LISTAS ESTUDOS DIRIGIDO MILTOM ATUALIZADA

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Análise Instrumental – Estudos dirigido 
 
 
 
 
Professor Milton 
 
 
 
 
 
POLLYANA PEREIRA DE SOUZA (MATRÍCULA: 20185128504) 
YASMIM CRISLUCY SILVA DOS SANTOS (201851118829) 
 
 
 
 
FORTALEZA 
2021 
Lista 01 
 
1) Responda os itens a seguir: 
a) Defina os termos "química analítica" e "análises químicas". 
A química analítica é o segmento da química que atua na separação, identificação e 
determinação quantitativas ou qualitativas dos componentes de uma amostra através 
do desenvolvimento de métodos e procedimentos para que essa determinação seja 
possível. Trata-se de uma ciência de medições que envolve um conjunto de idéias, 
métodos e procedimentos para que ocorra a caracterização e identificação da 
quantidade de componentes de compostos químicos conhecidos ou não em uma 
amostra. Estas técnicas e métodos são utilizados na indústria, medicina e em diversos 
outros segmentos, como, meio ambiente, agricultura, geologia, engenharias e biologia 
por exemplo. 
Análise química é o conjunto de técnicas de laboratório utilizadas na identificação das 
espécies químicas envolvidas em uma reação, como também a quantidade dessas 
espécies. As análises químicas podem ser realizadas de três diferentes formas: 
quantitativamente, qualitativamente ou apenas imediata. 
 
b)Descreva algumas aplicações gerais da química analítica no mundo moderno. 
As técnicas utilizadas na Química Analítica são divididas em três grandes áreas: a 
cromatografia, a eletroquímica e a espectroscopia; com cada uma delas 
caracterizando-se por suas particularidades e pelas espécies químicas de interesse 
(analitos) possíveis de detecção e/ou quantificação. 
 
c) Diferencia métodos clássicos de métodos instrumentais. 
Os métodos clássicos são baseados na medida da massa (gravimetria) e volume 
(volumetria) e os métodos instrumentais são baseados na medida de uma propriedade 
física. 
 
d)Quais são as cinco etapas gerais em qualquer tipo de análises químicas. 
As principais etapas são: definição do problema, escolha do método, amostragem, 
preparo da amostra, eliminação das interferências, calibração e medida da 
concentração, cálculo dos resultados, avaliação e ação. 
 
e) Discuta porque um método de separação pode ser usado como parte de uma 
análise química. Cite alguns exemplos de métodos de separação. 
os materiais são separados, determinados e determinados. As técnicas usadas neste 
ramo da química são definidas como o produto químico ou os princípios básicos para 
estudar uma substância que deva ser analisada (o analito). As técnicas para realizar 
estes alvos podem ser combinadas ou cada um pode ser feito separado. A 
identificação da matéria sob o estudo está executada usando uma análise qualitativa, 
quando uma análise quantitativa para usada para determinar quanto (concentração ou 
quantidade relativa total) da substância esta presente no analito. Precipitação: Este é 
um método gravimétrico em que os reagentes e os produtos de uma reação química 
são usados para analisar uma substância. Os íons metálicos de muitos elementos 
podem participar em uma reação com os íons negativos para formar uma substância 
insolúvel, nova chamada o precipitado, que se estabeleça à parte inferior da solução. 
Isto é filtrado para fora e lavado. A massa do sólido precipitado é incorporada na 
equação química relevante para calcular a quantidade total ou a quantidade relativa 
(concentração) de compostos iónicos na solução. 
 
Extração: Este é um procedimento em que uma substância é removida de uma matriz, 
ambos que realizam-se em duas fases imiscíveis. Um exemplo clássico é da extração de 
um composto orgânico de uma fase aquosa em uma fase orgânica. A técnica a mais de 
uso geral para a extração de um composto de uma solução aquosa é a extração do 
líquido-líquido (LLE). O movimento do soluto é baseado na condição do equilíbrio das 
duas fases, como descrito pela teoria da separação. A extração da fase contínua (SPE) é 
um método utilizado da preparação da amostra usado para separar e enriquecer os 
componentes refinados da solução aquosa. Muitas técnicas avançadas da extração 
estão sendo desenvolvidas igualmente. 
 
