Vamos analisar cada uma das alternativas sobre as etapas para a utilização da citometria de fluxo: a) As células são aspiradas por um sistema que não necessita de solução salina. - Incorreto, pois a citometria de fluxo geralmente requer uma suspensão celular em solução salina para garantir a viabilidade e a fluidez das células. b) A calibração do citômetro com microesferas deve ser realizada uma vez por mês. - Embora a calibração seja importante, a frequência pode variar dependendo do uso e das recomendações do fabricante, mas uma vez por mês pode ser considerada insuficiente em ambientes de alta demanda. c) Em cada tubo a ser adquirido, apenas um fluorocromo pode ser adicionado por vez, a fim de evitar a sobreposição de comprimentos de onda. - Incorreto, pois na citometria de fluxo é comum usar múltiplos fluorocromos em um único tubo, desde que suas emissões não se sobreponham. d) Após a aquisição é possível selecionar a população celular de interesse e, por meio de janelas eletrônicas, definidas pelo analista, é possível a análise de múltiplos parâmetros celulares. - Correto, essa é uma das principais funcionalidades da citometria de fluxo, permitindo a análise de diferentes populações celulares e múltiplos parâmetros. e) A utilização de controle interno de qualidade, por exemplo, controle isotípico, deve ser utilizada apenas para amostras de sangue periférico. - Incorreto, pois o controle de qualidade deve ser aplicado a todas as amostras analisadas, não apenas ao sangue periférico. Portanto, a alternativa correta é: d) Após a aquisição é possível selecionar a população celular de interesse e, por meio de janelas eletrônicas, definidas pelo analista, é possível a análise de múltiplos parâmetros celulares.