A ontogenia do LB ocorre parcialmente na medula óssea, e as 
etapas finais são concluídas nos órgãos periféricos (baço), 
onde elas passam por outra transformação que melhora sua 
funcionalidade, completando seu amadurecimento 
 
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● O evento central da ontogenia, é a formação do receptor de 
reconhecimento do antígeno 
● O rearranjo de genes dos receptores para antígenos ocorre 
primeiro na cadeia pesada (H) e depois na cadeia leve (L) → 
promove um grande repertório de anticorpos 
● Linfócito B-1 – sua cadeia pesada sempre é composta por IgM 
e ele possui a molécula CD5 que é típica do LB-1 → essas 
células são liberadas durante a fase fetal e vão se instalando 
nos tecidos periféricos do corpo 
● A medula óssea assume o processo de formação dos LB 
● Linfócito B-2 – o linfócito B imaturo que possui apenas IgM, 
sai da medula e vai em direção ao baço para amadurecer 
- Se ele sofre um amadurecimento total e passa a expressar 
também IgD, 41:12 se transforma em linfócito B folicular 
- 
● Expressão dos receptores na superfície do linfócito 
● Migração desses linfócitos B para os órgãos secundários 
● Interação: receptor X Ag por complementariedade = SELEÇÃO 
CLONAL 
- Linf. B + Ag → proliferação → plasmócito → anticorpos 
● O repertório de anticorpos (receptor) é secretado após o 
estímulo do antígeno 
● Formado pelos genes: 
- V – região variável (NH2) 
- C – região constante (COOH) 
- J – segmento de junção 
- D – segmento de diversidade 
● Cadeia Pesada: 
- Região variável VDJ 
- Região constante 
- Transmembrana 
- Citoplasmática 
● Cadeia Leve: 
- Região variável VJ 
- Região constante 
● 
 
→ Etapas do Desenvolvimento dos Linfócitos B: 
● A primeira célula comprometida com B é chamada de 
célula pró-B 
- Expressam CD10+ e CD19+ 
● As proteínas RAG são expressas 
● Ocorre o 1º rearranjo de genes na cadeia pesada 
● Há uma seleção das células que apresentam rearranjo 
produtivo 
● Nesse momento, as células são chamadas de pré-B 
- Expressam a cadeia pesada, mas ainda devem rearranjar 
a cadeia leve 
● São produzidas proteínas de membrana, Ig𝛼 e Ig𝛽 
- Possuem domínio ITAM 
- São responsáveis pela transdução de sinal para a futura 
BCR, chamada de pré-BCR 
● BTK (tirosina kinase de Bruton) – sobrevivência, 
proliferação e maturação do estágio pré-B 
- agamaglobulinemia ligada ao X 
● Receptor da célula pré-B: 
- Inibição da recombinação da cadeia H (exclusão alélica) 
- Proliferação das células pré-B 
- Estimulação da recombinação da cadeia leve 
- “Desligamento” da célula das cadeias leves substitutas 
● Pré-BCR: 
- O rearranjo de ambos os alelos das cadeias poderia 
resultar em 2 receptores com diferentes especificidades 
para o antígeno na mesma célula 
- Logo, o rearranjo é regulado a partir da exclusão alélica 
→ expressão de apenas um dos alelos que expressam a 
cadeia pesada 
- Expressão de um único tipo de receptor antigênico 
- Regula o rearranjo até a obtenção de um receptor 
produtivo 
- Produz estímulo do rearranjo da cadeia leve 
● Caso o rearranjo seja produtivo irá gerar uma IgM 
completa 
● Caso não seja produtivo, o outro lócus da cadeia leve é 
rearranjado 
● Somente quando a célula expressa IgM ela será 
considerada imatura 
● Se ambos alelos forem rearranjados de maneira não 
funcional, a célula não recebe sinais de sobrevivência 
● As células que não são autorreativas, são mantidas vivas 
e deixam de expressar RAG 
 
Obs: Genes RAGs - expressos do em LT e LB em 
desenvolvimento (G0 e G1) nos órgãos geradores; são 
inativadas nas células em proliferação 
 
Obs 2: TdT (deoxinucleotidil transferase terminal) - enzima 
específica do tecido linfóide 
 
 
 