 
2) Existem vários métodos que podem ser usados para purificar água de um 
laboratório, além da destilação e deionização. Uma lista de algumas dessas técnicas é 
fornecida a seguir. Com base nisso, obtenha informações sobre estes métodos e 
descreva como funcionam: 
a) Osmose reversa. 
A osmose reversa ocorre quando duas soluções, de concentrações distintas são 
separadas por uma membrana semipermeável, (solvente e soluto), naturalmente, o 
fluxo de água pura para a água contaminada, a membrana permitirá apenas a 
passagem de solvente (água pura), retendo os solutos (sais dissolvidos e 
contaminantes), até que o equilíbrio osmótico seja atingido 
 
b) Milli – Q 
 Milli-Q 
é uma marca de sistemas de purificação de água para aplicações laboratoriais, 
fabricados exclusivamente pela Merck Group. A expressão "Água Milli-Q", como é dita 
popularmente no meio laboratorial, faz referência a água ultrapura do tipo l, a qual é 
fornecida apenas pelos equipamentos Milli-Q. A água ultrapura Milli-Q abrange 
diversas aplicações, desde as mais simples até as altamente complexas e sofisticadas, 
tais como: cromatografia (HPLC, UHPLC, LC-MS e IC-MS)¹, análise elementar (AAS, ICP-
MS e ICP-OES)², cultura celular, biologia molecular e bioquímica (PCR³, genética, 
sequenciamento de DNA, microanálise de DNA e RNA). 
 
c)Ultra filtração 
Tratar água de rios e poços para uso dentro dos padrões de potabilidade.Também tem 
a finalidade de dar o polimento necessário ao efluente, para que possa atender aos 
requisitos básicos de Reuso e Descarte do efluente.O princípio de funcionamento da 
Ultra Filtração (UF) é simples e eficiente.As Membranas semelhantes a tubos finos e 
flexíveis possuem poros de 0,01 mícron, que permite a passagem da água mas retêm 
as partículas de são maiores que um centésimo de um mícron. 
 
d) Eletrodiálise 
A Eletrodiálise é um processo que combina o uso de membranas de troca iônica com 
gradiente de potencial elétrico, objetivando a remoção de espécies iônicas de soluções 
aquosas. Ela é capaz de remover íons com cargas elétricas positivas ou negativas. 
 
3)O Aluno Mauro realizou uma série de pesagens de um determinado substrato a 
partir de uma balança analítica que, de acordo com sua última aferição, mostrou um 
intervalo de confiabilidade de 96%. Com base nos valores de pesagens abaixo 
representados, indique a média e o desvio padrão para as amostras. Pode-se afirmar 
que este resultado possui validação científica? (nível de tolerância para validação = 
5%). 
 pesagem 1: 0,0320 g 
 pesagem 2: 0,0321 g 
 pesagem 3: 0,0333 g 
 pesagem 4: 0,0321 g 
 pesagem 5: 0,0328 g 
 
Resp: 
Calculando a média: 
 X = (0,0320 + 0,0321 + 0,0333 + 0,0321 + 0,0328) / 5 = (0,1623) / 5 = 0,03246 g. 
Desvio padrão amostral: 
 DP = 0,000568 
 
4) Os métodos analíticos geralmente são classificados como sendo clássicos ou 
instrumentais. Esta classificação é em grande parte histórica pois os métodos clássicos, 
às vezes chamados de métodos de via úmida, precederam por um século ou mais os 
métodos instrumentais (Skoog, 2002). 
Indique a alternativa que relaciona apenas métodos instrumentais: 
a) Gravimetria, Titulação e Cromatografia 
b) Espectrofotometria, Gravimetria e Cromatografias 
c) Titulações Coulométricas, Espectroscopias e análises ópticas 
d) Cromatografias, Potenciometria e Epectrosocopia 
e) Espectrofotometria, Gravimetria, análises ópticas 
 
5)Relacione a coluna da esquerda com a direita de acordo com as normas propostas 
pela IUPAC: 
(1) Amostra (3) Se refere a uma parcela da amostra 
obtida por seleção ou divisão; uma 
unidade individual do lote aceita como 
parte da amostra ou; a unidade final da 
amostragem multifásica. 
(2) Manuseio de amostra (5)A amostra preparada a partir da 
amostra de laboratório. 
(3) Subamostra (1) Uma parcela do material selecionada 
para representar um corpo maior do 
material. 
(4) Amostra de laboratório (4) Material primário entregue ao 
laboratório. 
(5) Amostra de ensaio (2) Se refere à manipulação a que as 
amostras são expostas durante o 
processo de amostragem, desde sua 
seleção a partir do material original até o 
descarte de todas as amostras e porções 
de ensaio 
(6) Preparação da amostra (7) Se refere ao material efetivo, pesado 
ou medido para a análise. 
(7) Porção de ensaio (6) Isto descreve os procedimentos 
seguidos para selecionar a porção de 
ensaio a partir da amostra (ou 
subamostra) e inclui: processamento no 
laboratório; mistura (homogeneização); 
redução; coning & quartering1; riffling2; 
moagem e trituração. 
 
Com base nas respostas acima, assinale o item que indica a resposta correta: 
a) 3, 5, 1, 4, 2, 7, 6. 
b) 5, 3, 1, 4, 2, 6, 7. 
c) 3, 5, 4, 1, 2, 7, 6. 
d) 1, 3, 5, 2, 4, 6, 7. 
e) 1, 3, 5, 4, 7, 6, 2. 
 
