CHG RESUMO BOMBANTE

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CHG RESUMO BOMBANTE
Microscópio ótico (de luz):
Ampliação, 4x, 10x, 40x, 100x
Microscópio eletrônico
Características
Visualização da ultraestrutura do tecido
Cortes ultrafinos
Tipos
Transmissão
Varredura (scanning)
Técnicas HISTOLÓGICAS
Baseadas em reações ácido-base
HE (lam. 69)
H → Hematoxilina
Básico
Cora estruturas BASÓFILAS
COLORAÇÃO ROXO
E → Eosina
Ácido
Cora estruturas ACIDÓFILAS
COLORAÇÃO ROSA 
Tricrômio de Gomori (lam. 33)
Hematoxilina → Corante básico → ROXO
Cromotropo 2R → Corante ácido → VERMELHO
Verde luz → Corante ácido → VERDE
Polak (lam. 2)
Identificação de mitocôndrias
Impregnação por prata → PRETO
Contra coloração
Eosina (ácida) → ROXO
T. Mallory
Tecnícas HISTOQUÍMICAS
PAS (lam. 3)
Método
Oxidação dos radicais glicóis com ácido periódico liberando aldeídos
Tratamento dos aldeídos com reativo de Schiff
Especificidade
Vic-glicois e derivados aminados presentes em moléculas de glicogênio, em glicoproteínas neutras (sialomucinas) e ácidas
Contra prova do glicogênio: Amilase salivar
Para o glicogênio a reação com amilase salivar resulta em PAS negativo
O Glicogênio é quebrado pela amilase e não colora com o PAS
Para as glicoproteínas neutras e ácidas a reação resulta em PAS positivo
As glicoproteínas não são quebradas pela amilase e coloram com o PAS
Reação PAS positiva: BONINA
AB (Alcian Blue) pH 2,5
AB (Alcian Blue) pH 0,5
Preparação das lâminas histológicas
Coleta do material
Fixação
Líquido de Bown
Formaldeído + ac. Acético + ac. Pirúvico)
Desidratação
Bateria de álcool e clareamento (xilol)
Inclusão
Parafina líquida e estufa a 60ºC
Desparafinização
Xilol e hidratação
Corte/Microtonia
Coloração
Montagem
Resina
Lâminas
LÂMINA 69: corte de fígado
Técnica histológica
HE
Características
Núcleo: ROXO
CITOPLASMA: ROSA
LÂMINA 2: Corte de fígado
Técnica histológica:
Polak
Características
Mitocôndrias: PRETO
Hepatócitos: ROSA (com pontos pretos → mitocôndrias)
Imagem negativa dos núcleos, região com poucas mitocôndrias
LÂMINA 33: Corte de gânglio nervoso espinhal
Técnica histoquímica: tricrômico de gomori
Hematoxilina → ROXO
Obs:
Membrana plasmática
Membranas celulares não são vistas ao microscópio ótico devido a sua pequena espessura, mas são vistas no microscópio eletrônico.
Funções gerais:
Controle do fluxo de moléculas, por permeabilidade seletiva
Manutenção do meio intracelular (microambiente celular)
Recepção de estímulos do meio externo, por receptores
Interação célula-célula e célula-matriz extracelular 
Estrutura
Modelo mosaico fluído
Bicamada lipídica → fosfolipídica
Mergulhado na bicamada encontram-se 
Proteínas:
Integrais
Periféricas
Ancoradas
Carboidratos associados às proteínas, GLICOCÁLICE
O → Polar, voltada para o lado aquoso, hidrófilo
|| → Apolar, cadeia de ácidos graxos → hidrofóbica
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A bicamada lipídica é fluida
Aumentam a fluidez
Aumento da temperatura
Aumento do grau de instauração de lípides
Diminuem a fluidez
Aumento do colesterol
Movimentação das proteínas e dos lipídios
A movimentação ocorre devido ao fato de a membrana não ser estática
O movimento dos lipídios é raro e gasta-se muita energia
Provada através da fusão de uma célula humana e uma célula de rato → meio propício e adição de antígenos (marcadores fluorescentes que se ligam aos anticorpos??? na membrana da célula.)
Há movimentação também dos próprios lípides (ex.: rotação)
Criofratura
Método de fixação da célula para estudo no microscópio
Congelamento da célula/tecido com Hélio ou Nitrogênio líquido.
O congelamento pausa as atividades celulares
Após o congelamento a fratura ocorre nas ligações hidrofóbicas entre os lípides, as proteínas permanecem.
A célula não é levada ao microscópio eletrônico, é feito um molde metálico, e esse é levado ao microscópio.
Crio-etching
Glicocálice
Funções gerais
Adesividade celular
Célula-célula
Célula-matriz extracelular
Reconhecimento celular
Proliferação celular
Antigenicidade
Determinação de grupos sanguíneos ABO
Nas células absortivas intestinais o glicocálice auxilia na retenção de moléculas a fim de serem absorvidas.
