ELISA: Teste Imunológico Enzimático

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ELISA: 
 
O teste de “ELISA” se baseia reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações 
enzimáticas. 
A enzima mais comumente utilizada nestas provas é a peroxidase, que catalisa a reação de 
desdobramento da água oxigenada (H2O2) em H2O mais O2. 
 
 Existem diferentes tipos de ensaios que se utilizam da metodologia ELISA: 
ELISA DIRETO, ELISA INDIRETO, ELISA “SANDWICH”, ELISA POR COMPETIÇÃO 
 
O exame ELISA serve para detectar anticorpos específicos no sangue. O teste é utilizado para 
diagnosticar diversas doenças que promovem a produção de anticorpos, como doenças infecciosas 
(HIV, Doença de Chagas...), doenças autoimunes e ainda alergia. 
 
 Também chamada de ensaio de imunoabsorção enzimática. 
 
o ELISA direto: 
O antígeno é imobilizado (impregnado) na placa. Pipeta-se um anticorpo ligado a uma enzima 
uma enzina 
 
o ELISA indireto: 
O antígeno é imobilizado na placa, é uma detecção em 2 passos; 
Primeiro um anticorpo primário é ligado ao antígeno específico depois é adicionado um segundo 
anticorpo ligado à uma enzima que se liga ao anticorpo primário. 
 
o ELISA Sanduiche: 
O anticorpo é impregnado à placa, o antígeno se liga à ele, posterirormente é adicionado outro 
anticorpo ligado à enzima para se ligar em um outro epítopo do antígeno e formar o complexo. 
 
o ELISA por competição: 
O antígeno ou anticorpo está impregnado à placa e o local de ligação tem a competição do 
antígeno ou anticorpo da amostra com um outro pipetado no kit. Esta competição torna o valor 
da leitura inversamente proporcional, pois quanto menos quantidade da substância a ser 
identificada, menos sítios de ligação serão utilizados por elas, os outros sítios de ligação serão 
ocupados pelas substâncias que foram adicionadas. 
 
RESUMINDO: 
 teste é usado para diversos testes em um laboratório, como para detectar doenças 
autoimunes; 
Para que esse teste funcione, uma enzima é ligada covalentemente a um antígeno ou a um 
anticorpo que reconhece o alvo (Ag ou Ac) pesquisado. Se esse reconhecimento for feito, a 
enzima irá reagir com um substrato que levará a oxidação de um cromógeno incolor, que 
apresentará coloração dependendo da concentração do antígeno ou do anticorpo pesquisado. 
 
Vantagens: 
 Teste de alta sensibilidade, detectando quantidades mínimas do alvo pesquisado, com 
isso tem menor risco de falso negativo; 
 Teste com alta especificidade, com muita precisão no resultado daquilo que se 
pesquisa, com isso tem menor risco de falso positivo; 
 Pode-se realizar o teste em várias amostras ao mesmo tempo; 
 Teste rápido e simples de ser realizado; 
 Tem um custo de baixo a médio em relação aos outros testes. 
 
Desvantagens: 
 Teste que necessita de mão de obra especializada; 
 Alguns reagentes utilizados no teste são vulneráveis; 
 Teste muito susceptível a erros mecânicos, como erro de pipetagem, variação no tempo 
de incubação e lavagem, e alterações nos reagentes. 
 
O princípio básico da reação de ELISA é a imobilização de um dos reagentes em uma fase 
sólida, enquanto outro reagente pode ser ligado a uma enzima, com preservação tanto da 
atividade enzimática como da imunológica do anticorpo. 
 
 
 
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