relatório microbiologia

Prévia do material em texto

CENTRO UNIVERSITÁRIO INGÁ
CURSO DE BIOMEDICINA
 MICROBIOLOGIA BÁSICA E IMUNOLOGIA 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA 
PROFESSORAS: DRA. SHEILA ALEXANDRA BELINI NISHIYAMA 
MA. FERNANDA GOMES LODI
ACADÊMICA: ANA PAULA INOE TOMAZINI
MARINGÁ - PR
2020
I- Introdução
Este relatório refere-se a parte das atividades avaliativas do componente curricular Microbiologia Básica e Imunologia do curso de Bacharelado em Biomedicina, modalidade a distância do Centro Universitário Ingá. 
II- Desenvolvimento
Questão 1: Quais as diferenças entre microbiota transitória e residente?
A microbiota normal provê inúmeros benefícios diretos, como a produção de vitaminas e auxílio na digestão. Tais microrganismos ajudam a evitar que microrganismos patógenos invadam facilmente os tecidos causando doenças.
Embora existam diversas espécies diferentes da microbiota normal, esses microrganismos normalmente se dividem em duas categorias: microbiota residente e microbiota transitória.
A microbiota residente do organismo possui espécies vitalícias da comunidade microbiana normal do corpo, mas não são comuns a todos os tecidos. Alguns tecidos não são colonizados e incluem as cavidades pleural e peritoneal, os pulmões, o sistema nervoso central, o sistema circulatório e regiões urogenitais superiores.
A microbiota residente normalmente coloniza a superfície da pele, membranas mucosas, trato digestório, sistema respiratório superior e porção distal do sistema urogenital. Tais microrganismos normalmente não prejudicam o hospedeiro, embora se beneficiem de sobreviver de resíduos celulares e células mortas destes sítios.
Microbiota Transiente
A Microbiota transitória pode tentar colonizar as mesmas áreas do corpo onde se locaiza a microbiota residente, os transitórios são incapazes de permanecer no corpo por longos períodos de tempo devido a:
dificuldade em competir com microrganismos residentes estabelecidos
eliminação pelo sistema imunológico do indivíduo
mudanças físicas ou químicas dentro do organismo que dificultam o seu crescimento.
Questão 2: Qual a importância da manipulação asséptica para o trabalho em laboratório de microbiologia? 
A técnica asséptica é uma ferramenta laboratorial importante e fundamental no campo da microbiologia. Microbiologistas usam técnicas assépticas para uma variedade de procedimentos, como transferência de culturas, inoculação de meios, isolamento de culturas puras e para realização de testes microbiológicos. A técnica asséptica adequada evita a contaminação das culturas por microrganismos estranhos presentes no meio ambiente como microrganismos transportados pelo ar, incluindo os fungos; microbiota da pele do pesquisador, da bancada do laboratório ou outras superfícies; bem como microrganismos encontrados na vidraria e equipamentos não esterilizados. Tais agentes podem potencialmente contaminar culturas, interferindo assim nos resultados do laboratório. O uso de técnica asséptica adequada pode minimizar ou até eliminar o risco de contaminação. Além disso, a técnica asséptica é de extrema importância para manter as culturas de estoque puras enquanto as transfere para novos meios. A técnica asséptica também é essencial para o isolamento de uma única espécie de microrganismo de uma cultura mista para obter uma cultura pura. Além diademais, a técnica asséptica adequada evita que os microrganismos usados ​​no laboratório sejam acidentalmente liberados no meio ambiente e / ou infectem as pessoas que trabalham no laboratório. Isso é especialmente relevante quando os microrganismos patógenos estão sendo manipulados.
 Questão 3: Quais as formas de se realizar o controle do processo de esterilização?
Controlar a qualidade e eficácia dos processos de esterilização. Este controle visa controlar as etapas da esterilização e diagnosticar possíveis falhas e corrigi-las.
O controle dos processos de esterilização envolvem métodos físicos, químicos e biológicos.
Os métodos físicos envolvem o controle e registro do tempo, temperatura e pressão durante a esterilização, além da manutenção do equipamento e aparelhos responsáveis por tais aferições como manômetros e termômetros.
Para o controle químico utilizam-se indicadores que indicam se o material foi exposto à temperatura elevada ou ainda indicar a ação de diferentes componentes como tempo, e vapor. Para tanto, utiliza-se uma tira impregnada por tinta termoquímica que é colocada no interior dos pacotes. Há ainda pastilhas que derretem quando se completa 95% do ciclo da autoclave. Existem indicadores apropriados ao tipo de método utilizado para esterilização, como autoclave, calor seco ou óxido de etileno. 
