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Aspergillus fumigatus em pulmão de ovino no Brasil Huber Rizzo et al., 2016 Lia Palhano Naylson Lima Patrícia Albuquerque Priscila Lelli Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Microbiologia Veterinária II Fortaleza – CE 2021 Introdução 1 Introdução Aspergillus spp. Ascomicetos ambientais, filamentosos saprofíticos com hifas hialinas septadas, oportunistas, capazes de colonizar tecidos vivos Condições de estresse; Imunossuprimido; Terapia prolongada com antibacterianos. • Pneumonia (cordeiros, ovinos, caprinos, bovinos e alpacas adultos); • Mastite, abortamento e lesões no trato gastrointestinal (ovinos); • Rinite (caprinos). Causador de: Aspergillus fumigatus em meio Agar Extrato de Malte (MEA) incubado em estufa a 25°C durante 7 dias. 2 (Fragner et al. 1970) (Gancedo et al. 2000) (Young 1970)(Hughes & Mueller 2008)(Gancedo et al. 2000) (Carmo et al. 2014) Introdução Instalam no tecido pulmonar Lesões nodulares Ingestão do alimento contaminado Transmissão Aspergillus fumigatus Placentite (bovinos e equinos) Abortos 3 Fungo se mantém no ambiente com acúmulo de matéria orgânicaVia aerógena (Latge 1999) (Coberline et al. 2003) Descrever os aspectos clínicos, patológicos e do isolamento do agente em cordeiro, atendido no Ambulatório de Grandes Animais do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal Rural de Pernambuco (AGA/DMV/UFRPE). Objetivo 4 Histórico 5 12 de maio de 2015 Ambulatório de Grandes Animais – AGA, da Universidade Federal Rural de Pernambuco – UFRPE 3,5 kg 3 meses Histórico Ovelha Identificação: 6 Histórico Na residência, era criado com um cão, filhote, da raça Labrador. Não tinha histórico de vermifugação, porém o resultado do exame coproparasitológico de ovos por grama, realizado no dia de sua chegada, foi negativo. Histórico Clínico: • Rejeitado pela mãe, logo após o nascimento; • Nasceu em uma propriedade rural, mas foi transferido para uma residência em Recife/PE. Alimentação: • Leite bovino industrializado (via mamadeira), farelo de trigo e milho. 7 Estado Clínico 8 ● Apatia, pelos eriçados, crostas de secreção na narina esquerda, mucosas oculares rosa-pálidas e linfonodos pré- escapulares e parotídeos aumentados; ● Feridas com secreção purulenta, distribuídas pelo corpo, região cornual e orelhas, causando edema do pavilhão auricular, boletos dos membros anteriores e da cauda. Estado Clínico 9 ✓ Temperatura retal: 40°C; ✓ Olho direito com úlcera de melting; ✓ FC: 144bpm; ✓ FR: 48mpm; ✓ Dispneia expiratória ; ✓ Leve ruído inspiratório; • Animal responsivo ao tratamento • Feridas reduzindo sua exsudação, evoluindo para a formação de crostas ➢ 9° dia de tratamento: paciente prostrado, em decubito lateral ➢ Secreção nasal de coloração avermelhada. ➢ Óbito 10 Estado Clínico Exames 11 • 1°, 3°e 7° dia de internamento: coleta de amostras de sangue, para realização de exame hematológico; e de soro, para mensuração das proteínas plasmáticas total (PPT) e fibrinogênio; • 9°dia de internamento: coleta de soro para exame bioquímico Na necrópsia ✓ Animal em estado de caquexia; ✓ Mucosas e musculatura pálidas; ✓ Atrofia gelatinosa da gordura cavitária; ✓ Traqueia levemente hiperêmica e edematosa em terço médio e distal, respectivamente. Exames 12 Na necrópsia • Pulmões: aumentados de tamanho, com áreas salientes multifocais de aspecto caseoso com formato e tamanhos variados, de coloração amarelada ao centro e vermelha nas extremidades; • Cavidade abdominal: presença de fibrina na serosa dos órgãos, principalmente, no intestino. • Fígado: áreas pálidas; • Cortical dos rins: pelve com degeneração gordurosa; • Baço: hipotrofia. Figura 1. Aspecto lateral de pulmão ovino com áreas salientes multifocais de aspecto caseoso com formato e tamanhos variados decorrente da infecção por Aspergillus fumigatus. Figura 2. Aspecto dorsal dos lóbulos pulmonares do ovino acometido por