 
Lista 02 
 
1) Um composto de massa molecular de 292,16 g/mol foi dissolvido em um balão 
volumétrico de 5 mL. Foi retirada uma alíquota de 1,00 mL, colocada num balão 
volumétricode 10 mL e diluída até a marca. A absorbância a 340 nm foi de 0,427 numa 
cubeta de 1,0 cm. A absortividade molar para este composto em 340 nm é: ε340= 6.130 
L mol-1.cm-1. 
a) Calcule a concentração em ppmdo composto na cubeta (Considere a cubeta tendo 5 
mL). 
Resposta: x = 20,32 ppm 
Composto X de [ ? ] inicial foi dissolvido em um balão de 5 mL 
retira-se 1 mL deste balão (20% das espécies dissolvidas alí). 
 Dissolve-se 10 vezes (em um novo balão, até a marca de 10 mL) 
Diluções totais: 50 vezes 
 
A =ε.b.c 
Peso Molecular: 292,16 g/mol 
b = 1cm 
A = 0,427 
ε = 6130 L/mol.cm 
 
0,427 = 6130L/mol.cm . 1cm .c 
c= 6,96 x 10-5mol/L (Na cubeta). 
 
ϻ = m/mm.V 6,96 x 10-5= m /292,16 . 0,005 
m =1,016 x 10-4g ( em 0,005 L) Na cubeta ainda!!! 
Para converter em PPM (mg/L), multiplicar massa por 1000 = 0,1016 mg. 
 
Se em 0,005 L ---------- 0,1016 mg 
1L ---------- x 
 
x = 20,32 ppm (Na cubeta de 5 mL e no balão de 10 mL). 
 
[inicial] = 20,32 x 50(quantas vezes foi diluido) 
[inicial] = 1016 ppm 
 
b) Qual era a concentração inicial do composto (balão de 5 mL)? 
[inicial] = 1016 ppm 
 
2) Responda: 
a)Qual o valor da absorbância correspondente à T = 45%? Se uma solução 0,01 mol/L 
exibe T = 45%, qual será a porcentagem de transmitância para uma solução, do mesmo 
composto, de concentração igual a 0,02 mol/L. 
A = - log T 
A = - log (0,45) 
A = 0,347 
b) O que é uma reta padrão e porque em uma análise de espectrofotometria é 
importante que se obtenha uma reta padrão? 
A reta padrão corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância (A) e os 
de concentração. Com base na análise gráfica é possível verificar a linearidade da 
reação e calcular um fator de conversão de valores de absorbância em concentração. 
c) Descreva o processo de funcionamento de um equipamento de espectrofotômetro 
UV-vis. Como o comprimento de onda atua sobre o mesmo 
Uma amostra é colocada dentro do espectrofotômetro. - Há uma fonte de luz e um 
dispositivo chamado monocromador divide a luz em cores, ou melhor, comprimentos 
de onda individuais. - Uma fenda ajustável permite apenas um comprimento de onda 
específico através da solução de amostra. - O comprimento de onda da luz atinge a 
amostra, que está em um pequeno recipiente chamado de cubeta. - A luz passa 
através da amostra e é lida pelo detector. 
3) Imagine a seguinte situação: o dono de uma microempresa pretende saber, em 
média, quantos produtos são produzidos por cada funcionário em um dia. O chefe tem 
conhecimento que nem todos conseguem fazer a mesma quantidade de peças, mas 
pede que seus funcionários façam um registro de sua produção em uma semana de 
trabalho. Ao fim desse período, chegou-se à seguinte tabela:~ 
 
Indique a média e o desvio padrão de cada funcionário durante a semana de 
monitoramento 
Média A: x = (10+9+11+12+8) /5 = 10; DP = 1,41 
 Média B: x = (15+12+16+10+11) /5 = 12,8; DP = 2,31 
Média C: x = (11+10+8+11+12) /5 = 10,4; DP = 1,36 
Média D: x = (8+12+15+9+11) /5 = 11; DP = 2,45 
 
4) A figura abaixo mostra a escala de um antigo instrumento utilizado na espetroscopia 
de absorção. Estime os valores representados pela agulha em ambos os lados superior 
e inferior, da escala (percentual de transmitância e absorbância). 
 