 
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● FLT 3 (STK1 em humanos) + FLT3L → origina o progenitor 
linfóide comum 
- Ocorre produção de IL-7 (fator de crescimento para PLC) 
● Adesão: feita por integrinas (VCAM + VLA-4) + CAMs 
● Origina o Kit (CD117) + SCF 
- proliferação e comprometimento com a linhagem B 
● CXCL12 (quimiocinas das células do estroma) + CXCR4 → 
retenção de células B na medula 
● Transcrição dos genes dos fatores E2A e EBF que ativam PAX5 
→ promove transcrição de RAG1/2 
 
→ Seleção das Células: 
● Apenas as B funcionais expressam IgM e recebem sinais de 
sobrevivência 
● Aquelas que reconhecem antígenos próprios com alta 
afinidade podem sofrer edição do receptor 
● Isso significa que houve reativação do RAG e rearranjo 
para a produção de uma nova cadeia leve 
● Se essa edição falhou, as células muito autorreativas 
sofrem seleção negativa (apoptose) 
 
→ Rearranjo dos Genes dos Receptores: 
● Os genes que codificam os receptores são gerados pelo 
rearranjo de linfócito da região variável (V) com 
segmentos de diversidade (D) e junção (J) 
● Esse é o Processo de Recombinação V(D)J 
● Cadeia leve e 𝛼: falta o segmento D → o rearranjo é 
somente com as regiões V e J 
● Cadeia pesada e 𝛽: recombinação entre D e J, em seguida 
do V, para só então ser fundido ao segmento DJ 
● Proteínas específicas que medeiam a recombinação 
reconhecem as sequências de sinais de recombinação 
(RSSs) do DNA, localizadas no terminal 3’ do V, 5’ do J e de 
ambos os lados do D 
● O rearranjo é um tipo de especial de recombinação não-
homóloga do DNA, mediada por várias enzimas, sendo 
algumas exclusivas dos linfócitos 
 
 
 
- A – sequências heptâmeros (RSS) e nanômetros 
conservadas (separadas por espaçadores) são 
adjacentes aos segmento V e J (loci K e 𝜆) e V, D J 
(locus H) 
- B – RSS direções opostas a recombinação dos genes V 
e J ocorre por deleção do DNA interveniente 
- C – RSS na mesma direção, por inversão do DNA (não 
há deleção do DNA) 
● O processo pode ser descrito em sequência: 
1. Sinapse: 
▪ As porções do cromossomo em que os genes estão 
localizados tornam-se acessíveis para a 
recombinação 
▪ Dois segmentos codificadores são selecionados e suas 
RSSs adjacentes são aproximadas e formam uma alça 
cromossômica, de forma que são mantidos juntos 
para os processos 
 
2. Clivagem: 
▪ As quebras são realizadas por enzimas nas junções da 
RSS 
▪ O complexo RAG-1/RAG-2 (genes ativadores da 
recombinação) reconhece a sequência de DNA e a 
cliva 
▪ A quebra da fita dupla forma um grampo que 
mantém as extremidades unidas antes da 
modificação e ligação 
 
3. Abertura do grampo/Processamento de extremidade: 
 
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▪ Os grampos devem ser removidos e bases devem ser 
acrescentadas ou removidas das extremidades 
codificadoras para garantir diversidade 
▪ A enzima Ártemis é uma endonuclease que abre os 
grampos 
▪ A DNA-PK faz o reparo de DNA fita dupla → adição 
de nucleotídeos P 
▪ A enzima TdT é linfóide exclusiva, fazendo a adição 
aleatória de nucleotídeos N às extremidades do DNA 
→ junção dos filamentos 
▪ mais comum nas cadeias H das Igs 𝛽 e 𝛾 dos TCRs 
 
4. Junção: 
▪ As extremidadessão unidas por um processo de 
reparação de quebra de dupla fita, denominado 
junção não homóloga de extremidade 
 
→ Pré-B: 
• Expressão do pré-BCR 
 
 
5. Geração de diversidade: 
▪ Diversidade Combinatória: 
- O rearranjo V(D)J aproxima vários segmentos 
gênicos da linhagem que podem combinar-se de 
forma aleatória, e diferentes combinações 
produzem diferentes receptores 
▪ Diversidade Juncional: 
- A maior contribuição para a diversidade de 
receptores é feita pela remoção ou adição de 
nucleotídeos nas junções dos segmentos V e D, D e 
J ou V e J, no momento de sua junção 
- Formam a terceira região hipervariável (CDR3) 
- Essa ação é mediada pela enzima TdT 
 
