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BIOMEDICINA UNIVERSIDADE UNICESUMAR @biomeedstudies MÉTODOS INTRODUÇÃO Os materiais utilizados em laboratório e os locais de manipulação podem veicular agentes infecciosos. A limpeza, desinfecção ou esterilização dos materiais e a limpeza do ambiente são ações de biossegurança. A conscientização é importante!!! DESCONTAMINAÇÃO → Descontaminação: Utilização de processos que eliminam total ou parcialmente microrganismos. • Objetivo: tornar qualquer material seguro para o descarte final ou para reutilização. • Processos de descontaminação: • Limpeza • Desinfecção~~ao • Esterilização O álcool em gel por que passamos, passamos para fazer assepsia, mas não descontaminação, a descontaminação fazemos quando lavamos as mãos. LIMPEZA • Limpeza: Conjunto de ações que visa à remoção de sujeiras e detritos, com a finalidade de manter em estado de asseio objetos e superfícies. • Compreender a lavação com água e sabão, escovação, ficção ou esfregação e uso de pano úmido. • Varredura e expanação seca • Treinamentos periódicos. 3 DESINFEÇÃO Consiste na destruição, remoção ou redução dos microrganismos patogênicos na forma vegetativa presentes num material inanimado. A desinfecção não elimina formas esporuladas. Faz-se a desinfecção antes do procedimento • Álcool 70% na bancada de trabalho • Hipoclorite 0,5% Exemplo: Desinfecção da bancada com álcool. ASSEPSIA é o procedimento ou conjunto de procedimentos que visam impedir a penetração de microrganismos em local que não os contenha. • Não se faz assepsia e sim se trabalha em ambiente com assepsia, não se faz em tecido vivo. • Exemplo: Quando se trabalha em um ambiente de microbiologia até 15 cm de raio do bico de Bunsen, o ambiente nesse espaço está asséptico, porque a chama elimina os microrganismos pelo calor. • Exemplo: Manipulação em câmara de fluxo laminar. • Função da desinfecção é impedir a contaminação microbiana onde se está realizando o procedimento/experimento. BIOMEDICINA UNIVERSIDADE UNICESUMAR @biomeedstudies ANTISSEPSIA Quando este tratamento é voltado para TECIDOS VIVOS - É ANTISSEPSIA. • Ter que descontaminar uma parte viva, um tecido vivo. • Inibe o crescimento de microrganismos em tecidos vivos através do uso de substâncias bacteriostáticas ou bactericidas na região. • Exemplo: Higienização da pele com clorexidina ou álcool 70% antes de realizar uma coleta sanguínea. ALCOÓIS Usos: Desinfecção e antissepsia • Antissepsia de pele → (Exemplo: coleta de sangue) • Descontaminação de utensílios médicos → (Exemplo: termômetros) e superfícies de trabalho MECANISMO DE AÇÃO: Desnaturação (coagulação) e inativação de proteínas Desorganização da membrana plasmática (dissolve lipídeos) Remoção mecânica dos microrganimos. Não esterilizante Álcool - 60-90% - Propicia a desnaturação de proteínas e de estruturas lipídicas da membrana plasmática e consequente destruição do microrganismo com maior eficiência. DESINFETANTE X ANTISSEPTÍCO • Grau de toxicidade aos tecidos. • Concentração de uso. Concentração do agente químico e Toxicidade aos tecidos Antissepsia: caso particular de desinfecção, referindo-se à remoção de microrganismos patogênicos na forma vegetativa em tecidos vivos. DETERGENTE (surfactantes) • São agentes de superfície • Utilizados como antissépticos e para remoção mecânica. Mecanismo de ação: desnaturação de proteínas, interferência em processos metabólicos e lesão da membrana plasmática do microrganismo. • Não existe um agente químico ideal para todas as finalidades. • Utilizados em situações que impedem o uso de agentes físicos, principalmente o calor (materiais termolábeis como equipamentos, pisos e tecidos vivos). • Em geral, não proporcionam esterilidade. → Reduz as populações microbianas a níveis seguros. BIOMEDICINA UNIVERSIDADE UNICESUMAR @biomeedstudies DESINFECÇÃO QUÍMICA Maior Resistência Menor Resistência ESTERILIZAÇÃO Esterilização: processo de destruição ou eliminação total de todos os microrganismos, incluindo seus esporos. Utiliza procesimentos: Físicos: Exemplo calor úmido Físico Químicos Exemplo: Calor + agente químico Esterilização Rápido e vantajoso Esterilização por calor úmicos – Autoclavação: Método sísico ráido (15 a 30 min.) realizado em autoclaves, a 121°C As autoclaves são equipamentos que realiza, o processo de esterilização utilizando vapor saturado sob pressão Método esporicida mais utilizado e mais confiável Indicado para materiais termorresistentes Monitoramento da autoclavação: Realização de testes