ABS = 550 nm 
A = 0,27 
5) O termo espectroscopia é utilizado nas disciplinas de física e química para se referir 
à técnica de aferimento de dados físico-químicos através da transmissão, absorção ou 
reflexão da energia radiante incidente em uma amostra. Sua origem encontra-se no 
estudo da luz visível dispersa de acordo com seu comprimento de onda, por exemplo, 
por um prisma. A espectroscopia passou a ser utilizada como ferramenta científica 
para sondar a estrutura atômica e molecular, inaugurando o campo da análise 
espectroquímica para analisar a composição dos materiais. 
Sobre esta técnica, faz-se as seguintes afirmações: 
 
I) São três tipos principais de processos pelos quais a radiação interage com a 
molécula: Absorção, Emissão e Espalhamento. 
II) Espectrofotometria utiliza radiação na zona da luz, ou seja, entre o infravermelho e 
o ultravioleta, enquanto um espectrômetros ou espectroscópios são equipamentos 
destinados à análise de radiação, mormente ondas eletromagnéticas (incluindo-se 
nestas a luz visível). 
III) O espectrofotômetro aborda o quantidade de luz refletida por uma determinada 
amostra. 
Qual dos itens abaixo indicam as afirmações corretas 
 
a) I e II somente 
b) I, II e III 
c) Apenas a I 
d) I e III somente 
e) II e III somente 
 
 
 
1) 
 
2) 
 
3) 
 
4) 
 
 
 
 
 
 
 
 
REPRESENTE AS POSSIVEIS ESTRUTURAS PARA OS ESPECTROS ACIMA 
(use o diagrama abaixo como a referência) 
EX.: 1) C6H5N = 101 g/mol 
Pelos espectros: 
Possui: 
Estiramento CH3 
Não tem C = O 
Não tem OH 
CH3 - CH2 - CH2 - NH - CH2 - CH2 - CH3 
 
Função Amina sec. 
 
 
 
 
 
 
 
Lista 03. 
 
 
1. Indique o comprimento de onda e o nº de onda da parte corresponde ao infravermelho no 
espectro eletromagnético. Especifique a região correspondente ao infravermelho próximo, 
infravermelho convencional e infravermelho distante. Qual a região de maior interesse para o 
químico orgânico? 
 O comprimento de onda varia entre, 380 a 780 nm e 7 tipos de ondas eletromagnéticas: 
ondas de rádio, micro-ondas, infravermelho, luz visível, ultravioleta, raios x e raios 
gama. A região correspondente ao infravermelho próximo compreende de 12.800 s 
4.000 c m -1, a radiação no infravermelho convencional de 4.000 a 200 cm -1 e a 
radiação no infravermelho distante compreende de 200 a 100 cm-1. A região de maior 
interesse para o químico orgânico e a região vibracional do infravermelho. 
2. Responda as seguintes questões: 
a) Qual é a radiação eletromagnética de maior energia a com número de onda 1000 cm-1 ou 
2000 cm-1? 
Maior será a com número de onda 2000cm-1 
b) Qual é a radiação eletromagnética de maior energia a de comprimento de onda de 9 µm ou 
8 µm? 
Maior energia a de comprimento de onda 9 µm 
c) Qual é a radiação eletromagnética de maior energia a com número de onda igual a 3000 
cm-1 ou a de comprimento de onda igua a 2 µm? 
Maior energia será com número de onda igual a 2 µm 
d) Qual o fenômeno provocado nas moléculas pela radiação infravermelha? 
 Espectroscopia de Absorção no Infravermelho (IRS). O movimento dos átomos que 
constituem as moléculas resulta em rotações e vibrações moleculares. ... Quando o dipolo 
oscilante se encontra em fase com o campo elétrico incidente ocorre a transferência de 
energia da radiação para a molécula resultando em uma transição 
3.Indiqueos tipos de vibrações moleculares existente e explique o que ocorre em cada uma 
delas. 
Estiramentos axiais: 
Estiramento simétrico 
Estiramento assimétrico 
Deformação angular: 
Angular simétrica no plano (tesoura) Angular assimétrica no plano (balanço) 
 Angular simétrica fora do plano (torção) 
Angular assimétrica fora do plano (abano) 
4. O que é um espectro de infravermelho? 
O espectro no infravermelho é baseado nas vibra ções moleculares, mede diferentes 
tipos de vibrações ent re átomos d e acordo com suas ligações interatômicas, 
observando -se a absorção ou espalhamento dessa radiação. 
5. Que fonte de radiação é capaz de produzir radiação infravermelha? 
A radiação infravermelha é emitida por meio de objetos quentes, como o Sol e, apesar 
de não poder ser vista, é sentida na forma de calor. Os corpos, inclusive o corpo hu mano, 
são emissores desse tipo de radiação. Quanto maior for sua te mperatura, maior será a 
emissão de radiação infravermelha. 
6. Indique as sessões principais e suas funções de um espectrofotômetro de feixe duplo. 
7. O que significam as siglas: 
a) FT – IR A espectroscopia de Infravermelhos ( IR) com transformadas de Fourier 
é uma técnica usada para se obter espectros de absorção, emissão, 
fotocondutividade ou de difra ção de Raman de infravermelhos de um sólido, 
líquido ou gás. 
b) CG - FT IR CROMATOGRAFIA GASOSA ACOPLADA A ESPECTROMETRIA DE 
INFRAVERMELHOS. 
8. Quais as vantagens dos espectrômetros FT-IR sobre os instrumentos dispersivo? 
As maiores vantagens d os instrumentos FT IR sobre os espectrômetros dispersivos 
incluem uma maior velocidade e sensibilidade, melhor aproveitamento da 
potência luminosa, calibração do comprimento de onda mais exata, desenho mecânic 
o simples e a eliminação virtual de problemas de radiação espúria e emissão IV. 
Vantagens: N ão usam monocromadores, consequentemente a radiação tot al 
passa p ela amostra aumentando o ganho de tempo, aumentando a resolução 
(0,001 cm-1). Os resultados de várias varreduras são combinados para diminuir o 
ruído. 
9. Como podem ser examinadas as substâncias líquidas e os sólidos na região do 
infravermelho. Indique em cada caso a quantidade necessária de amostra. 
As amostras líquidas podem ser prensadas entre duas placas de um sal de alta 
pureza como o clor eto de sódio. Essas plac as têm d e ser transparente à luz 
infravermelha e, dessa forma, não introduzirem nenhuma linha no espectro da 
amostra. Essas placas obviamente são bem sol úveis em água, então a amost ra, 
os reagentes de lavagem e o meio precisam ser anídros (isto é, sem água). As 
amostras sólidas normalmente são preparadas misturando-se uma certa 
quantidade da amostra com um sal altamente purificado (geralmente brometo de 
potássio). Essa mistura é triturada e prensada a fim de se formar uma pastilha 
pela qual a luz pode passar. Essa pastilha precisa ser prensada a altas pressões 
a fim de garantir de que ela seja translúcida, mas isso não pode ser alcançado 
sem um equipamento apropriado (como uma prensa hidráulica). Da mesma 
forma que o cloreto de sódio, o brometo de potássio não absorve radiação 
infravermelha, então as únicas linhas espectrais a aparecer virão do analito. 
10. Porque as bandas atribuídas às vibrações de deformação (deformação angular) 
estão à direita das bandas de estiramento (deformação axial) no espectro de IV? 
 
