IMUNOLOGIA PCR

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PCR
Alessandra da Silva Rodrigues
Anna Beatriz Barbosa dos Santos
Brígida Valéria Andrade Batista 
Jaine Alencar Muniz
Lara Franco Paes Leme
Luis Guilherme Salvagni
Maria Luiza Guedes da Silva
Mirela Costa Lopes
Polymerase Chain Reaction ou Reação em Cadeia da Polimerase
 É uma técnica pela qual moléculas de DNA são amplificadas milhares ou milhões de vezes de uma forma bastante rápida. Todo o procedimento é realizado in vitro, gerando DNA em quantidade suficiente para análises posteriores.
Linha do tempo - os principais acontecimentos e a evolução dessa técnica:
   1983 – Criação da técnica por Kary Mullis.
1985 – Apresentação da pesquisa à comunidade científica e publicação na revista “Science”.
1986 – Taq polimerase – a descoberta da bactéria Termus aquaticus e extração de sua DNA polimerase possibilitou o aperfeiçoamento da técnica, que não necessitava de adição de mais DNA polimerase a cada ciclo, pois a mesma suporta temperaturas acima de 100°C.
1987 – Com a patente da PCR por parte da Perkin, desenvolve-se a automação para controle do aumento e redução da temperatura, neste momento surge o Temociclador.
1992 – Primeiro teste diagnóstico desenvolvido para HIV, descartando o problema da janela imunológica estabelecida pelo vírus.
1993 – Karry Mullis recebe o Prêmio Nobel de Química.
2003 – Desenvolvimento da PCR em Tempo Real ou qPCR– técnica de PCR na qual utiliza-se além dos primers (iniciadores de amplificação), as sondas marcadas, possibilitando a quantificação do alvo em estudo.
Kary Mullis, inventor da PCR, em foto de 1994
Aplicações da PCR (Polymerase Chain Reaction)
 Testagem para presença de mutações genéticas (Ex. hemoglobinopatias, fibrose cística); 
 Estudos de alterações genéticas com implicações terapêuticas (farmacogenética); 
 Estudos de imunogenéticas (Ex. transplante de órgãos). 
 Presença de agentes patogênicos; 
 Estudos de diversidade genômica; 
 Investigações forenses (DNA fingerprinting); 
 Análises de expressão, mutagênese, estudos de associação (genômica e filogenia).
Extração de DNA
Reação em Cadeia da Polimerase
COVID-19
 PCR em tempo real
FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer)
Curva de amplificação
Referências Bibliográficas
Arnaldo, ZAHA, FERREIRA, Henrique Bunselmeyer, and PASSAGLIA, Luciane M. P. – organizadores. Biologia Molecular Básica, 4ª edição. ArtMed, 2012.
Zhu, H., Zhang, H., Xu, Y., Laššáková, S., Korabečná, M., & Neužil, P. (2020). PCR passado, presente e futuro. BioTechniques , 69 (4), 317–325. https://doi.org/10.2144/btn-2020-0057