Aspergillus fumigatus. Exames 13 Na necrópsia • Coletada de fragmentos para análise histopatológica de pulmão, fígado, baço, coração e rim No pulmão: No fígado: • Congestão; • Compressão dos capilares sinusóides, -infiltrado inflamatório periportal; • Proliferação de ductos biliares; • Hiperplasia e hipertrofia de hepatócitos. • Lesões granulomatosas; • Exsudato fibrinoso nos brônquios; • Infiltrado inflamatório do tipo mononucleares difuso; • Proliferação de fibroblastos; • Manto epitelióide com presença de imagens negativas de hifas e macrófagos espumosos . Exames 14 • Atrofia da região cortical, medular, paracortical; • Rarefação da polpa branca; • Perda da relação córtico-medular; • Congestão medular e hiperplasia dos cordões medulares. No baço: • Espessamento da cápsula de Bowman; • Nefrose; • Infiltrado inflamatório intersticial do tipo mononuclear • Atrofia do glomérulo difusa; • Presença de áreas de fibrose no espaço intersticial. Rins: Achados histopatológicos: • Quadro de broncopneumonia fúngica; • Hepatite periportal; • Atrofia esplênica; • Nefrose. Nos fragmentos pulmonares: • Desenvolvimento exuberante de fungo filamentoso com coloração acinzentada e grande quantidade de hifas aéreas Exames 15 Resultados 16 ● Imprints em lâminas com corante panótico; ● Pneumonia obstrutiva. ● Micrografia do crescimento fúngico; ● Fita adesiva em lâmina com azul de metileno; Resultados 17 Figura 4. Micromorfologia das estruturas vegetativas e aéreas (reprodutivas) de Aspergillus fumigatus. Azul de metileno. 100X. Características Clínicas Patológicas Microbiológicas Resultados 18 Diagnóstico 19 Estruturas de frutificação. Meio Saboraud-dextrose Diagnóstico Figura 5. Hifas septadas e ramificadas em tecido pulmonar de ovino acometido de aspergilose. Panótico. 100X. 20 Vesícula esférica e carreira dupla de fiálides. A. flavusA.fumigatus Vesícula entumecida Diagnóstico 21 A. flavus Descrita como a segunda mais patogênica. Maior virulência. Diagnóstico padrão: Corpos de frutificação. Diagnóstico 22 Conídios esféricos, lisos, dispostas em cadeias longas. Rápida formação nos meios Ágar sangue e Ágar Saboraud - dextrose. Consistência granular e algodonosa com pigmentação variada. A. fumigatus Caracterísicas macromorfológicas Cultivo Diagnóstico 23 Dificuldade de uso na rotina microbiológica PCRImunohistoquímica Técnicas de alta sensibilidade e especificidade 24 Microscopia Broncopneumonia difusa Figura 3.1. Fotomicrografia de pulmão de ovinos acometido por Aspergillus fumigatus. Observar pequenas áreas de parênquima pulmonar funcional (estrela vermelha), bronquíolo respiratório (estrela amarela) e circundando extensas áreas de processo inflamatório (estrela verde) (A e B). 25 • Reação inflamatória crônica granulomatosa. • Infiltrado inflamatório mononuclear rico em macrofágos. Microscopia Figura 3.2. Barra = 50µm; detalhe do infiltrado inflamatório mononuclear rico em macrófagos (seta preta) (C) 26 Citomarcação de hifas fúngicas no parênquima pulmonar. Figura 3-1. PAS. Barra = 4µm.; citomarcação de hifas fúngicas no parênquima pulmonar (seta azul) (E) Microscopia 27 Necrose de coagulação e trombose fúngica vascular. Diferem-se dos achados presentes neste relato. Pequenas áreas necróticas em associação com neutrófilos e linfócitos Discreta hepatite periportal sem presença de hifas. Rim Fígado Outros achados microscópicos 28 Conclusão 29 Aspergillus fumigatus pode ser considerado como um agente etiológico causador de pneumonia fúngica fatal em ovinos, a depender da situação de imunossupressão que predisponha a penetração e desenvolvimento do mesmo no parênquima pulmonar do susceptível. Conclusão 30 CREDITS: This presentation template was created by Slidesgo, including icons by Flaticon, and infographics & images by Freepik. Obrigado (a)! 31 http://bit.ly/2Tynxth http://bit.ly/2TyoMsr http://bit.ly/2TtBDfr
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