Basicamente, as vibraçõ es moleculares pod em ser classificadas em dois tipos: 
vibrações de deformação axial (stretching) e de deformação angular (bendin g). 
As deformações axiais, ou estiramento, s ão oscilações radiais d as distâncias 
entre os núcleos enquanto as deformações angulares envolvem mudanças dos 
ângulos entre as li gações ou, como no modo de deformação assimétrica fora do 
plano , alterações do ângulo entre o plano que contém as ligações e um plano de 
referência. Quando as vibrações moleculares resultam em alterações de 
momento de dipolo, em conseqüência da variaçã o da dist ribuição eletrônica ao 
redor das ligações, pode-se induzir transições entre os níveis vibracionais. Isto é 
feito com a aplicação de campos elétricos com freqüências (energias) adequadas. 
Quando o dipolo oscilante se encontra em fase com o campo elétrico incidente 
ocorre a transferência de energia da radiação para a molécula resultando em uma 
transição. Para um grande número de moléculas, as energias asso ciadas aos níveis 
vibracionais se encontram na região do infravermelho do espectro eletromagnético. 
 
1) 
 
2) 
 
3) 
 
4) 
 
REPRESENTE AS POSSIVEIS ESTRUTURAS PARA OS ESPECTROS ACIMA 
1) 
 
 
3) 
 
 
2) 
 
 
4) 
 
 
11.Quais as áreas mais importantes para o exame preliminar de um espectro de 
infravermelho? Que tipo de grupamento funcional é responsável pelas absorções 
existentes em cada uma destas regiões? 
Regiões dos grupos funcionais (4000 a 1230cm- 1) é a região onde ocorre a maioria 
das vibrações de estiramento das ligações mais representativas dos grupos funcionais 
das moléculas orgânicas. Região de impressão di gital da molé cula (1300 a 900cm-1) são 
absorções características das deformações angulares. Essa região do espectro é 
bastante c omplexa por apresentar um grande número de bandas de absor ção onde 
cada molécula apresenta um padrão absorção único. Regiões das deformações 
angulares fora do plano é representado pela faixa de frequência de 400 a 1000cm-1 
12.Construa uma tabela indicando a região de cada uma das seguintes absorções na região 
do infravermelho 
 
a) estiramento O-H, N-H 
b) estiramento C-H (C=C-H, CC-H, Ar-H) 
c) estiramento C-H (CH3, CH2, CH, CHO) 
d) estiramento CC, CN, C=O (aldeídos, cetonas, ácidos carboxílicos, amidas ésteres 
anidrido e cloreto de ácido) 
e) estiramento C=C (alifático, aromático), C=N 
f) deformação C-H (CH3, CH2, CH) 
g) deformação fora do plano =C-H, Ar-H 
 
13.O gráfico a seguir corresponde ao espectro do óleo nujol, obtido na região do 
infravermelho. Indique o tipo de vibração responsável por cada absorção.
 
