COMPATIBILIDADE DO SANGUE, COOMBS E PROVA CRUZADA

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SISTEMA ABO
Antígenos ABO presentes na maioria dos tecidos.
- Sistema de histocompatibilidade.
- Antígenos do Sistema ABO são glicoproteínas
- Presença controlada por uma série de 3 alelos
(IA – IB – i)
- Localizados no par do cromossomo 9
- Exemplo de Polialelia
- Letra I vem de isoaglutinação = aglutinação do
sangue entre indivíduos da mesma espécie.
Genes A1, A2, B, O estão localizados no braço longo do
cromossomo 9 (posição 9q34.1-q34.2) e são
responsáveis pela biossíntese dos antígenos ABO e H
dos eritrócitos por meio de codificação e produção de
enzimas denominadas glicosiltransferases, responsáveis
por catalisar as reações entre o substrato e o açúcar
receptor (transglicolização).
- Gene ABO localizado no cromossomo 9q34:
codifica enzimas glicosiltransferases que
adicionam moléculas de carboidratos na cadeia
precursora.
- Os antígenos ABO são sintetizados na
membrana eritrocitária pela adição de
carboidratos a uma cadeia precursora
glicoproteica ou glicolipídica
- Genes A1, A2, B, O: Responsáveis pela
biossíntese dos antígenos ABO e H dos
eritrócitos.
- Indivíduos do grupo O expressam uma enzima
não funcional e apresentam o antígeno H
intacto.
- Codominância IA e IB: cada alelo fornece seu
efeito igualmente.
- IA = IB > i
- Os anticorpos ABO estão ausentes ao
nascimento e são produzidos entre 3 e 6 meses
de vida. Os anticorpos são produzidos contra o
antígeno que está ausente no indivíduo.
Importante para transfusão:
- Aglutinogênio da hemácia do
doador
- Aglutinina do plasma do
receptor
A identificação dos fenótipos ABO
está relacionada à presença ou à
ausência dos antígenos A e/ou B na membrana dos
eritrócitos (prova direta) e a detecção ou ausência dos
anticorpos contra os antígenos que não possuem (prova
reversa).
Transfusões:
Os anticorpos envolvidos na incompatibilidade ABO
pós-transfusional são da classe IgM e IgG e são
potentes ativadores das proteínas do sistema
complemento, provocando hemólise intravascular
imediata e podendo levar o paciente a óbito. A
incompatibilidade ABO materno-fetal raramente
desencadeia uma DHFN grave, apresentando um
caráter benigno na maioria das vezes. O sistema ABO é
considerado um sistema de histocompatibilidade, por
estar presente maioria das células epiteliais, células
endoteliais, linfócitos e plaquetas e se apresentar na
forma solúvel em secreções como saliva e todos os
fluidos corporais (exceto líquido cerebrospinal).
REAÇÕES HEMOLÍTICAS TRANSFUSIONAIS
Diminuição da sobrevida da hemácia após transfusão de
sangue devido a incompatibilidade imunológica entre
doador e receptor.
Ocorrem quando o paciente foi previamente
sensibilizado por algum antígeno, não possuindo
anticorpos detectáveis no seu plasma no momento da
realização das provas pré-transfusionais.
Maior incidência em pacientes politransfundidos.
- Imediata: algumas horas após a transfusão.
- Tardia: dias ou semanas após a transfusão.
Classificação:
Intravascular:
- Mediadas por anticorpos que ativam o sistema
complemento com formação do MAC (Complexo
de Ataque à Membrana).
- Presença de hemoglobinemia e hemoglobinúria.
Extravascular:
- Mediados por anticorpos que não ativam
completamente o sistema complemento.
- Fixação do C3b na membrana
- Reconhecimento da porção FC dos anticorpos
do fragmento C3b do sistema complemento
pelos macrófagos do SMF.
- Aumento da bilirrubina
Reação hemolítica imediata
Por ABO:
Reação hemolítica grave com alto índice de mortalidade.
Anticorpos presentes no plasma do receptor hemolisam
as hemácias do doador.
