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Genética Bacteriana Gabriella Chefer -104 • Toda informação genética necessária a vida está armazenada no material genético de um indivíduo • A informação genética pode ser usada de duas formas entre as gerações de celulas (replicação) e no interior de uma célula ( expressão gênica) DNA • È um filamento duplo de uma cadeia de polinucleotideos • Bases complementares (A-T, C-G) = Adenina e Timina citosina e guanina RNA • É um filamento único • RNA (mensageiro) • O açúcar è uma ribose • Bases complementares = substituição da tímina por uracila • Para a produção da proteina è necessário RNA mensageiro, RNA ribossomal (tradução) RNAt transportador Armazenamento da informação genética bacteriana • As informações essenciais estão contidas no material do tipo cromossômico • As informações extras estão contidas no material do tipo extra cromossômico (ou plasmideos) Material do tipo cromossômico ü DNA do tipo circular ü Nucleoide ü Haploide ü Replicação semi- conservativa ü Tamanho variável ü Mycoplasma spp-580 kbp – 475 - genes potenciais. Não possui parede celular, è intracelular obrigatório ü E.coli – 4639 kbp – 4288 genes potenciais. OBS Genes potenciais = capacidade de carrear informações que podem ser expressas em uma proteina ü Organização em Operons= são estrutuas típicas de bactérias que permitem-nas expressarem a informação genética de forma particular e otimizada ü Há uma Participação das proteínas, condensando o material dentro da célula bacteriana Material do tipo extracromossomico (plasmideos) ü DNA de fita dupla circular ü Replicação idependente do cromossomo ü Não è essencial para a sobrevivência da celula sob condições não restritivas Expressão Gênica • O filamento em azul representa DNA, em um modelo semi conservativo, uma dessas fitas começa a ser transcrita pela RNA polimerase. A timina começa a ser substituída pela uracila e a partir do momento em que o RNA mensageiro começa a ser produzido, tem- se a primeira etapa da expressão genica. Após a formação do RNAm, tem a leitura dele pelo RNA ribossomal com a participação do RNAt, produzindo a cadeia de polipeptìdeos. Conceitos importantes • Gene é um segmento de DNA que contém a informação necessária para codificar uma proteina. • Operon è uma organização estrutural típica de genomas procariòticos, na qual duas ou mais sequências codificadoras de produtos genicos estão sob o controle transcricional de um mesmo conjunto de sequências reguladoras. Em um operon, as sequencias codificadora são transcritas em um único RNA, chamado de mRNA policistronico • Promotor è uma sequência especifica de DNA reconhecido pela RNA polimerase. • Operador è uma sequência especificado DNA reconhecida pelas proteínas. • Região codificadora è uma porção do gene que inclui sequência que serão transcritas e traduzidas em proteínas,Terminados è uma sequência de DNA que marca o final da transcrição do gene ou operon Regulação Gênica • Vai regular se um gene vai ser expresso, se vai ser trazido ou transcrito. • Genes consecutivos x Genes regulados o Genes consecutivos = são genes que precisam estar constantemente ativados, ou seja, são constantemente expressos, o produto desses genes estão relacionados a questões nutricionais, metabólica (viabilidade da celula) o Genes regulados= pode ser ativado ou não. Esse genes vão estar relacionados às condições e componentes do meio • Sistema de repressão e indução o Repressão= a atividade de determinado gene vai ser reprimida, ou seja, o gene que estava ativado passa a ficar desativado. A linha vermelha representa o número de bactérias que estão metabolicamete ativa, a linha preta indica a producao de proteínas, e na linha azul è a expressão de enzimas que estão relacionados com a síntese de aminoácido chamado arginina § Arginina è um aminoácido essencial para a função metabólica o Indução = o gene que estava inativo passa a ser ativo. As celulas estão metabolicamente ativas. Em azul, mostra que foi adicionado uma lactose, e então o gene foi ativado para a producao da enzima beta galactosidase que vai degradar a lactose • Indução OPERON LAC o O gen inibidor foi transcrito e traduzido e a proteína repressora foi produzida que vai se ligar na região operadora. Logo há um bloqueio Físico o A região promotora que è reconhecida pela rna polimerase no processo de transcricao. o E tem genes relacionados a informação genética a ser codificada (Lac z, Lac y e Lac a ) vão expressar uma enzima ou proteina que vai ser utilizada na metabolização da lactose o Na ausência da lactose não