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O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de amostras biológicas muitas vezes apresenta c...

O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram possibilidades para aumentar a especificidade da reação.
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.
Assinale:

se somente a afirmativa I estiver correta.
se somente a afirmativa II estiver correta.
se somente a afirmativa III estiver correta.
se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.
se todas as afirmativas estiverem corretas.

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34
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Gestão em Saúde

Respostas

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A alternativa correta é: "se somente a afirmativa III estiver correta". Explicação: A afirmativa I está incorreta, pois o aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR pode aumentar a especificidade, mas também pode aumentar a formação de produtos inespecíficos. A afirmativa II também está incorreta, pois o aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR pode aumentar a quantidade de produtos amplificados, mas não aumenta a especificidade da reação. A afirmativa III está correta, pois a realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested) utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos, aumenta a especificidade da reação, pois a segunda reação amplifica apenas o produto da primeira reação, que é específico para o patógeno de interesse.

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