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UNIVERSIDADE PAULISTA - UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: BACHARELADO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS DISCIPLINA: CITOLOGIA NOME DO ALUNO: RAQUEL HADINA SILVA RA: 0400041 POLO: SHOPPING TABOÃO DA SERRA DATA: 2/10/2021 AULA PRÁTICA DE CITOLOGIA INTRODUÇÃO: A terminologia da palavra Citologia tem origem grega e significa kytos- célula e logos- estudo. E segundo Matthias Schleiden e Theodor Schwann, a Citologia é o estudo das células nos seres vivos, seja um vegetal, um animal ou um protozoário. As descobertas na Citologia tiveram seus desenvolvimentos depois da criação do microscópio, em 1590. No ano de 1665 Robert Hooke descobriu a célula vegetal com o experimento da cortiça, e nomeou a célula de cellula/ cella, significando pequeno compartimento. Nos anos de 1674, de 1677 e de 1683 Antoni van Leeuwenhoek descobriu as células livres, como o protozoário, o espermatozoide humano e a bactéria. No ano de 1833 Robert Brown descobriu o núcleo celular. No ano de 1838 Theodor Schwann desenvolveu a Teoria Celular, a partir de experiências com vegetais. No ano de 1839 Matthias Schleiden complementou essa Teoria Celular, a partir de experiências com animais. No ano de 1932 Max Knoll e Ernst Ruska desenvolveram o microscópio eletrônico, que amplia os compostos celulares. Portanto, a Citologia passou por evoluções com base nos experimentos dos cientistas e através disso no meio acadêmico, as pesquisas tem o objetivo de aprimorar diferentes maneiras de estudos e interpretação das células dos seres vivos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Aula 1 A - Roteiro 1 Na aula foram apresentados os componentes (Imagem 1) e as funções deles no microscópio óptico composto, conhecido como microscópio de luz. As funções dos componentes são: as Lentes Oculares tem função de observar o material da lâmina; os Canhões tem função de apoiar as lentes oculares; a Estativa tem a função de apoiar todos os componentes do microscópio; o Revólver tem a função de movimentar as objetivas, no sentido de menor aumento para a de maior aumento; as Objetivas tem função de aumentar a visualização do material analisado em 4x (objetiva vermelha), 10x (objetiva amarela), 40x (objetiva azul) e 100x (objetiva branca); o Charriot tem função de movimentar horizontalmente e verticalmente a lâmina na platina; a Platina tem a função de apoiar a lâmina da amostra; os Parafusos Macrométricos tem função de mover a platina, para focalizar a imagem na objetiva de 4x, não necessitando movê-los nas outras objetivas; os Parafuso Micrométricos tem função de focalizar a imagem da amostra, conforme a mudança de objetiva; o Diafragma tem função de variar a intensidade de luz que a amostra recebe; a Fonte de Luz tem função de iluminar a lâmina da amostra e a Base tem função de apoiar a estativa e a fonte de luz. Imagem 1: Componentes do Microscópio Óptico Composto, sendo 1- Lente Ocular; 2- Canhão; 3- Charriot; 4- Platina; 5- Diafragma; 6- Fonte de Luz; 7- Estativa; 8- Revólver; 9- Objetivas; 10- Parafuso Macrométrico; 11- Parafuso Micrométrico e 12- Base. Aula 1 B- Roteiro 2 Na aula foi preparado uma lâmina com uma letra de jornal, para manusear os componentes do microscópio e focalizar nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Na focalização de 40× ( 4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizadas as fibras coloridas de celulose da letra "e" invertida. (Imagem 2) Na focalização de 100× (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizadas as fibras coloridas de celulose da letra "e" invertida. Na focalização de 400× (40x da objetiva×10x da ocular) foram visualizadas as fibras de celulose da letra "e" invertida. As imagens focalizadas da letra "e" estavam ao contrário, porque as lentes objetivas são côncavas e com a refração de luz, os raios de luz transmitem uma imagem invertida e as lentes oculares amplificam as imagens visualizadas. Imagem 2: Letra "e" visualizada na focalização de 40× Aula 1 C- Roteiro 3 Na aula foi preparado uma lâmina com iogurte, para estudar a morfologia das células bacterianas. As células bacterianas são chamadas de procarióticas, pois são células sem os núcleos organizados e tem em suas morfologias os cocos e os bacilos. Na focalização de 40x ( 4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os grumos do iogurte. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os grumos do iogurte e não foram visualizadas as células bacterianas. