AOL 2 (Biologia Molecular)

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Questionário 2
Pergunta 1
 
Até a década de 70 era ainda muito difícil de estudar a molécula de DNA, sequenciá-la para
analisar os genes de forma mais aprofundada.
Essa questão só ficou melhor após o desenvolvimento de técnicas modernas de
sequenciamento, os dois métodos que revolucionaram esse campo foram:
A. A técnica de sequenciamento de DNA sofreu pouco avanço nos últimos anos, muito
devido ao alto custo de sua aplicação.
B. O desenvolvimento das polimerases estáveis permitiu um sequenciamento mais seguro
e rápido, diferenciando-os das demais técnicas.
C. As técnicas de reação em cadeia da polimerase foi a única técnica capaz de
revolucionar os métodos de sequenciamento de DNA
D. A metodologias de sequenciamento de Gilbert e Sanger revolucionou a forma de
se fazer o sequenciamento de DNA.
E. O método de DNA recombinante foi revolucionário permitindo sequenciar um genoma
completo de forma rápida, eficaz e com baixo custo.
 
Pergunta 2
O avanço das tecnologias e métodos para aprimoramento das técnicas de PCR permitiu o
desenvolvimento de diversos tipos diferentes de PCR. Um dos tipos mais proeminentes e mais
utilizados é a PCR em tempo real.
Essa técnica se caracteriza pelo fato de:
A. A qPCR recebe essa denominação, representada por essa sigla, pelo fato da polimerase
nessa reação ser especializada permitindo a quantificação do fragmento de polimerase
B. A tecnologia de PCR em Tempo Real (qPCR) é uma evolução do método de PCR
(Polymerase Chain Reaction ou Reação em Cadeia da Polimerase). Seu princípio
se baseia na duplicação de cadeias de DNA “in vitro” que pode ser repetida
diversas vezes, gerando quantidade de DNA suficiente para realizar diversas
análises. Com apenas um único fragmento de DNA é possível reproduzir milhões
de cópias.
C. Essa técnica se diferencia por não precisar de um DNA molde para amplificação, basta
apenas adicionar um DNA de concentração conhecido para que ele possa ser
quantificado durante a reação.
D. A PCR em tempo real segue o mesmo padrão da técnica normal, possibilitando apenas
à amplificação em tempo real, sem permitir a quantificação da molécula alvo.
E. A técnica em tempo real é pouco viável na prática, sendo por esse motivo pouco
aplicável em nenhuma área de atuação, se restringindo a pesquisa científica em
institutos apenas.A reação de amplificação do DNA é acompanhada de outro fragmento
de DNA com concentração conhecida, possibilitando a quantificação do alvo em tempo
real, por isso a sigla qPCR.
Pergunta 3
A manipulação do DNA envolve um conjunto de técnicas que estão inseridas na disciplina
denominada biologia molecular, e se empenham em estudar e desenvolver formas de isolar,
clonar, manipular e estudar o DNA dos organismos vivos.
Em relação ao histórico desse procedimento realizado pelo homem podemos afirmar:
A. Através da manipulação do DNA a ciência deu um grande salto do entendimento do
código genético, contudo o custo e complexidade das técnicas fizeram com que elas não
fossem levadas adiante.
B. A tecnologia do DNA é a composição de técnicas que permitem o homem apenas
estudar o DNA e os genes nos ambientes acadêmicos, dentro dos institutos de
pesquisa.
C. As técnicas de manipulação são extremamente recentes só sendo capazes de serem
desenvolvidas após o conhecimento detalhado da estrutura e composição do DNA e dos
genes como um todo.
D. A manipulação do DNA pelo homem não é um processo recente sendo realizado
há muitos séculos atrás, através de cruzamentos seletivos para obtenção de
características o homem “domesticou” várias espécies.
E. O homem, apesar do desenvolvimento tecnológico na área de manipulação genética, só
consegue atualmente isolar um gene para estudá-lo, não tendo esse procedimento uma
aplicação muito prática na sociedade.
 
