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LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL PRÁCTICA Nº 1 EL LABORATORIO BACTERIOLOGICO. NORMAS DE SEGURIDAD. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA Describir la conducta esencial que impone el trabajo en el laboratorio bacteriológico. NORMAS DE SEGURIDAD A SEGUIR DURANTE LAS PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA. INFORMACIÓN GENERAL: El acceso al laboratorio de prácticas sólo se permite a los alumnos que estén realizando las prácticas. No se admiten visitas por razones de seguridad. Localice los dispositivos de seguridad más próximos. Infórmese sobre su funcionamiento. Lea las etiquetas de seguridad. Lea siempre detenidamente esta información y tenga en cuenta las especificaciones que se señalan en ella. Infórmese sobre las medidas básicas de seguridad. Preste atención a las medidas específicas de seguridad. Estas instrucciones son dadas por el profesor y/o recogidas en el guión de laboratorio y debe de prestarles una especial atención. En caso de duda, pregunte. Cualquier duda que tenga, consúltela con su profesor. Recuerde que no está permitido realizar ninguna experiencia no autorizada por el profesor. PROTECCIÓN PERSONAL: Cómo ir vestido en el laboratorio: El uso de batas abrochadas es obligatorio en el laboratorio. La bata será preferentemente de mangas largas, ya que, en caso de accidente, otros tejidos pueden adherirse a la piel, aumentando el daño. Durante el periodo de prácticas, la bata no debe utilizarse fuera del laboratorio. No es aconsejable llevar minifalda o pantalones cortos, ni tampoco medias, ya que las fibras sintéticas en contacto con determinados productos químicos se adhieren a la piel. Se recomienda llevar zapatos cerrados y no sandalias. Los cabellos largos suponen un riesgo que puede evitarse fácilmente recogiéndolos con una cola. Uso de guantes: Es recomendable usar guantes, sobre todo cuando se manipulan muestras biológicas (sangre, suero, orina, leche, efusiones, tejidos u órganos etc.) También cuando se utilizan sustancias corrosivas o tóxicas. En ocasiones, pueden ser recomendables los guantes de un sólo uso. RECUERDE SIEMPRE QUE TODO FLUIDO BIOLOGICO ES POTENCIALMENTE CONTAMINANTE HASTA QUE NO SE DEMUESTRE LO CONTRARIO. Cuidado de los ojos: Los ojos son particularmente susceptibles de daño permanente por productos corrosivos así como por salpicaduras de partículas. Es obligatorio usar gafas de seguridad siempre que se esté en un laboratorio donde los ojos puedan ser dañados. Particularmente la manipulación de material biológico puede ocasionar salpicaduras que conducen a infecciones. TRABAJAR CON SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Normas higiénicas y de seguridad. 1. No comer ni beber en el laboratorio, ya que es posible que los alimentos o bebidas se hayan contaminado. 2. Lavarse siempre las manos después de realizar la actividad práctica y siempre antes de salir del laboratorio. 3. Por razones higiénicas y de seguridad, está prohibido fumar y comer chicle en el laboratorio. 4. No inhalar, probar u oler productos químicos sin estar debidamente informado. Nunca acerque la nariz para inhalar directamente de un tubo de ensayo o de algún material microbiológico. Evite llevarse a la boca ningún objeto (bolígrafos...) o tocarse los ojos y nariz. 5. Trabaje con orden y limpieza. Recuerde que el orden es fundamental para evitar accidentes. Mantenga el área de trabajo ordenada, sin libros, abrigos, bolsas, exceso de frascos de productos químicos y cosas innecesarias o inútiles. En la superficie de trabajo no deben depositarse en ningún momento ropa u objetos personales. 6. Mantenga los mesones de trabajo siempre limpios. Utilice el desinfectante para limpiar el área de trabajo antes de iniciar la actividad práctica y al finalizar la misma. Se tienen que limpiar inmediatamente todos los productos químicos derramados. 7. Limpie siempre perfectamente el material y aparatos (Microscopios) después de su uso. 8. Actúe responsablemente. Trabaje sin prisas, pensando en cada momento lo que está haciendo, y con el material y reactivos ordenados. No se debe gastar bromas, correr, jugar, empujar, etc. en el laboratorio. 9. Un comportamiento irresponsable puede ser motivo de expulsión inmediata del laboratorio y de sanción académica. 10. Atención a lo desconocido. Está terminantemente prohibido hacer experimentos no autorizados por el profesor. 11. No utilice ni limpie ningún frasco de reactivos que haya perdido su etiqueta. Entréguelo inmediatamente a su profesor. 12. No substituya nunca, sin autorización previa del profesor, un producto químico por otro en un experimento. 13. No utilice nunca un equipo o aparato sin conocer perfectamente su funcionamiento. En caso de duda, pregunte siempre al profesor. 14. Se deben usar los mecheros Bunsen con precaución, no dejando material inflamable cerca y evitando el posible contacto con pelo y ropas. Se comprobará que se ha apagado el gas al finalizar el experimento y al abandonar el laboratorio. 15. Está prohibido pipetear con la boca. Use siempre un dispositivo especial para pipetear líquidos. 16. Ante un vertido accidental de material microbiológico debe informarse inmediatamente al profesor encargado del grupo. Se deben lavar las manos con jabón antiséptico ante cualquier sospecha de contaminación. 