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados grumos do iogurte e células bacterianas. (Imagem 3) Imagem 3: Focalização em 400x da lâmina de iogurte. Aula 1 D- Roteiro 4 Na aula foi analisada uma lâmina de fígado, para observar o núcleo e o citoplasma das células. Na focalização de 40x ( 4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os núcleos em roxo e os citoplasma em rosa. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os núcleos em roxo e os citoplasma em rosa. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os vasos sanguíneos em branco, os núcleos em roxo e os citoplasma em rosa. ( Imagem 4) Imagem 4: Focalização em 400x da lâmina de fígado. Aula 2 A- Roteiro 5 Na aula foi usado um abacate, uma laranja e uma lâmina de esôfago para compreender os cortes histológicos das células. Os cortes histológicos são: transversais (cortes horizontais feitos em órgãos com forma de tubos), oblíquos (cortes feitos com um grau de inclinação), tangenciais (cortes feitos na vertical e na superfície do órgão) e longitudinais medianos (cortes verticais no meio do órgão analisado) e excêntricos (cortes verticais nas extremidades do órgão). No abacate foi usado usado o corte tangencial e foi visualizada uma camada superficial do abacate cortado. Na laranja foi usado o corte longitudinal mediano e foram visualizadas duas partes iguais da laranja. Na lâmina do esôfago foi usado um corte longitudinal, para visualização de suas estruturas celulares nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados as glândulas exócrinas, os tecidos epiteliais, os núcleos e os tecidos conjuntivos. (Imagem 5) Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados a glândula exócrina, o tecido epitelial, os núcleos e os tecidos conjuntivos. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados a glândula exócrina, o tecido epitelial, os núcleos e os tecidos conjuntivos. Imagem 5: Focalização em 40x das estruturas do esôfago, em corte longitudinal: 1- glândulas exócrinas, 2- tecidos epiteliais, 3- núcleos e 4- tecidos conjuntivos. Aula 2 B- Roteiro 6 Na aula foi preparado uma lâmina com a técnica de esfregaço de sangue e com o corante Leishman, para se estudar os componentes do sangue. Os componentes do sangue são: hemácias/ glóbulos vermelhos, glóbulos brancos/ leucócitos, plaquetas e plasmas. Na preparação da lâmina houve um erro, onde a técnica de esfregaço somente deu resultado no final da lâmina e demorou a secar o sangue, mas ao colocar o corante foi possível observar os componentes do sangue. Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os citoplasmas dos glóbulos vermelhos em tonalidade azul claro, por causa do efeito do eosinato. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os citoplasmas dos glóbulos vermelhos em tonalidade azul claro, por causa do efeito do eosinato. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os citoplasmas dos glóbulos vermelhos em tonalidade azul claro, por causa do efeito do eosinato e plaquetas em roxo. Na focalização de 1000x (100x da objetiva×10x da ocular) com o óleo de imersão, foram visualizados os citoplasmas dos glóbulos vermelhos em tonalidade azul claro, por causa do efeito do eosinato e plaquetas em roxo. (Imagem 6) Imagem 6: Focalização de 1000x da lâmina com técnica de esfregaço de sangue. Aula 3 A- Roteiro 7 Na aula foi usadouma lâmina com fígado, para analisar o efeito da técnica H/E nos componentes celulares. Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os vasos sanguíneos em branco, os núcleos em roxo, pois são ácidos e foram corados pela hematoxilina e os citoplasmas em rosa, pois são bases e foram corados pela eosina. (Imagem 7) Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os vasos sanguíneos em branco, os núcleos em roxo, pois são ácidos e foram corados pela hematoxilina e os citoplasmas em rosa, pois são bases e foram corados pela eosina. