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1 Microbiologia de Alimentos 04-06-18 Controle do Crescimento Microbiano - O objetivo principal é o de eliminar o microrganismo ou impedir sua proliferação aumentando a fase de latência. - Para eliminar microrganismos, são utilizadas técnicas com temperatura alta, radiação e pressão, ou métodos físicos que podem matar as células microbianas. - Outros fatores podem ser usados para a redução do crescimento microbiano. 1) Higienização - Tem o objetivo de diminuir a carga microbiana. Seleção de matérias primas - Evita que sejam trazidos microrganismos do ambiente externo para o ambiente de manipulação dos alimentos. - Controle de matérias primas e embalagens. Controle de temperatura e tempo durante o transporte e armazenamento - Resfriamento, congelamento e temperatura ambiente para reduzir o crescimento microbiológico. - A temperatura ambiente (cerca de 26ºC) proporciona o crescimento de bactérias mesófilas, portanto devem ser utilizadas outras técnicas relacionadas com fatores intrínsecos e extrínsecos para controlar o crescimento microbiano. - Em temperaturas controladas de resfriamento e congelamento apenas microrganismos psicotróficos crescem (em sua grande maioria são deteriorantes). 2 2) Limpeza ou lavagem - Reduz a quantidade de microrganismos (carga microbiana). - São usados os fatores intrínsecos e extrínsecos associados com boas práticas de fabricação. 2.1) Verduras, frutas e vegetais - Retirar e descartar a embalagem. - Lavagem inicial com água corrente para diminuir a carga orgânica. 2.2) Produtos Cárneos - Não fazer limpeza. 2.3) Ambiente e utensílios Água em diferentes temperaturas - A gordura em contato com água fria tende a se solidificar, atrapalhando a limpeza. - Água quente em proteínas faz com que elas coagulem, o que também atrapalha a limpeza. Pressão da água Jatos de pressão auxiliam da remoção mecânica dos resíduos. Detergentes - Detergentes diminuem a carga microbiana. ↳ Os detergentes também podem ser associados a substâncias bactericidas. - Escolhido de acordo com a sujeira que o material apresentar. ↳ Detergentes alcalinos; ↳ Detergentes ácidos. ↳ Detergentes tensoativos. 3) Desinfecção - Elimina os microrganismos. 3.1) Agentes de Desinfecção - Auxiliam na esterilização, eliminando a maior quantidade possível de microrganismos. - Eliminam microrganismos na forma de células vegetativas. - Clostridium e bacillus esporulados têm maior resistência a esses agentes, portanto nesses casso esses agentes devem ser utilizados junto a fatores intrínsecos e extrínsecos. 3 - Agentes químicos esporicidas podem ser utilizados quando se trata de bactérias que esporulam. 3.2) Condições que afetam a ação antimicrobiana de agentes físicos e químicos Relacionadas ao microrganismo - Depende do tipo de microrganismo: ↳ Se o microrganismo é célula vegetativa ou esporo. - Estado fisiológico da célula (fase LAG, LOG, estacionária ou declínio). - Microrganismos em fase LAG estão mais susceptíveis ao processo de desinfecção. - Na fase estacionária e de declínio há dificuldade na desinfecção, pois os microrganismos estão mais estáveis. - Carga microbiana (quantidade de células vegetativas). Relacionadas ao ambiente e ao material - pH; - Temperatura; - Presença de compostos orgânicos: A limpeza reduz a quantidade de substâncias orgânicas, que podem proteger o microrganismo.; - Consistência do meio; - Tempo para que os agentes façam efeito. 4) Técnicas de desinfecção por agentes físicos 4.1) Calor Seco Forno Pasteur - Transferência de calor pelo ar. - É necessário tempo e temperatura maior (entre 150ºC e 170ºC por 1 ou 2 horas). - Utilizado principalmente para desinfectar instrumentos cortantes, vidrarias limpas e secas (exceto vidrarias volumétricas) e produtos imiscíveis em água como pós e óleos. 4 Incineração - Descarte de materiais. - O calor elimina toda a matéria orgânica presente no material, através da carbonização do material e de microrganismos. - Utilizado para material descartável, animais de experimento e materiais contaminados. Flambagem - Carbonização do microrganismo. - Utilizado apenas na rotina microbiológica para esterilizar alça de inoculação, agulhas de platina, estiletes e bocas de tubos. - O material é posto diretamente na chama de 200ºC a 300ºC por poucos segundos. 