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A PCR em tempo real apresenta três fases distintas, que ocorrem durante a amplificação do DNA alvo. São elas: A PCR em tempo real apresenta uma característica positiva para o trabalho da polícia científica. Qual? O PCR multiplex é uma das técnicas em PCR. Com base nisso, trata-se de uma característica do PCR multiplex: PC-DF Perito Criminal. Um grupo japonês publicou um novo protocolo para a genotipagem de grupo sanguíneo ABO, utilizando iniciadores aleloespecíficos e PCR em tempo real. Pela avaliação de três SNPs situados no gene do ABO, é possível a determinação dos seis principais genótipos do sistema ABO. A ideia do novo protocolo é trabalhar com amostras forenses e fornecer resultados rápidos, visto que o novo método demanda menos de 2 horas e utiliza 2,0 ng de DNA. T. Muro et al. Determination of ABO genotypes by real-time PCR using allele-specific primers. Tokyo: 2011 (com adaptações). Geométrico, liminar e de platô. Exponencial, linear e de platô. Radiciação, Exponencial, linear e de platô. Diferencial, escalar e de platô. Figurativo, alinhamento e de platô. Explicação: Exponencial, linear e de platô. 2. Permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA à medida que a mesma ocorre com auxílio de um computador e de um equipamento apropriado. Permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA com diferença mínima de 96 horas. Permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA com diferença mínima de 24 horas. Permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA com diferença mínima de 72 horas. Permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA com diferença mínima de 48 horas. Explicação: A PCR em tempo real recebe esse nome porque permite analisar e coletar os dados da amplificação do DNA à medida que a mesma ocorre com auxílio de um computador e de um equipamento apropriado. 3. Permite analisar apenas três sequências por alvo por vez Permite analisar apenas quatro sequências por alvo por vez Permite analisar apenas uma sequência por alvo por vez Permite analisar apenas cinco sequências por alvo por vez Permite analisar apenas duas sequências por alvo por vez Explicação: Permite analisar apenas uma sequência por alvo por vez 4. https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# Considerando as informações do texto, a genotipagem do sistema ABO descrita pelo grupo japonês baseia-se em Sobre a técnica de PCR em Tempo Real, assinale a afirmativa incorreta. A PCR Multiplex apresenta uma característica positiva se comparada a PCR Convencional. Qual é essa característica? amplificar a região genômica em questão, utilizando PCR em tempo real, com os três pares de iniciadores aleloespecíficos marcados com fluorescência, simultaneamente, e sequenciar o produto desse multiplex para obtenção dos haplótipos que irão possibilitar a definição dos genótipos. gerar pequenos fragmentos genômicos a partir da amplificação por PCR em tempo real com três iniciadores aleloespecíficos, digerir com enzimas de restrição especificas e fazer a genotipagem pelo perfil observado em gel após eletroforese. utilizar a PCR em tempo real para amplificar cada SNP com os iniciadores aleloespecíficos, sequenciar os produtos em sequenciadores de segunda geração e, a partir do alinhamento das sequências, definir os genótipos. analisar cada SNP individualmente via PCR em tempo real, utilizando iniciadores aleloespecíficos marcados com fluorescência e, de acordo com a avaliação dos sinais de fluorescência, definir o(s) alelo(s) para cada sítio genômico e, com esses dados, definir os genótipos. digerir o DNA com enzimas de restrição específicas para os três SNPs, gerando extremidades colantes que serão aderidas aos iniciadores específicos; posteriormente, esse conjunto será submetido à amplificação por PCR em tempo real, e a genotipagem será avaliada após sequenciamento automático. Explicação: Como a PCR em tempo real (q-PCR) não utiliza eletroforese nem enzimas de restrição. É uma técnica de biologia molecular que detecta e quantifica ao mesmo tempo as sequências usando a fluorescencia presente nos didesoxiribonucleotídeos (dNTPs). 5. A técnica de PCR em tempo real pode ser utilizada para se monitorar a carga do microorganismo presente no indivíduo infectado. Tanto as sondas do tipo TaqMan quanto as do tipo molecular beacons são oligonucloetídeos que possuem um fluoroforo ligado à extremidade 5' e um quencher ligado à extremidade 3'. No PCR em Tempo Real, entende-se por ∆Rn a diferença entre o valor da detecção da reação contendo a amostra de interesse (Rn+) e o valor da detecção da reação controle sem amostra (Rn-). Para as reações de PCR em tempo real multiplex utilizadas para diagnóstico molecular, pode-se utilizar tanto sondas quanto SYBR Green para a detecção dos produtos amplificados. A utilização de sondas marcadas com fluorocromos em uma reação de PCR em tempo real é, na maioria das vezes, mais específica do que a utilização de corantes de DNA fluorescentes como SYBR green. Explicação: Nas reações de PCR em tempo real multiplex utilizadas para diagnóstico molecular utiliza-se SYBR Green para a detecção dos produtos amplificados. 6. Permite analisar duas sequências alvo por vez. Permite analisar três sequências alvo por vez. Permite analisar apenas uma sequência alvo por vez. Permite amplificar várias sequências gênicas de maneira simultânea. Permite analisar quatro sequências alvo por vez. Explicação: https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# https://simulado.estacio.br/bdq_simulados_exercicio.asp# A PCR convencional permite analisar apenas uma sequência alvo por vez. Isso, muitas vezes, não é suficiente para uma análise forense. Nessa situação, uma boa alternativa é a utilização da PCR multiplex, que permite amplificar várias sequências gênicas de maneira simultânea.
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