Transporte de substâncias
Moléculas isoladas:
Transporte passivo
A favor de um gradiente de concentração
Difusão simples
Canal aberto, pequenas moléculas não carregadas
O2, CO2, etanol
Difusão facilitada
Canal fechado, proteínas transportadora (integral carreadora, muda a conformação para realizar o transporte.
Açúcar
Transporte ativo
Contra o gradiente de concentração
Bomba de sódio e potássio
Também envolvem proteínas carreadoras
Gasto de ATP
Obs.: álcool, O2, CO2, N2, H2O passam pela membrana
Cotransportes
Transporte de glicose no epitélio instestinal
Transporte ativo acoplado ao Na+
Bomba de Na/K
Endocitose	
Fagocitose
Sistema de defesa, moléculas sólidas
Emissão de pseudópode, formando um fagossomo com o corpo estranho
Não seletiva
Ex.: Macrófagos alveolares fagocitadores de poeira
Seletiva
Hemácias envelhecidas
Alterações no glicocálice promovem a adesão de proteínas do sangue identificando-as, ao passarem no fígado/baço essas hemácias são retiradas do sangue e fagocitadas por macrófagos.
bactérias
Pinocitose
Moléculas dissolvidas em solução aquosa
Evaginação da membrana formando um vacúolo (vesícula) que contém o líquido e as substâncias ali dissolvidas
Não é seletiva
Micropinocitose
Pequenas invaginações citoplasmáticas (visíveis apenas em M.E.)
Muito seletiva
Envolve receptores específicos
Entrada de vírus em células eucariontes
Ex.: Moléculas de LDL
Clatrina
Molécula que garante a permanência/concentração de receptores envolvidos na micropinocitose liberada antes da fusão com a endocítica, envolve a vesícula.
pH do endossomo: ligeiramente ácido.
Citoesqueleto
Composição
Microfilamentos (6nm) – ACTINA
Associados a membrana
Microtúbulos (25nm) – TUBULINA
A partir do núcleo
Filamentos intermediários (10nm)
Ao redor do núcleo, no citoplasma e na membrana
Proteínas associadas
Característica funcional:
Estrutura dinâmica
Estabelece, modifica e mantém a forma celular: suporta o grande volume do citoplasma.
Regula a organização das organelas e das células.
Regula movimentos celulares e deslocamentos intracelulares de organelas, cromossomos (segregação durante a mitose), vesículas e grânulos.
Importância funcional
Organização estrutural da célula
Forma
Distribuição espacial de organelas
Movimentos celulares
Movimento de cílio e flagelos
Movimento de cromossomos
MITOSE
Citocinese
Actina
Contração muscular 
Actina e miosina
Contração de microvilos instestinais
Movimento ameboide
Endocitose
Transporte extracelular de partículas, vesículas, grãos de secreção
Fluxo exoplasmático
Movimento morfogenéticos
Microtúbulos
Posição
Citoplasma e prolongamentos celulares como os cílios e flagelos
Constituição
São constituídos por várias subunidades de um heterodímero formado por duas proteínas: alfa-tubulina e beta-tubulina.
As subunidades alfa e beta-tubulina se polimerizam para formar microtúbulos.
Função:
Participam da movimentação dos cílios e flagelos
Participam do transporte intracelular de partículas;
Participam no deslocamento dos cromossomos na mitose;
Estabelecem e mantém a forma das células;
Participam na formação dos centríolos;
Participam da polimerização e despolimerização dos cromossomos;
Proteínas motoras (pessimamente explicado, ignorar)
Dineína → transporte de fora célula para dentro da célula
Cinesina → Carrega moléculas pro meio extracelular
Cílios e flagelos
Transporte de grãos de melanina
Junções intercelulares
Função:
Unir as células umas as outras e à MEC 
Promover vedação entre as células
Estabelecer comunicação entre as células
Tipos:
Desmossomo
Mantém a aderência lateral das células epiteliais
No centro da célula crescimento radial
Constituído pelas membranas de duas células vizinhas
Frequentes em células submetidas a tração, epiderme.
Placa arredondada, eletrodensa (região escura no M.E.)
Dependente de CADERINA nas membranas (molécula de adesão)
Zônula de adesão
Encontradas em diversos tipos de tecidos
Sensíveis ao nível de Ca++
Formam placas menores que os desmossomos que são ligadas pelos filamentos de actina
Mantém a aderênciaentre as células epiteliais
Zônula de oclusão
Fusão da membrana plasmática de células epiteliais adjacentes
Composição
Filamentos finas de proteínas juncionais transmembrana ACLUDINA
Nexus, junção em GAP (comunicante)
Mediadora da comunicação intercelular
Composição: proteína CONEXINA
Conjunto de tubos proteicos paralelos
Hemidesmossomas
Aderência das células epiteliais a membrana basal
Composição protéica INTEGRINA
Filamentos intermediários