Os indicadores biológicos comprovam a eficácia da esterilização ao testar a inibição do crescimento de microrganismos ao final do processo. Para tanto, utilizam-se esporos de bactérias específicas de acordo com o processo de esterilização que está sendo controlado. Utiliza-se 106 esporos por unidade de papel, findo o processo de esterilização, estes são incubados para verificar a viabilidade das cepas. Como controle positivo, outro indicador que não passou por esterilização também é incubado. 
Questão 4: O meio de cultura MacConkey é um meio seletivo diferencial amplamente utilizado na rotina dos laboratórios de microbiologia. Explique como ele funciona e quais as indicações de uso.
O ágar MacConkey é o meio seletivo e diferencial mais antigo para o cultivo de coliformes. É empregado para o isolamento e diferenciação de bastonetes gram-negativos, particularmente membros da família Enterobacteriaceae e do gênero Pseudomonas.
A composição do meio inclui peptona, lactose monohidratada, ágar, cloreto de sódio, sais biliares, cristal violeta. A digestão pancreática do ágar e peptonas fornece os nutrientes essenciais, vitaminas e fatores nitrogenados necessários ao crescimento dos microrganismos. A lactose monohidratada é a fonte fermentável de carboidratos. A ação seletiva desse meio é atribuída ao cristal violeta e aos sais biliares, que são inibitórios para a maioria das espécies de bactérias gram-positivas. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico no meio.
As cepas que fermentam a lactose crescem formando colônias vermelhas ou rosa. A cor vermelha se deve à produção de ácido a partir da lactose, absorção do vermelho neutro e subsequente mudança de cor do corante quando o pH do meio cai abaixo de 6,8. As bactérias que não fermentam a lactose, como Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa e Shigella, não podem utilizar a lactose e, em vez disso, usarão peptona. Isso forma amônia, que aumenta o pH do ágar e leva à formação de colônias brancas ou incolores formadas na placa e o ágar que envolve a bactéria permanece relativamente transparente. Essas colônias também podem ter uma aparência dourada a marrom com centros escuros.
A lactose pode ser substituída no meio por outros açúcares e os açúcares de substituição podem ser usados ​​para testar a capacidade das bactérias gram-negativas de fermentar os açúcares de substituição. Por exemplo, o sorbitol pode ser usado como um açúcar de substituição no ágar MacConkey para auxiliar no isolamento e na diferenciação de sorotipos de E. coli enteropatogênicos, como a E. coli O157: H7, também conhecida por E. coli enteroemorrágica (EHEC) pela presença de colônias circulares brancas que não fermentam sorbitol.
O ágar MacConkey é usado para o isolamento de bactérias entéricas gram-negativas; na diferenciação da fermentação da lactose de bactérias Gram-negativas não fermentadoras da lactose; em exames microbiológicos de alimentos e para plaqueamento / inoculação direta de amostras de água para contagem de coliformes; para o exame de leite e produtos lácteos. 
As características das colônias descritas fornecem identificação presuntiva apenas dos organismos isolados. É necessário subcultivar e realizar outros testes de confirmação como testes bioquímicos para identificação final. Algumas cepas podem apresentar crescimento fraco ou falha no crescimento neste meio.
A interpretação dos resultadosno Ágar MacConkey pela característica da colônia pode ser sintetizada conforme tabela 1:
	Escherichia coli
	Colônia rosa a rosa avermelhado
	Enterobacter, Klebsiella
	Colônias rosa Mucóide, 
	Proteus
	Colônias incolores, crescimento abundante
	Salmonella, Shigella
	Colônias incolores, ou cor laranja a âmbar
	Pseudomonas
	Colônias irregulares, incolores a rosa
Bibliografia consultada
MADIGAN. M. T.; MARTINKO. J. M.; DUNLAP. P. V.; CLARK. D. P. Microbiologia de Brock. 14a Ed. Editora Artmed. Porto Alegre, 2016.
NISHIYAMA, S.A.B.; LODI, F.G. Microbiologia Básica e Imunologia. (apostila). Maringá, 2020
TORTORA. G. J.; FUNKE. B. R.; CASE. C. L. Microbiologia. 12ª Ed. Editora Artmed. Porto Alegre, 2017.
VERMELHO, A. B.; PEREIRA, A.; COELHO, R.; SOUTO-PADRÓN, T. Práticas de Microbiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011.