 → Seleção clonal: 
● É a geração de um imenso repertório de células do sistema 
imune 
● Ocorre migração das células virgens para os tecidos 
linfóides periféricos 
● Encontro de células com antígeno → Promove expansão 
do clone reativo 
 
→ Linfócitos B Primitivos 
1. Linfócitos B1: 
● Vindas a partir de células tronco do fígado fetal 
● Possuem população auto-renovável residente no 
peritônio e mucosas 
● Fonte rápida de anticorpos 
● Desenvolve-se mais cedo que as B convencionais 
● Possui diversidade limitada nos receptores de 
antígenos 
- Repertório limitado de genes V 
- Menor diversidade juncional (TdT não é expressa no 
fígado fetal) 
● Secretam IgM espontaneamente → são anticorpos 
naturais que respondem à polissacarídeos e lipídeos 
microbianos 
● Marcadores fenotípicos: CD20, CD27, CD43, CD11b, 
CD19, CD21 low, IgD low, IgM high, CD5 (+ ou -) 
 
2. Linfócitos Foliculares (B2): 
● Células B maduras 
● Originadas da medula óssea 
● A afinidade do receptor por antígenos próprios 
contribui para a diferenciação em BZM ou B2 
● A decisão representa um evento de seleção positiva 
ligada ao comprometimento da linhagem 
● Produzem IgM e IgD (receptor de ativação essencial 
da célula B madura) 
● Essa co-expressão é acompanhada da capacidade de 
recircular pela aquisição da competência funcional 
● Concluem seu crescimento no baço 
● São responsivas aos antígenos 
 
3. Linfócitos B da Zona Marginal: 
● Originadas da medula óssea 
● Localizadas próximas ao seio marginal e linfonodos 
● A afinidade do receptor por antígenos próprios contribui 
para a diferenciação em BZM ou B2 
 
Resumo da Malu – 2020.2 
● A decisão representa um evento de seleção positiva 
ligada ao comprometimento da linhagem 
● Possui diversidade limitada 
● Respostas a antígenos polissacarídeos 
● Geram anticorpos naturais 
● Reagem à polissacarídeos 
● Respondem a bactérias encapsuladas 
● Expressam IgM e o marcador de superfície CD21 
● Capazes de mediar respostas dependentes de T 
● Respondem rapidamente a microorganismos (bactérias 
capsuladas) no sangue diferenciando-se em plasmócitos 
secretores de IgM de vida curta 
 
Ontogenia dos Linfócitos T 
 
→ Timo: 
● Bilobulado – cada lobo se divide em múltiplos lóbulos 
- Cada lóbulo é dividido em córtex e medula 
● Localizado no mediastino anterior 
● Comprometimento com a linhagem T: 
- Notch 1 e GATA3 
● Constituído por: 
- Células epiteliais 
- Macrófagos 
- Células dendríticas 
- Timócitos 
 
→ Maturação dos Linfócitos T: 
● Ocorre principalmente no período fetal e depois do 
nascimento vai diminuindo 
● Aproximadamente 95% dos timócitos entram em apoptose 
● TCR-1 (𝛾𝛿) → Rearranjo produtivo dos loci 𝛾 e 𝛿 antes do 
rearranjo produtivo de 𝛽 
● TCR-2 (𝛼𝛽) → Rearranjo produtivo da cadeia 𝛽e 
formação do pré-TCR 
 
→ Papel do Timo: 
● Os linfócitos T originam-se de precursores da medula 
● Sua maturação ocorre no timo → proporciona estímulos 
necessários para sua proliferação 
● As células T em desenvolvimento no timo são chamadas de 
timócitos 
● Sua migração é dada através de quimiocinas 
● Os progenitores expressam CCR9, que se liga à CCL25, 
produzida no córtex do timo 
● O receptor CCR7 reconhece CCL21 e CCL19 e os timócitos 
são atraídos do córtex para a medula do timo 
● A ausência do timo é conhecida como síndrome de Di 
George e provoca a falta de linfócitos T 
 
