[Laboratório Virtual – Reação em cadeia de polimerase – PCR] A reação em cadeia de polimerase (PCR) permite que uma sequência de DNA seja muitas ve...
[Laboratório Virtual – Reação em cadeia de polimerase – PCR] A reação em cadeia de polimerase (PCR) permite que uma sequência de DNA seja muitas vezes amplificada. Para que a reação ocorra, é necessária a utilização de reagentes, como: DNA; Taq polimerase; íons magnésio, que funcionam como cofator para a Taq; nucleotídeos livres (adenina, timina, guanina e citosina), que serão incorporados nas sequências a serem polimerizadas; além de pequenos pedaços de DNA, chamados de iniciadores (primers), que são complementares (pareamento de bases) a determinada sequência do DNA. Com relação ao termociclador, assinale a alternativa INCORRETA:
A Aumenta a temperatura para 72 °C, para a ação catalítica da DNA polimerase, que incorporará os nucleotídeos livres da reação, formando fitas novas, complementares às fitas desnaturadas. B Desnaturar o DNA a 95 °C consiste em perder a interação das pontes de hidrogênio, para que com a redução da temperatura, 55-60 °C, os iniciadores se complementem às sequências do DNA. C Tem a capacidade de manter constante as temperaturas predeterminadas e específicas da reação, sendo que os ciclos de temperaturas permitem que o DNA seja amplificado apenas uma vez. D Em cada ciclo de três temperaturas, o DNA se duplica em uma progressão geométrica, gerando uma quantidade suficiente a ser detectada e analisada.
A alternativa incorreta é a letra C. O termociclador não mantém constante as temperaturas predeterminadas e específicas da reação. Na verdade, ele é responsável por controlar e alternar as temperaturas de acordo com os ciclos de amplificação do DNA.
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