biológicos periódicos com esporos de Bacillus strearothemophilus (indicador biológico) Identificação visual dos pacotes com fita termossensível ( assegurar as alyas temperaturas) Controle diário da qualidade do vapor, temperatura, pressão e tempo. Esterilização por óxido de etileno: Indicada para materiais termossensíveis, pois utiliza baixas temperaturas (29°C a 65°C) Alto custo, processo lento, perigoso, Plasma de peróxido de hidrogênio: Método sísico-químico: associa o calor a um agente químico (perócido de hridrogênio) Realizado no equipamento Sterrad 100 através de ciclos curtos ( 75 a 85min.) Ciclo livre de resíduos ESTERILIZAÇÃO → Esterilização por calor a seco: ESTUFA E FORNO DE PASTEUR → Não pode ser usado para esterilização Art. 92 Não é permitido o uso de estufas para a esterilização de produtos para saúde. PROCEDIMENTOS DE LIMPEZA No laboratório, os pisos não são varridos. Utiliza-se pano úmido (exclusivo para o chão) em balde com água e sabão embrulhado no rodo. Outras superfícies PROCEDIMENTOS DE DESINFECÇÃO LOCALIZADA Utilização de desinfetantes na descontaminação de áreas e superfícies: O hipoclorito de sódio é o mais utilizado para piso, tetos, paredes, vidraças, bancadas e outras superfícies não metálicas. Métodos químicos de controle microbiano HALOGÊNIOS BIOMEDICINA UNIVERSIDADE UNICESUMAR @biomeedstudies → Os elementos químicos deste grupo, especialmente o Cl e o I - são agentes antimicrobianos efetivos tanto isoladamente quanto em compostos orgânicos e inorgânicos, sendo estes componentes de diversos agentes antimicrobianos. Mecanismo de ação: Cloro: Agente oxidante – destrói moléculas essenciais ao microrganismo Iodo: Impede a síntese de proteínas e ocasiona alterações nas membranas celulares Iodo - I2 • É um dos mais antigos e eficientes agentes antimicrobianos • Ativo: Todos os tipos de bactérias, vários endósporos, fungos e alguns vírus. Usos: Antissepsia de pele → (Exemplo: pré-incisão); Sanitização de utensílios de alimentação e desinfecção do ar - vapores de iodo. Desvantagem: tóxico, corrosivo e tintorial. Iodóforos Combinação de Iodo a uma molécula orgânica da qual é liberado lentamente Povidona-iodo - PVPI – Betadine Emulsões em detergentes (iodopovidona), conhecidas como degermantes. Estas emulsões não são recomendadas para curativos, uma vez que a presença constante do detergente prejudica a cicatrização, entretanto, são indicadas para a antissepsia das mãos, campo operatório e desinfecção de superfícies. Cloro e compostos clorados • O Cl como gás ou em combinação com outras substâncias químicas, é outro desinfetante amplamente utilizado. Como desinfetante tantodoméstico e indústria, quanto para o tratamento de água. • Atividade : bactericida, fungicida e viricida. FORMALDEÍDO E GLUTALDEÍDO • Formaldeído: Comercializada em solução aquosa • Formalina - 30 a 40 % Mecanismo de ação: Composto altamente reativo capaz de inativar constituintes celulares (proteínas e ácidos nucleicos) • Glutaraldeído: • Solução aquosa a 2% - largo espectro de ação • formas vegetativas e esporuladas de bactérias e fungos, alem de ter propriedades viricidas. • É menos irritante e tem maior eficiência que o formaldeído. CONTROLE MICROBIANO POR CALOR Mecanismo de ação: Oxidação e queima dos constituintes celulares 1. Chama direta – Flambagem: • O material é submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em álcool. • Ex: esterilização de agulhas, alças, pinças e outros materiais de manipulação na chama do bico de Bunsen. CONTROLE MICROBIANO POR BAIXA TEMPERATURA Mecanismo de ação: reduz a taxa metabólica da maioria dos microrganismos, impedindo seu crescimento e produção de enzimas e toxinas Vantagens: São germicidas como o Iodo Não coram Não são irritantes à pele – devido ao aumento da solubilidade em água BIOMEDICINA UNIVERSIDADE UNICESUMAR @biomeedstudies Uso: conservação de alimentos, drogas e microrganismos • Efeito microbiostático O congelamento lento pode ser mais nocivo Devido a formação de cristais de gelo. O congelamento rápido em N2, menos nocivo. Congelamento rápido em N2 líquido (-196 °C) CONTROLE MICROBIANO POR DESSECAÇÃO Mecanismo de ação: promove a interrupção do metabolismo celular • Efeito microbiostático - Microrganismos não podem crescer ou reproduzir • mas podem permanecer viáveis por anos • Ao entrar em contato com água voltam ao seu metabolismo normal A resistência ao ressecamento varia conforme a espécie de MO, a forma e intensidade do ressecamento;
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