Os oligonucleotídeos iniciadores (primers) representam sequências de nucleotídeos em fita simples com alta homologia (complementaridade G:C e A:T...

Os oligonucleotídeos iniciadores (primers) representam sequências de nucleotídeos em fita simples com alta homologia (complementaridade G:C e A:T) aos segmentos que flanqueiam o fragmento de ácido nucleico a ser amplificado. Podendo ser projetados previamente, com base em sequências-alvo do DNA, os primers são altamente específicos, permitindo, assim, que a reação de PCR ocorra exclusivamente com a sequência de interesse. 

VERLENGIA, R. 

Análises de RNA, proteínas e metabólitos

: metodologia e procedimentos técnicos. Rio de Janeiro: Grupo GEN, 2012.

Para amplificar a sequência gênica, a seguir, por meio da reação de PCR, qual dos primers Forward (5’ – 3’) e Reverse (5’ – 3’) melhor se adaptaria?

5’ CTG GTT ATG AAT CCG CGA ACT TTG CGT GTA CGA 3’

3’ GAC CAA TAC TTA GGC GCT TGA AAC GCA CAT GCT 5’

a.

Fw: AGC CCC ATG; Rv: CGT GTA CGA

b.

Fw: CCC CGA CCG; Rv: CCG GGA AGC

c.

Fw: TCG TAC ACG; Rv: TCG TAC ACG

d.

Fw: CTG GTT ATG; Rv: GGG GCT ACG

e.

Fw: CTG GTT ATG; Rv: TCG TAC ACG