Pergunta 4
O conhecimento do código genético, caracterizado pelas sequências específicas de
nucleotídeos, foi fundamental para o desenvolvimento das tecnologias do DNA.
Encontrar ferramentas que fragmentassem esse DNA nessas sequências específicas para
permitir a manipulação desse código foi imprescindível na época.
Sobre as ferramentas que possibilitaram isso é correto:
A. Um grande salto para as tecnologias do DNA foi a descoberta das enzimas bacterianas
conhecidas como enzimas de restrição, porém essa técnica é pouco aplicável por cortar
apenas sequências curtas.
B. As enzimas de restrição se mostraram ferramentas importantíssimas para utilização
como tesouras moleculares, porém sua obtenção a partir de bactérias torna essas
enzimas não aplicáveis em seres humanos.
C. O homem ainda busca o desenvolvimento de ferramentas que consigam clivar o DNA
em regiões específicas e que não atuem de forma aleatória como a maioria das enzimas
atuais.
D. A descoberta de tesouras moleculares não é uma prioridade, na atualidade, para o
desenvolvimento da tecnologia do DNA, visto que o grande enfoque no momento e
sequenciar e conhecer os genes humanos
E. A descoberta de uma classe de enzimas bacterianas denominadas enzimas de
restrição, capazes de cortar o DNA em sequências altamente específicas, foi um
marco no desenvolvimento das tecnologias do DNA.
 
Pergunta 5
O método de PCR já é bem estabelecido com uma técnica de vanguarda na biologia molecular e
que apresenta muitas vantagens em relação ao processo anterior de amplificação do DNA, por
isso sendo aplicado em vários campos do conhecimento.
Sobre o diferencial que essa técnica apresenta podemos citar:
A. A PCR é capaz de replicar sequências do DNA in vitro sem a necessidade do uso
de células e com grande rapidez e seletividade.
B. A rapidez com que é feita a replicação do DNA através da PCR é seu grande diferencial,
contudo a seletividade dessa técnica ainda é muito baixa.
C. A grande diferença da técnica de PCR é que ela é capaz de replicar grandes pedaços de
DNA com o auxílio de células específicas.
D. O grande diferencial é apenas poder realizar a replicação in vitro, sendo um processo
tão demorado e custoso como os anteriores.
E. O processo para amplificar DNA com base na PCR é diferente do anterior, pois é feito
uma parte in vitro e outra com a utilização de células.
 
Pergunta 6
Os métodos automatizados aprimoraram a técnica de Sanger trazendo um desenvolvimento
ainda maior dos processos de sequenciamento do DNA.
Entre os fatores que tornam o método automatizado melhor do que o tradicional podemos citar:
A. O sequenciamento automatizado rompeu totalmente com o método de Sanger aplicando
procedimentos totalmente novos.
B. O uso de marcadores fluorescentes permitiu um sequenciamento mais seguro que
o radioativo e mais rápido por ser feito através de leitura automatizada.
C. O uso de marcadores radioativos é característico das técnicas automatizadas,
permitindo uma leitura mais eficaz.
D. O alto custo da automatização é um fato que impossibilita o uso desse tipo de técnica
em larga escala.
E. A única característica que a diferencia do método de Sanger é a utilização de
marcadores fluorescentes.
 
Pergunta 7
A reação de cadeia da polimerase – PCR, além de tecnologias para seu funcionamento precisou
do estudo e identificação de uma série de variáveis que impactam diretamente na eficácia dessa
técnica.
Sobre as etapas fundamentais para realização da PCR é correto afirmar:
A. A PCR consiste em três etapas que são a desnaturação da proteína para abertura
da fita de DNA, ligação dos iniciadores sintéticos e ampliação através de enzima
Taq DNA polimerase.
B. As etapas para realização da PCR não estão relacionadas com a obtenção das cópias
de DNA, sendo essas dispensáveis para realização de todo o processo de amplificação.
C. Para a realização da PCR não é necessário quebrar, ou seja, desnaturar a dupla fita de
DNA, sendo totalmente possível amplificar os fragmentos de DNA mesmo mantendo sua
estrutura de dupla hélice.
D. Enzimas conhecidas como polimerases são as principais responsáveis pela amplificação
do DNA por adicionarem os pares complementares,por isso são os únicos fatores
indispensáveis para a PCR.
E. Pelo fato de a PCR estar ainda em fase experimental ainda não há um protocolo
totalmente estabelecido para realização dessa técnica, sendo possível adaptar a
diversos outros protocolos
 