17. No se debe forzar un tubo de vidrio o la apertura de un frasco sin tener protegidas las manos. 18. La eliminación de residuos, material desechable y material reciclable se realizará utilizando los contenedores dispuestos a tal efecto. 19. Precauciones específicas para alumnos en contacto con animales o en prácticas de bacteriología e inmunología 20. Se recomienda la vacunación antihepatitis B, antihepatitis A y el toxoide tetánico. 21. Extrema las medidas higiénicas y de protección detalladas en los apartados anteriores. En concreto: 22. Use siempre guantes en la extracción de sangre o procedimientos invasivos, en el contacto con líquidos que requieran precauciones universales (líquido amniótico, pericardio, peritoneal, pleural, sinovial, semen, secreciones vaginales y cualquier líquido contaminado con sangre), en el contacto con mucosas, piel no intacta y para manipular objetos o superficies manchados con líquidos corporales. Use también guantes cuando tenga cortes arañazos o lesiones en la piel de las manos. 23. Lávese las manos después de quitarse la bata y los guantes, antes de abandonar el laboratorio e inmediatamente si se han contaminado de sangre. 24. Use batas desechables cuando la ropa pueda ser manchada por líquidos corporales, sangre, secreciones o excreciones. 25. Use gafas, bata y mascarilla protectoras cuando haya riesgo de salpicaduras de líquidos corporales. 26. Evite heridas accidentales con instrumentos que puedan estar contaminados y tenga cuidado con las heridas abiertas, aunque sean pequeñas. 27. Las agujas no deben ser reinsertadas en su capuchón original antes de tirarlas, porque esto es causa frecuente de pinchazos. Han de ser depositadas en un envase preparado a tal efecto. 28. Las gotas de sangre que se derramen deberán limpiarse rápidamente con un desinfectante como el hipoclorito de sodio (lejía) a la dilución 1/10 o en su defecto con glutaraldehido. 29. Las muestras de sangre y otros materiales biológicos deben ser enviadas en un contenedor doble debidamente señalizado (p. ej. una bolsa doble de plástico) y deben de ser examinados para detectar posibles roturas o fisuras. LOS RIESGOS EN EL LABORATORIO BACTERIOLÓGICO. Un reporte de Pike, en el cual analizó 3.221 casos de infecciones asociadas a laboratorios indicó lo siguiente: Quién trabaja con microorganismos patógenos está sometido a riesgo de infección. No se conoce la magnitud del riesgo porque los reportes son incompletos y la población bajo riesgo no está determinada. Las evidencias sobre infecciones adquiridas en el laboratorio son suficientes para requerir el uso de medidas de seguridad cuando se manejan microorganismos, sean o no patógenos. En dicho estudio se analizó la probable fuente de infección: FUENTE DE INFECCIÓN NÚMERO PORCENTAJE (%) Accidente reconocido 378 22.7 Aerosoles 101 6.1 Animal o ectoparásito 149 8.9 Espécimen clínico 90 5.4 Cristalería desechada 43 2.0 Autopsia humana 56 3.4 Infección intestinal 14 0.8 Trabajo con el agente 381 22.8 Otros 7 0.4 Desconocido o no reportado 459 27.5 TOTALES 1.669 100 La mayoría de las prácticas bacteriológicas crean aerosoles, los cuales pueden ser directamente inhalados o descansan sobre las superficies. La liberación de aerosoles no detectados puede explicar la ausencia de información sobre el origen o causa de muchas infecciones adquiridas en el laboratorio. En vista de las informaciones anteriores es necesario clasificar los microorganismos en grupos de riesgos para tomar las medidas pertinentes y trabajar en condiciones de riesgo controlado. MICROORGANISMOS DE RIESGO 1 Actinomyces sp. Todas las especies. Bordetella sp. Todas las especies. Clostridium sp. todas excepto CI. botulinum y CI. Tetani. Corinebacterium sp., todos excepto C. diphteriae. Erysipelothrix insidiosa. Haemophilus influenzae. Klebsiella sp., todos. Leptospira sp. todas las especies. Listeria sp., todas las especies. Mycobacterium sp., todas excepto M. avium, M. bovis y M. tuberculosis. Neisseria gonorrehoae, N. meningitidis. PasteurelIa sp., todas, excepto P. multocida. Salmonella sp., todas, excepto S. typhy. Shigella sp. todas. Staphylococcus aureus, Streptobacillus moniliformis, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus A, B Y C; Treponema pallidum y Yersinia enterocolítica. MICROORGANISMOS DE RIESG0 2 Clostridium tetani, C. diptheriae, Salmonella typhi, Vibrio cholerae. MICROORGANISMOS DE RIESG0 3 Bordetella sp., todas las especies. Brucella sp., todas las especies. Legionella sp., todas las especies. Mycobacterium avium, M. tuberculosis y M. bovis. Pasteurella multocida (tipo 8), Burkholderia (antes Pseudomonas) pseudomallei y B. mallei. MICROORGANISMOS DE RIESG0 4 Bacillus anthracis, Clostridium botulinum, Franciscella tularensis y Yersinia pestis. RECOMENDACIONES OPERACIONALES PARA MANIPULAR BACTERIAS PATÓGENAS EN CONDICIONES DE SEGURIDAD. G R U P O D E R IE S G O TECNICA ASEPTICA PRACTICAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA CABINA DE SEGURIDAD BIOLOGICA DOTACIONES ESPECIALES EQUIPO ESPECIAL: GUANTES, MASCARAS, FILTROS INMUNIZACIONES 1 + - - - - 2 + - - - - 3 + + + + - 4 + + + + +
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