Vamos analisar as alternativas sobre a principal limitação do uso de ágar como meio de cultura: a) Ele é muito caro - O ágar não é considerado um meio caro em comparação com outros meios de cultura. b) Alguns microorganismos não conseguem crescer em meios sólidos - Esta é uma limitação real, pois muitos microrganismos, especialmente aqueles que são exigentes, podem não se desenvolver adequadamente em meios sólidos. c) Ele não pode ser utilizado em temperatura ambiente - O ágar pode ser utilizado em temperatura ambiente, então essa afirmação não é verdadeira. d) É difícil de preparar - O preparo do ágar não é considerado difícil, sendo um processo relativamente simples. Portanto, a alternativa correta é: b) Alguns microorganismos não conseguem crescer em meios sólidos.