 
 
 
14.Pesquisar na literatura o espectro na região do infravermelho do hexano e 
ciclo-hexano e comparar ao do óleo nujol explicando as semelhanças e diferenças. 
 
 
15. Relacione cada uma estrutura química apresentada com um dos espectros de 
infra-vermelho a seguir e explique as principais bandas 
 
 
 
 
 
 
 
CH3
CH CH3CH3
NH2
CH3
OH
CH3
O
 
Base livre – gráfico 1 
Dicloridrato – gráfico 2 
O 2 HCl promove o alongamento dos picos. 
31. Analisar se o espectro abaixo se é refere a amina aromática ou alifática e se está na 
forma de amina livre ou cloridrato 
 
 
3500 – 3300cm-1 N – H – amina estiramento 
1350 – 1100cm-1 C – N - amina estiramento 
900 – 690 cm-1 = C – H – anéis aromáticos dobramento 
Amina livre aromática 
 
32. No espectro da sulfacetamida, analise as bandas de absorção no IV do grupo SO2 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Lista 04 
 
1)Uma solução diluída de -naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas 
em placas cromatográficas de sílica gel. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-
se 3 diferenteseluentes: cloreto de metileno puro, cloreto de metileno contendo 25% 
de acetato de etila ecloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila. Que efeito 
é esperado sobre os valoresde Rfdos dois compostos, considerando o aumento da 
proporção do acetato de etilanasfases móveis? Justifique sua resposta. 
Como a fase estacionária (sílica gel) é polar, quanto maior a polaridadedo eluente, ou 
seja, da fasemóvel, maior o fator de retenção do -naftol (mais polar do que a p-
toluidina), portanto, ele vai eluirmaissobre a placa cromatográfica. O contrário ocorre 
com a p-toluidina, que por ser menos polar, vai eluirmenos, ou seja, apresentará o 
menor fator de retenção. Para as composições dos solventes dadas, a mais polar seria 
o cloreto de metileno contendo 50%de acetato de etila e o menos polar o cloreto de 
metileno puro. 
 