Pergunta 8
A clonagem de um gene é um conjunto de técnicas que permite isolar uma sequência de DNA e
simplificá-la para uma aplicação desejada. As técnicas do DNA recombinante são bastante
usadas para esse fim, isso até o desenvolvimento das técnicas atuais de amplificação.
Sobre as técnicas atuais para amplificar sequências de DNA, podemos afirmar:
A. A técnica denominada reação em cadeia da polimerase – PCR vem substituindo os
métodos de DNA recombinante por serem mais rápidos, sensíveis e baratos.
B. Os processos para amplificar fragmentos de DNA ainda são pouco usados devido a sua
complexidade e alto custo.
C. As técnicas de DNA recombinante ainda são as mais utilizadas para amplificar
fragmentos de DNA, visto que nenhuma outra técnica melhor foi desenvolvida
D. A amplificação do DNA é um procedimento ainda em experimentação, por isso somente
utilizado nos institutos de pesquisa científica.
E. Na atualidade, a reação em cadeia da polimerase – PCR é uma alternativa ainda pouco
usada para amplificar o DNA, devido a sua alta complexidade.
 
Pergunta 9
O sequenciamento do genoma de organismos vivos dependeu de uma série de fatores que vão
desde o desenvolvimento de tecnologias até a evolução do conhecimento sobre biologia
molecular e das características intrínsecas da molécula de DNA.
O estudo do genoma contribui:
A. No diagnóstico de microrganismos patogênicos que impactam a saúde, sendo o estudo
do genoma focado somente nesta área da medicina, visto seu potencial de aplicação.
B. O sequenciamento de DNA genômico por completo, por ser extremamente complexo,
ainda não foi totalmente possível, sendo necessário maior investimento e
desenvolvimento nessa área.
C. Na identificação de genes capazes de causar doenças genéticas, no entendimento
dos processos evolutivos e na medicina através da prevenção, diagnóstico e
formas de tratamento para diversas doenças.
D. Apenas na identificação de genes mutantes capazes de causar doenças genéticas em
humanos, sendo outras aplicações que não sejam essas impossíveis de serem
desenvolvidas.
E. A genômica é uma área da ciência focada no estudo da natureza química dos genes dos
diversos organismos vivos, sem se preocupar com a ordem das sequências nas quais
eles estão dispostos.
 
Pergunta 10
A partir da virada do século novas abordagens para o sequenciamento de DNA, que romperam
totalmente com os métodos de Sanger, foram desenvolvidos.
Denominados de sequenciamento de nova geração eles apresentam uma superioridade sobre
as técnicas anteriores, principalmente evidenciados por mudanças como:
A. O que diferencia os sequenciamentos de nova geração dos anteriores é a quantidade de
bases que cada um pode obter, sendo as outras características preservadas iguais às
técnicas anteriores.
B. As mudanças que as técnicas na nova geração apresentam é somente o baixo custo, já
que o método de sequenciamento é apenas uma adaptação da metodologia de Sanger.
C. As técnicas de nova geração só receberam esse nome pois utilizam sequenciamento
automatizado com base em marcadores fluorescentes de baixo custo e alta
especificidade.
D. A velocidade e quantidade de etapas, a baixa concentração das amostras de DNA
e o custo extremamente baixo são as mudanças mais significativas das
tecnologias de nova geração.
E. A única mudança realmente significativa das técnicas de nova geração foram as baixas
concentrações nas quais as técnicas podem ser realizadas, tendo a possibilidade de
usar pequenas quantidades de DNA.