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Atividade enzimática de extratos vegetais na degradação de gelatina Alunas: Gabrielly Loss e Maria Eduarda C. Daré Objetivo da aula prática: Testar a presença de enzimas proteolíticas nas frutas. Protocolo Experimental: Materiais: • Abacaxi verde; • Mamão papaia verde; • Peneira fina; • Liquidificador; • Bico de Bunsen • Gelo; • Pó para Gelatina; • 4 tubos de ensaio; • Pipetas volumétricas de 10 mL; • Espátula; • Faca; • Frascos pequenos; • Bastão de vidro; • Béquer de 500 mL. Procedimento: 1. Preparar a gelatina conforme as instruções da embalagem. 2. Preparar os extratos das frutas previamente picadas (o abacaxi sem casca, o mamão com casca) utilizando o liquidificador e um pouco de água. 3. Os extratos devem ser peneirados antes do teste e acondicionados em frascos pequenos. 4. Numerar os tubos de ensaio de 1 a 4 e preparar a sequência de tubos de ensaios conforme a tabela 1 abaixo: TUBOS COMPOSIÇÃO TESTE 1 4mL gelatina + 2mL de água Controle 2 4mL gelatina + 2mL de extrato da polpa de abacaxi Polpa do Abacaxi 3 4mL gelatina + 2mL de extrato de mamão Mamão 4 4mL gelatina + 2mL de extrato da casca abacaxi Casca do Abacaxi 5. Colocar os tubos na caixa de isopor com gelo até que o tubo 1 (controle) gelifique. Isso deverá ocorrer após alguns minutos. 6. Observar os tubos e anotar na tabela apropriada os resultados positivos e negativos para a gelificação. 7. A ocorrência ou não da proteólise será avaliada por meio da gelificação. Após um banho de gelo de alguns minutos (o suficiente para ocorrer a gelificação do controle – tubo 1), incline os tubos ligeiramente para verificar a viscosidade do meio em cada um deles. 8. Anote na tabela abaixo o resultado Tabela 2: Tabela de resultados do teste de gelificação. TUBOS COMPOSIÇÃO RESULTADO (GELIFICAÇÃO) 1 Gelatina + água Gelificação 2 Gelatina + extrato da polpa do abacaxi Não gelificação 3 Gelatina + extrato de mamão Não gelificação 4 Gelatina + extrato da casca do abacaxi Não gelificação Questões: 1. Formule uma hipótese para explicar os resultados obtidos em cada tubo com base na atividade enzimática, sítio ativo e substrato. • Tubo 1: É possível observar a gelificação na composição testada, que acontece pela ausência das enzimas proteases. Em situação de temperaturas não muito elevadas, pode acontecer a formação de um gel, pela capacidade de reter molécula de água da gelatina. • Tubo 2: Ao contrário do primeiro tubo, não é possível observar a gelificação, já que há presença das enzimas proteolíticas, que tem função de quebrar as ligações peptídicas entre os aminoácidos das proteínas, impossibilitando a formação do gel. No abacaxi é encontrado a enzima bromelina, que exerce esse papel. • Tubo 3: No mamão a enzima proteolítica encontrada é a papaína, que é a principal responsável pelo impedimento da gelificação na composição de gelatina + extrato de mamão presente no tubo. • Tubo 4: Não é possível observar a gelificação na composição, devido à presença da enzima bromelina, que está presente em todas as partes do abacaxi (polpa, casca e caule) e atua na quebra das proteínas. 2. De acordo com os resultados do experimento, alguma(s) dessas frutas poderia(m) ajudar no processo de digestão? E no amaciamento de carnes? Identifique essa(s) fruta(s) e explique a sua resposta. Sim, tanto o abacaxi quanto o mamão contêm enzimas chamadas bromelina e papaína que atuam na quebra principalmente das proteínas. As fibras musculares da carne contêm uma proteína longa: a miosina. Ao entrar em contato com a papaína ou com a bromelina, ela é picotada. O mesmo acontece com o tecido conjuntivo, encontrado nos tecidos que envolvem as fibras. 3. Identifique o nome das principais enzimas responsáveis pelo resultado apresentado na aula prática. Papaína: é uma enzima extraída do mamão. É usada em testes com imunoglobulinas, e na indústria farmacêutica vem sendo usada associada a um curativo como um acelerador do processo de cicatrização, muito utilizado em tratamentos de úlceras de decúbito. Na culinária é utilizada como amaciante de carnes. Bromelina: auxilia na digestão, já que atua na quebra de proteínas e outros nutrientes. Em conjunto com a papaína (enzima presente no mamão), ela consegue acelerar bastante o processo digestivo, sendo indicada para quem quer acelerar o metabolismo Colágeno: O colágeno é uma importante proteína do corpo dos animais, representando entre 25% e 30% de toda proteína corporal. Essa proteína fibrosa é constituída por cadeias peptídicas formadas por aminoácidos como glicina, prolina e a hidroxiprolina. https://pt.wikipedia.org/wiki/Mamão https://pt.wikipedia.org/wiki/Imunoglobulina https://pt.wikipedia.org/wiki/Indústria_farmacêutica https://pt.wikipedia.org/wiki/Curativo https://pt.wikipedia.org/wiki/Cicatrização https://pt.wikipedia.org/wiki/Úlcera https://pt.wikipedia.org/wiki/Culinária https://pt.wikipedia.org/wiki/Carne https://www.conquistesuavida.com.br/noticia/conheca-10-tipos-de-cha-que-sao-otimos-digestivos-e-que-voce-deve-ter-em-casa_a8659/1 https://www.conquistesuavida.com.br/noticia/para-que-serve-a-papaina-e-onde-essa-enzima-e-encontrada_a11839/1 https://brasilescola.uol.com.br/biologia/aminoacidos.htm
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