→ Timócitos Duplo-negativo (Pró-T): 
● Timócitos recém chegados da medula não expressam TCR, 
CD3, CD4 ou CD8 
● Precursores de linfócitos T provenientes da medula chegam 
ao timo → timócitos (pró-T) → ocorre sua proliferação 
● Ocorre avanço através da região cortical → ativação das 
proteínas RAG → são expressas para auxiliar para no 
rearranjo dos genes da cadeia 𝛽do TCR → células 
alcançam o estágio de pré-T → ocorre novamente a sua 
proliferação 
 
→ Receptor da célula pré-T: 
● Se ocorrer recombinação produtiva da cadeia 𝛽, essa 
proteína será expressa na superfície em associação com a 
proteína pré-T𝛼, CD3 e 𝜁 (zeta), formando o complexo do 
receptor da célula pré-T 
● Os sinais do pré-TCR medeiam a sobrevivência das células 
pré-T que tenham rearranjado de maneira produtiva a 
cadeia 𝛽, contribuindo para sua proliferação 
● Os sinais iniciam a recombinação da cadeia 𝛼 e conduzem 
a célula para o estado duplo-positivo 
● Além disso, inibem a continuidade da recombinação em 𝛽 
e promove exclusão alélica 
 
→ Duplos-positivos: 
● Uma segunda expressão de RAG promove a recombinação 
da cadeia 𝛼, que possui somente os segmentos C e J 
● Após a expressão dessa cadeia, o TCR𝛼𝛽está completo e 
associado à CD3 e 𝜁 (zeta) 
● Ocorre expressão de CD4 e CD8 simultaneamente e CD3, 
que vão amadurecer em CD4+ ou CD8+ 
● Ativação das RAGs - Expressão completa do TCR𝛼𝛽 
 
→ Seleção Positiva: 
● Processo em que os timócitos cujos TCRs se ligam 
fracamente ao MHC são estimulados a sobreviver 
● No córtex do timo as células imaturas encontram células 
que expressam MHC de classe 1 e 2 
● O reconhecimento fraco promove a sobrevivência 
● A falta de reconhecimento promove morte por negligência 
a partir da apoptose 
● Linfócitos restritos ao MHC de classe 1 → CD8+ 
● Linfócitos restritos ao MHC de classe 2 → CD4+ 
● Ocorre a partir da emissão de diferentes sinais que 
induzem a expressão do co-receptor correto e desligam a 
expressão do outro 
● Os timócitos selecionados avançam para a medula e 
interagem com MHC das células epiteliais medulares - 
contato com Ags próprios 
 
→ Seleção negativa: 
● Os timócitos que reconhecerem antígenos próprios sofrem 
apoptose 
 
Resumo da Malu – 2020.2 
● Ocorre a eliminação de células T autorreativas que 
poderiam causar doenças imunes 
● A tolerância central é o processo de eliminação das células 
T autorreativas potencialmente prejudiciais 
- É o papel das células medulares na seleção dos timócitos 
● É um mecanismo de autotolerância → ocorre em células 
recém chegadas no timo e no estágio de duplo-positivo 
 
 
 
 
 
● Na medula do timo há expressão do regulador autoimune 
AIRE → amplifica a seleção negativa de linfócitos T 
autorreativos 
● O AIRE não expressa genes de tecidos imunoprivilegiados, 
como testículos e sistema nervoso 
● A população de T reg natural promove antiinflamação e 
faz o controle do sistema imune 
 
→ Linfócitos T primitivos TCR-1 (𝛾𝛿): 
● Nos timos fetais, os primeiros rearranjos produtivos dos 
genes do TCR envolvem os lócus 𝛾e 𝛿 
● Recombinação de 𝛾 e 𝛿 é semelhante 
● Diversidade limitada → Apenas um pequeno número de 
segmentos VDJ disponíveis é usado nas células T𝛾𝛿 
maduras 
● Células TCR-1 não expressam TCR𝛼𝛽 e vice-versa 
● São capazes de ligar diretamente ao antígeno sem 
necessidade de apresentação via MHC 
 
Ontogenia das Células NK-T 
 
● Originadas dos linfócitos T no estágio duplo-positivo 
● Expressam os marcadores TCR e NK (NK1.1) 
● Não são restritas pelo MHC 
● Não reconhecem peptídeos apresentados por APCs 
● Expressam TCR𝛼𝛽, porém restritos por moléculas CD1 
(semelhantes ao MHC-1) 
● Reconhecem antígenos lipídicos 
● Quando ativadas secretam grande quantidade de citocinas 
(ex: IFN-𝛾 e IL-4)