Possibilidade de desenvolvimento de CIVD pela
liberação de estroma celular com ativação do fator XII.
Sintomas de dor no tórax, no local de infusão, abdome
e/ou flancos, hipotensão grave, febre e hemoglobinúria.
O quadro pode evoluir para insuficiência renal aguda por
vasoconstrição, por liberação de catecolaminas,
hipotensão sistêmica e formação de trombos
intravasculares.
Ocorre devido à produção de anticorpos antieritrocitários
(exceto ABO) após transfusão ou gestação prévias.
Sintomas de febre, icterícia, diminuição da hemoglobina
ou aproveitamento transfusional inadequado.
PROVAS DE COMPATIBILIDADE TRANSFUSIONAL
Tipagem ABO: doador receptor
- Direta
- Prova reversa
Tipagem Rh: pesquisa de D fraco
Pesquisa de anticorpos irregulares:
- Teste de coombs direto - TAD
- Teste de coombs indireto - TAI
Prova cruzada maior e menor
A maioria das transfusões de CH não terá reação
hemolítica imune se o sangue do doador for ABO e RhD
idênticos ao do receptor.
- Outros Ag’s particularmente imunogênicos: Rh,
Kell, Duffy, Kidd e Ss.
TESTE DE COOMBS
Anticorpo anti-imunoglobulina humana monoespecífico
- Anti-gama
Dirigidos contra fração Fc das imunoglobulinas
humanas.
Preparado a partir de soro de coelhos e/ou cabras
imunizadas à fração IgG (gamaglobulina) do soro
humano.
Identificação de anticorpos irregulares realizado através
do teste de Coombs
- Coombs direto ou TAD: pesquisa de anticorpos
fixos a membrana eritrocitária (DHRN, anemias
autoimunes, transfusões incompatíveis).
- Coombs indireto ou TAI: detecta a presença de
anticorpos livres no soro (sensibilização materna
por gravidez).
Pesquisa de Anticorpos Irregulares (PAI): detectar a
maioria dos anticorpos clinicamente significativos.
COOMBS DIRETO
Técnica de antiglobulina direta (TAD)
Resultado negativo: ausência de aglutinação. As
hemácias não estão sensibilizadas
Resultado positivo: presença de aglutinação. As
hemácias estão sensibilizadas com anticorpos. Para
identificação do anticorpo, realizar eluição.
- Monoespecífico: anti-IgG
- Poliespecífico: anti-IgG + anti-C3D
Doença transfusional do recém-nascido, reação
transfusional hemolítica, anemia hemolítica autoimune.
Procedimento:
- Diluição de hemácias 3%
- Lavagens
- Adição de Soro de Coombs
- Centrifugação
- Análise macroscópica
- Análise microscópica
COOMBS INDIRETO
Teste da antiglobulina indireto (TAI)
- Pesquisa de anti-D
- Pré-natal: mãe Rh negativo
- Transfusão (doador Rh- e receptor Rh+)
Painel de hemácias
Painel formado por 11 lotes de hemácias
- 10 lotes obtidos de doadores tipo O
- 1 lote obtido de sangue de cordão umbilical de
recém-nascidos do grupo O
Utilizado para a pesquisa dos anticorpos irregulares.
Homogeneizar e submeter os tubos as todas as 4 fases
do teste de Coombs indireto:
- Temperatura ambiente
- Meio proteico
- 37ºC
- Coombs
Verificar os antígenos em comum nos tubos onde
houveram aglutinação.
PROVA CRUZADA
Utilizada para transfusões sanguíneas ou transplante de
órgãos.
Finalidade de determinar a presença de anticorpos
pré-formados no sangue do receptor contra as células do
possível doador.
- Maior: testar glóbulos vermelhos do doador
contra o soro do receptor.
- Menor: finalidade de testar os glóbulos
vermelhos do receptor contra o soro do doador
(desuso).
Homogeneizar e submeter os tubos as todas as 4 fases
do teste de Coombs indireto:
- Temperatura ambiente
- Meio protéico
- 37ºC
- Coombs
Verificar a presença ou não de aglutinação.