4.2) Calor Úmido Autoclave - Utilizada para material que suporte ação do calor e tenha alta atividade de água (meios de cultura, soluções salinas, água a ser esterilizada, instrumentos como sondas, cateteres e rouparia). - Além do uso da temperatura há o uso da pressão também, pois a autoclave funciona como uma panela de pressão. Ebulição - Água fervendo em contato com o material por até 30 minutos. - Auxilia no cozimento, na área de alimentos. - A temperatura no interior do alimento deve chegar no mínimo a 70ºC. ↳ Pode ser observado através da mudança de coloração do alimento. Pasteurização - Utilizado para alimentos líquidos (caldos, leite e sucos). - Pode ser lenta, (temperaturas de 60ºC a 70ºC), rápida (com temperaturas maiores que 70ºC) e temperaturas ultra altas, através do processo de UHT (acima de 100ºC por alguns segundos). 5 Vapor fluente fracionado (tindalização) - Aquecimento e esfriamento em ciclos. ↳ O aquecimento mata células vegetativas e o esfriamento faz os esporos se desenvolverem. ↳ É aquecido novamente para manter os esporos que se tornaram células vegetativas. - Utilizada para materiais onde é necessário diminuir cargas microbianas a níveis mínimos, como medicamentos, soluções de vitaminas e carboidratos. 4.3) Radiações Radiações não ionizantes - Raios UV através de lâmpadas (superficial). - Utilizados para eliminar microrganismos na superfície. Radiações ionizantes - Raios X e raios gama (alta penetrabilidade). - Utilizado para materiais biológicos que não podem sofrer ação de calor, como equipamentos e utensílios. Radiação por micro-ondas - Excitação das moléculas de água, levando a transferência de calor. 4.4) Filtração - Barreira física. - Filtros e poros para reter as células dos microrganismos. - É utilizada a osmose reversa e ultrafiltração. 4.5) Baixas temperaturas - Diminuição ou interrupção do crescimento microbiano. 4.6) Dessecação - Redução da atividade de água. - Reduz microrganismos patogênicos, que precisam de alta atividade de água. 4.7) Pressão osmótica - Uso de açúcar ou sal ou outro agente que cause diferença de pressão osmótica. 6 5) Técnicas de desinfecção por agentes químicos 5.1) Detergentes - Utilizados na limpeza e alguns podem diminuir a carga microbiana. - Em alguns casos, como a clorexidina, que funciona com o detergente que desinfecta. - Os detergentes podem ser alcalinos, ácidos ou tensoativos. 5.2) Álcoois - Antissepsia (da pele) e desinfecção. - Desnatura proteínas das células vegetativas. - Álcool a 70% é a concentração mais efetiva. 5.3) Aldeídos e seus derivados - Alquilam grupos funcionais das proteínas dos microrganismos, inativando esses agentes. - Aldeído fórmico é um dos mais utilizados para ambientes. 5.4) Fenóis e seus derivados - Creolina é o exemplo principal. - Atua sobre as proteínas. - É toxico para ser utilizados em tecidos. - Utilizado para ambientes mais grosseiros, como concretos, calçadas e material poroso. 5.5) Compostos halogênicos e seus derivados - O iodo é o principal composto utilizado, e é aplicado na desinfecção de tecidos, tendo efeito nas células vegetativas e esporos, bactérias e fungos. - É utilizada solução alcoólica com 2% de iodo. - Deixa cor no material utilizdo. 5.6) Clorados - O mais utilizado é o hipoclorito de sódio ou cálcio em ambientes domésticos. - O cloro gasosoé altamente tóxico, portanto deve haver controle efetivo quando utilizado. - Pode ser utilizado através de imersão, aspersão ou nebulização. - São corrosivos para aço inox. - Irritante de mucosa de pele por isso não é usado para antissepsia. 7 - Perde a sua função em situações de pH alto. 5.7) Compostos quaternários de amônia - Tem efeito bactericida, atuando sobre as enzimas da membrana celular de microrganismos. - Efeito menor sobre fungos. - Agentes tensoativos nos detergentes. Clorexidina - Utilizada em sabonetes bacteriocinas e enxaguantes bucais. Pinho - Utilizados em ambientes. 5.8) Compostos iodados - Tem efeito sobre bactérias e fungos. - Possui a vantagem sobre o cloro de ser pouco afetado por matéria orgânica. - Pode ser utilizado por aspersão, imersão e nebulização. - O pH ideal para sua utilização é de 3 a 6. - Menos eficiente que o cloro sobre esporos e vírus. 6) Controle das populações microbianas 6.1) Indicadores de esterilização - Termômetro para indicar a temperatura adequada. - Adicionar substância com ponto de fusão conhecido para determinar a temperatura. - Cultura de microrganismos mais resistentes. - Fitas indicadoras de esterilização. 6.2) Antissepsia das mãos e pele - Iodo; - Álcool. - Triclosan: Utilizado em enxaguantes bucais e sabonetes contra bactérias e fungos; - Clorexidina: Antisséptico químico, antifúngico e bactericida. Promove a ruptura da membrana celular bacteriana.
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