há produção de componentes desnecessários o Na presença da lactose no meio permite que a proteina repressora se ligue a essa lactose deixando livre a região operadora (de forma inativa). Quando a RNA polimerase se liga a região promotora há transcricao e consequentemente a tradução, resultando na produção das enzimas o È necessário a ação das enzimas beta galactosidase, permeasse e transacetilase para que a lactose seja metabolizada o Na forma do operon permite a leitura, tradução e transcrição simultânea desses genes uma vez que os componentes agem de forma conjunta Repressão Operon trp Na ausência do triptofano • Para a produção do triptofano è necessário 5 genes (e,d,c,b e a ). Esses genes que estão sendo expressos, estarão ativos. Logo não há nada ligado na região operadora. • Então o gene R não esta produzindo o componente repressor (ativo) e não está ligado a região operadora, logo o RNA polimerase faz a leitura dos genes, transcreve, e a tradução acontece e o triptofano è produzido no final, uma vez que ele è essencial a vida. Na presença do triptofano • O triptofano nesse modelo è considerado um co repressor, ou seja, ele vai se ligar a proteína repressor de forma que a ligação tenha afinidade pela região operadora. Havendo um bloqueio Físico, impedindo que a RNA polimerase transcreva os genes logo, a bactéria para de produzir as 5 proteínas e passa a usar o triptofano que “foi dado de graça”. Então a bacteria economiza energia. Mecanismos de variabilidade genética Como os organismos evoluem ? • Alterações genotipicas são importantes para gerar variabilidade e contribui, assim, para o processo de evolução dos micro-organismos. Evolução requer variabilidade • Face a uma mudança brusca no meio ambiente, as bactérias e outros micro-organismos possuem um conjunto de mecanismos geradores de alterações genéticas que conduzem a variantes, fornecendo-lhes assim a possibilidade de contornar situações que ponham em risco a sua sobrevivência. Mecanismos de transferência de material genético Ø Permite uma melhor adaptação a celula Ø Transformação = a celula bacteriana adquire um material genético exógeno de uma bacteria morta • È um processo pelo qual o DNA livre è incorporado em uma célula receptora • Requerimentos para a transformação o Bactérias tem de ser transformavel o Células em estado de competência o Presença de DNA livre no meio Conjugação= envolve a participação de 2 bactérias vivas e metabolicamente ativas que vão compartilhar a informação genética do tipo extracromossomal (principalmente de resistência ). • È um Processo de transferência de DNA que requer o contato entre as duas celulas. • Requerimento o Contato entre as celulas o Envolve uma célula doadora que possui plasmideo conjugativo (fator de fertilidade) e uma célula receptora o Em E. coli, a célula doadora è denominada F+ e a receptora de F- o Envolve uma estrutura chamada pilus sexual que vai unir as duas celulas. Após estabilizar ocorre uma fusão destas membranas e vai haver a passagem dos plasmideos da celula doadora para a receptora. Após esse processo, inicia a transferência. Como ele è uma fita dupla, conforme ele vai sendo passado para a celula receptora ele vai sendo auto duplicado, formandouma fita dupla. No final, o saldo è de duas celulas F+ que possuem o fator de fertilidade Transdução = envolve a participação de virus que infectam as bactérias chamados de bacteriòfagos. • È a transferência de DNA de uma celula para outra por meio da ação de um virus • A partir do momento em que o virus coloca o seu material genético dentro da célula, alterando o gerenciamento fazendo com que a celula passe a ter funções virais. • No final, ao liberar o bacteriofago pode ter material genético do hospedeiro (bacteriana). Obs pode haver um compartilhamento genético entre espécies diferentes. No laboratório.. • Os testes genotipicos e fenótipicos servem para indentificacao de microrganismos • No teste genotipico a informação genética pode avaliar um perfil de resistência bacteriana, identificar qual bactérias, procurar diferentes genes • O teste fenotípico se baseia na expressão do microorganismo forma como a bacteria cresceu • Avalia-se se è grã positiva ou negativa, esférica, organização celular, presença de pigmento ou não, mucoide, se fermenta Informação genetica em bactérias • Diagnóstico celular • Bactérias não cultivaveis ou pouc cultiváveis • Desenvolvimento de técnicas com elevada sensibilidade e rapidez nos resultados • Capacidade de esporulação • Resistência antimicrobiana
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