2)Responda: 
Quais as características de um HPLC? 
Os detectores de HPLC devem possuir várias características, dentre as quais pode se 
mencionar: alta sensibilidade, seletividade, linearidade (correspondente a aumento da 
concentração do analito), pouco sensível às variações de temperatura e fluxo, preciso 
e com reprodutibilidade. 
b) Quais as características da fase móvel na cromatografia líquida? 
Cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é o tipo mais versátil e mais 
amplamente empregado de cromatografia por eluição. 
• Na cromatografia líquida, a fase móvel é um solvente líquido, o qual contém a 
amostra na forma de uma mistura de solutos. 
• O tipo de cromatografia líquida de alta eficiência é geralmente definido 
pelo mecanismo de separação ou pelo tipo de fase estacionária: 
• (1) partição ou cromatografia líquido-líquido; 
• (2) adsorção ou cromatografia líquido-sólido; 
• (3) troca iônica ou cromatografia de íons; 
• (4) cromatografia por exclusão; 
• (5) cromatografia por afinidade; 
• (6) cromatografia quiral. 
• A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) tornou-se uma ferramenta analítica 
indispensável. 
Os laboratórios criminais e os programas de televisão policiais e forenses, como CSI, 
CSI Miami, Crossing Jordan e Law and Order, freqüentemente empregam a CLAE no 
processo de obtenção de evidências criminais. 
c) Pesquise e defina alguns diferentes tipos de colunas de HPLC. Comente sobre a 
coluna do tipo C18. 
ACE C18 é uma coluna para HPLC que oferece alta eficiência em partículas de 3μm, 
5μm e 10μm. Recomendada para análise de compostos polares, moderadamente 
polares e apolares, ácidos e bases ionizados e compostos que diferem em 
hidrofobicidade. ACE C18 é formada por sílica ultra inerte, e com grau de pureza 
elevado. 
3) Necessita-se de um solvente polar para ser utilizado como fase móvel de um 
sistema de HPLC. Dentre os solventes apresentado a seguir indique aquele com 
melhores condições para esse propósito: a) etanol; b) acetona; c) éter etílico; d) etano-
1,2-diol, e) glicerol. Justifique sua escolha. 
etanol (álcool etílico) é muitas vezes considerado bipolar por dissolver com facilidade 
substâncias orgânicas apolares. 
4) Cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) e cromatografia a gás de alta 
resolução (CGAR) são, possivelmente, as técnicas cromatográficas mais utilizadas 
atualmente. Essas duas técnicas têm diversos pontos em comum e outros que são 
completamente distintos. Muitos desses pontos, inclusive, têm relação com outras 
técnicas analíticas como extração em fase sólida e eletroforese capilar. As técnicas 
cromatográficas, de um modo geral, se caracterizam pela distribuição de uma ou mais 
substâncias (solutos) entre uma fase móvel e outra estacionária. Considerando-se as 
técnicas de CLAE e CGAR, 
A cromatografia é um processo físico-químico de separação de misturas, mais 
especificamente, de sólidos em uma solução (mistura homogênea de duas ou mais 
substâncias). Esse processo fundamenta-se no fato das substâncias presentes na 
mistura terem diferentes propriedades e composições, assim, a interação delas com as 
duas fases imiscíveis (fase estacionária e fase móvel) será diferente também. Ou seja, a 
velocidade com que uma migra será maior e de outra, será menor. 
Estas duas fases mencionadas são caracterizadas da seguinte forma: 
Fase estacionária: fase fixa onde a substância que está sendo separada ou identificada 
fixa-se na superfície de outro material. Por exemplo, um papel de filtro. 
Fase móvel: nesta fase as substâncias que queremos isolar são “arrastadas” por um 
solvente fluido, que pode ser líquido ou gasoso. Por exemplo, vapor do álcool Etílico. 
a) Descreva os principais mecanismos de interação de solutos com a fase estacionária 
em ambas as técnicas. 
• Cromatografia em Camada Delgada (Planar) - a fase estacionária é colocada sobre 
uma placa. •Cromatografia em Coluna - a fase estacionária é colocada em um tubo 
cilíndrico. Preparativas: 6->50 mm; Analíticas: 2-6 mm; Microdiâmetro: 1-2 mm; 
Capilares: < 1 mm. Dependendo do estado físico da fase móvel pode-se ter: 
Cromatografia gasosa: fase móvel é um gás inerte. *Cromatografia líquida: fase móvel 
é um líquido. Cromatografia supercrítica: fase móvel é um vapor pressurizado em 
temperatura e pressão acima do ponto crítico. 
*Cromatografia líquida: “Clássica” – feita em colunas de vidro, sob pressão 
atmosférica. Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) – utiliza-se colunas 
metálicas (normalmente) e pressões de fase móvel elevadas, obtidas com o auxílio de 
uma bomba de alta pressão. 
b) Descreva as principais características da fase móvel e as principais características 
desejáveis para que uma substância possa ser analisada, segundo cada uma dessas 
técnicas. 
A principal característica é que a fase móvel dissolva a amostra sem qualquer 
interação química entre ambas. Esta fase deve ter alto grau de pureza ou ser de fácil 
purificação, para que se possam fazer análises de alta sensibilidade, pois as impurezas 
podem interferir na detecção do analito por ultravioleta (UV). 
 
7) Considere as seguintes condições cromatográficas em HPLC: Coluna de sílica, 
eluentetolueno:diclorometano (70:30, v/v), fluxo de 1 ml/min, detecção em 240 nm. O 
cromatograma apresentou 3 picos: 
 Pico 1 Tr = 1 mim 
 Pico 2 Tr = 3 mim 
 Pico 3 Tr = 5 mim 
a) Qual dos três compostos deve apresentar menor polaridade ? 
Está utilizando no sistema cromatográfico uma Fase normal, ou seja, uma fase 
estacionária (coluna de sílicar) polar e solvente apolar. Com isso, quanto maior a 
polaridade da substância analisada, maior a interação dela com a fase estacionária, 
ficando mais tempo retida. Portanto o pico 3, de maior tempo de retenção, apresenta 
a maior polaridade, enquanto o pico 1 apresenta menor polaridade por ter sido eluído 
primeiro. 
b) Qual seria a ordem de eluição dos compostos se utilizássemos uma coluna C-18? 
Se mudarmos de fase normal (coluna de sílica) para fase reversa (coluna C18), a ordem 
de eluição teoricamente será inversa. Vale ressaltar que é necessário também alterar 
os solventes utilizados, para solventes de maior polaridade como mistura de 
acetonitrila, álcoois e/ou água. Tolueno e diclorometano são muito apolares para se 
utilizar com C18, dificilmente uma substância ficará retida nesse sistema. 
 c) Se utilizássemos uma mistura de tolueno:diclorometano (60:40, v/v) como sistema 
eluente o que aconteceria com o Tr dos compostos? 
Esse enunciado aqui tem um problema, porque a polaridade e a força de eluição (em 
sílica) do dicloromentano é maior do que o tolueno. 
Considerando que manteve a coluna de sílica (polar), se diminuir a concentração do 
solvente de maior polaridade de 70 para 60, e aumenta o de menor polaridade (30 
para 40), a polaridade e a força de eluição do sistema estão diminuindo, com isso as 
amostras ficarão mais tempo retidas, portanto aumentará o Tr dos picos. 
 