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) foram visualizados os vasos sanguíneos em branco, os núcleos em roxo, pois são ácidos e foram corados pela hematoxilina e os citoplasmas em rosa, pois são bases e foram corados pela eosina. Imagem 7: Focalização em 40x da lâmina de fígado. Aula 3 B- Roteiro 8 Na aula foi preparado uma lâmina com sangue, para estudar as hemácias em meio hipertônico, meio isotônico e meio hipotônico. Questão 1) Descreva o que aconteceu com as hemácias nas diferentes soluções usadas. Na solução de 2% de NaCl, as hemácias perdem água e começam a enrugar (Imagem 8), na solução de 0,9% de NaCl, as hemácias ficam em equilíbrio (Imagem 9), na solução de 0,4% de NaCl, as hemácias ganham água e começam a inchar (Imagem 10) e com uso de glicose nessas soluções, as hemácias começam a ficar em equilíbrio. Questão 2) Defina: meio hipertônico, meio isotônico e meio hipotônico. O meio hipertônico acontece quando insere a solução de 2% de NaCl nas hemácias e elas perdem água e começam a enrugar, meio isotônico acontece quando insere a solução de 0,9% de NaCl nas hemácias e elas ficam em equilíbrio e meio hipotônico acontece quando insere a solução de 0,4% de NaCl nas hemácias e elas ganham água e começam a inchar. Questão 3) Que nome se dá ao movimento da água através da membrana plasmática? O movimento da água através da membrana plasmática é a osmose, que transporta passivamente a água para manter estável o nível da água nas membranas plasmáticas. Questão 4) Por que as células que, normalmente, vivem em meios que possuem os solutos dissolvidos, inclusive NaCl, não modificam a sua forma ou o seu turgor? Não se modificam, porque o NaCl vai procurar equilibrar o volume de água que é transportada pelas membranas plasmáticas. Imagem 8: Focalização em 400x da lâmina de sangue no meio hipertônico. Imagem 9: Focalização em 400x da lâmina de sangue no meio isotônico. Imagem 10: Focalização em 400x da lâmina de sangue no meio hipotônico. Aula 3 C- Roteiro 9 Na aula foi usado uma lâmina com língua, para visualizar o tecido muscular estriado esquelético e uma lâmina com coração, para visualizar o tecido muscular estriado cardíaco. Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de língua, foram visualizados as gorduras em branco, os núcleos em roxo pela coloração da hematoxilina e os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de língua, foram visualizados as gorduras em branco, os núcleos em roxo pela coloração da hematoxilina e os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de língua, foram visualizados as gorduras em branco, os núcleos em roxo pela coloração da hematoxilina, os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina e os feixes das fibras e das fibrilas nos citoplasmas. (Imagem 11) Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de coração, foram visualizados os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de coração, foram visualizados os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina de coração, foram visualizados os citoplasmas em rosa pela coloração de eosina, os núcleos em roxo pela coloração da hematoxilina e as fibras e fibrilas espessas nos citoplasmas. (Imagem 12) Imagem 11: Focalização de 400x da lâmina de língua. Imagem 12: Focalização de 400x da lâmina de coração. Aula 4- Roteiro 10 Na aula foi preparado uma lâmina com esmagamento da raiz de cebola e com orceína acética, para análise do ciclo mitótico. A lâmina preparada não obteve o resultado ao observar as células das raízes de cebola. Mas ao ser comparada com uma lâmina pronta, com uso da hematoxilina férrica, foi possível visualizar o ciclo mitótico. Na focalização de 40x (4x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina pronta foi observado as paredes celulares em azul claro, os citoplasmas em branco e os núcleos em azul escuro. Na focalização de 100x (10x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina pronta foi observado as paredes celulares em azul claro, os citoplasmas em branco e os núcleos em azul escuro. Na focalização de 400x (40x da objetiva×10x da ocular) com a lâmina pronta foi observado as paredes celulares em azul claro, os citoplasmas em branco e os núcleos, com processos mitóticos, em azul escuro.(Imagem 13) Imagem 13: Focalização de 400x da lâmina de raiz de cebola, sendo 1- Prófase, 2- Anáfase, 3- Metáfase, 4- Interfase e 5- Telófase. REFERÊNCIAS: <https://www.lojaroster.com.br/blog/estrutura-partes-microsco/> Acesso em: 10 out. 2021 <https://www.ehow.com.br/microscopios-compostos-invertem-imagens-como_66179/ > Acesso em: 11 out. 2021 <https://www.todamateria.com.br/lentes-convergentes-e-divergentes/> Acesso em: 11 out. 2021 <Bomba de sódio e potássio - Biologia Enem | Educa Mais Brasil> Acesso em: 12 out. 2021 <Como funciona a Bomba de sódio e potássio - YouTube> Acesso em: 12 out. 2021 <Cortes histológicos | morfoanatomia vegetal (wordpress.com)> Acesso em: 13 out. 2021 <Vídeo: A Célula e suas organelas - Organização estrutural celular. 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