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A principal característica que diferencia as micobactérias, como o Mycobacterium tuberculosis, das bactérias gram-positivas e gram-negativas no processo de coloração de Gram é a presença de uma parede celular rica em lipídios, como a micobactina e a cera. Isso faz com que as micobactérias não retenham a coloração violeta-índigo inicial da coloração de Gram, sendo consideradas bactérias álcool-ácido resistentes.
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