 
8)Uma mistura conhecida de compostos A e B produziu os seguintes resultados da 
CLAE: 
 
Uma solução foi preparada através da mistura de 12,49 mg de B com 100 mL de 
uma amostra desconhecida, contendo apenas A. Após, um alíquota de 5 mL foi 
analisada, onde foram observadas áreas de picos de 5,97 e 6,38 para A e B, 
respectivamente. Determine a concentração inicial de A (mg/mL) na amostra 
desconhecida. 
 Apesar de ser uma mistura de dois componentes, a substância B tem um tempo deretenção diferente de A, consequentemente não influenciará no resultado. 
 12,49 mg em 100 mL equivale a 12,49 = 0,1249 mg/mL (Não vai servir para nada na 
questão). 
 Faze-se uma regra de três relacionando a concentração do composto A e o pico 
relativo da amostra, e a área relativa do pico com a concentração da amostra 
desconhecida. 
10,86 -------1,03 mg/mL 
6,38 -------X = 0,605 mg/mL 
Porém, essa amostra foi diluída 20 vezes (5 mL extraído de 100 mL). 
0,605 x 20 (Nº de diluições) =12,01 mg/mL 
 
9) Relacione os as técnicas de acordo com suas características. 
1- Sistema de Cromatografia em coluna 
 
(3) Cromatografia Gasosa (CG); 
Cromatografia Gasosa de Alta Resolução 
(CGAR) 
2- Sistema de Cromatografia Planar (1) Cromatografia Líquida; Cromatografia 
Gasosa; Cromatografia Supercrítica 
3- Cromatografia Utilizando de Gás (5) Cromatografia Supercrítica (CSC) 
4-Cromatografia com a Utilização de 
Líquido 
(2)Centrífuga (Chromatotron®); 
Cromatografia em Camada Delgada 
(CCD); Cromatografia em Papel (CP) 
5- Cromatografia com a Utilização de Gás 
Pressurizado 
(4) Cromatografia Líquida Clássica (CLC); 
Cromatografia Líquida de Alta Eficiência 
(CLAE) 
6- Cromatografia de acordo com tipo de 
Fase Estacionária 
(7) Por Adsorção; Por Partição; Por Troca 
Iônica; Por Afinidade 
 
7- Cromatografia de acordo com o modo 
de separação 
(6) Líquida; Sólida; Quimicamente Ligadas 
O item que responde corretamente as sentenças é: 
a) 1, 3, 7, 5, 2, 6, 4. 
b) 3, 1, 2, 5, 7, 6, 4. 
c) 3, 1, 2, 5, 7, 4, 6. 
d) 1, 3, 7, 2, 4, 5, 6. 
e) 3, 1, 5, 2, 4, 7, 6. 
 
10) Assunto: Cromatografia em fase gasosa. 
Com base na técnica de Cromatografia em fase gasosa, assinale a alternativa correta. 
 
a) De forma geral, em cromatografia, é desejável que a fase estacionária tenha uma 
grande reatividade com fase móvel. 
b) A fase móvel não interagem com a amostra, apenas a carrega através da coluna. 
c) O gás de arraste é a fase estacionária e a coluna é a fase móvel. 
d) A fase móvel deve estar no estado sólido, independentemente da temperatura de 
análise. 
e) A fase estacionária deve possuir alta polaridade, para que haja uma separação 
adequada dos analitos. 
 
11) Assunto: Cromatografia líquida de alta eficiência: 
Marque V ou F para os itens abaixo sobre Cromatografia Líquida de Alta Eficiência 
(CLAE): 
(V3) Na CLAE emprega-se uma coluna fechada, reaproveitável; portanto, até centenas 
de separações individuais podem ser realizadas com a mesma coluna. 
(F) Colunas para CLAE não são muito eficazes, mas oferecem uma grande resistência à 
vazão da fase móvel, ou seja, ela sofre uma perda de carga. 
(F) A CLAE não requer que a amostra seja solúvel na fase móvel. 
(V) A CLAE é um método ideal para a separação de espécies iônicas ou macromoléculas 
de interesse biológico e produtos naturais lábeis, bem como uma imensa variedade de 
outros compostos de alta massa molecular e/ou baixa estabilidade térmica. 
 
Com base nas respostas acima, assinale o item que representa a sequência correta: 
 
a) V, F, F, V 
b) V, F, F, F 
c) F, V, F, V 
d) F, F, V, V 
e) V, V, V, F