Polimorfismo de Comprimento

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Polimorfismo de 
Comprimento 
Polimorfismo 
• São variações encontradas entre todos os 
indivíduos de uma mesma espécie e, 
geralmente, não causam alguma patogenia; 
• Frequência: ≥ 1% da população. Ou seja, 
quando a mutação que não causa patogenia 
atinge essa porcentagem na população, ela 
é considerada polimorfismo; 
• Variantes raras representam < 1% da 
população, conhecidas como mutações; 
• Eles podem contribuir para traços como 
cor de pele, tipo sanguíneo, suscetibilidade 
a doenças ou diferentes respostas a 
fármacos. 
 
→ Utilização na genética médica: 
• Diagnóstico pré-sintomático e pré-natal 
ou pré-implantacional de doenças 
genéticas; 
• Detecção de heterozigotos portadores de 
doenças genéticas; 
• Avaliação de pessoas de alto e baixo 
risco para doenças comuns, como 
multifatoriais e congênitas idiopáticas; 
• Combinação de pares doador-receptor 
para transplante de tecidos e órgãos 
(marcadores HLA); 
• Definição de linhagem ancestral através 
de mitocôndrias (matrilinhagem) e 
cromossomo Y (patrilinhagem); 
• Teste de paternidade e aplicações 
forenses. 
 
DNA fingerprint 
• As variações levam as “digitais” do 
DNA; 
• São fragmentos de DNA que mostram 
padrões únicos de uma pessoa para a outra; 
• Usados em disputas de paternidade e 
como provas forenses; 
• No caso de identificação de pessoas, as 
sequências de DNA usadas para detectar o 
DNA fingerprint são chamadas VNTR e 
STR (polimorfismo de comprimento). 
 
Polimorfismo de 
comprimento 
• Foram descritos pela primeira vez em 
1985; 
• São arranjos de sequências repetidas com 
variação no comprimento devido a 
diferentes números de unidades repetidas 
(multi-alélicos); 
• VNTRs: número variável de repetições 
em Tandem, chamadas de minissatélites. 
Tratam-se de unidades repetidas de DNA 
com 10–100 pares de bases; 
• STRs: são repetições em Tandem curtas, 
chamadas de microssatélites. Tratam-se de 
unidades repetidas de 2–4 pares de bases; 
• No genoma humano, há milhares de 
regiões diferentes (locos) chamadas 
minissatélites, onde uma determinada 
sequência de DNA se repete várias vezes, 
Marianne Barone (15A) Disciplina – Prof. Marianne Barone (15A) Biologia Molecular – Prof. Jerusa Arantes 
como se o DNA estivesse “gaguejando”. 
Se essas sequências são pequenas (< 6 
pares de base), elas são chamadas de 
microssatélites; 
• Os minissatélites e microssatélites 
apresentam variação (polimorfismo) no 
número de repetições; 
• Cada variante é chamada de um alelo e 
cada pessoa possui 2 alelos, um paterno e 
um materno; 
• As bandas representam o número de 
repetições; 
• O número de repetições específicas 
do DNA é algo particular de cada 
indivíduo (impressão digital); 
• Os métodos visam analisar a 
quantidade de repetições de um 
determinado gene e comparar entre 
amostras recolhidas, como podem ser 
utilizadas em: 
 - Investigação de vínculo genético; 
 - Investigação de suspeitos criminais; 
 - Investigação de vítimas de acidentes; 
• Diferenças entre os métodos: 
 - Tamanho (número de bases): os STRs 
contêm poucos pares de bases. Esta 
característica permite que sejam analisadas 
quantidades mínimas de DNA. Para análise 
dos VNTRs é necessário maior quantidade 
e qualidade do DNA; 
• Esses métodos visam analisar a 
quantidade de repetições de um 
determinado gene e comparar a 
compatibilidade com a amostra que foi 
colhida. 
 
VNTRs 
• Minissatelites; 
• Uma região VNTR típica consiste de 500 
a 1000 pares de bases, com unidades 
repetidas em sequência, cada qual com 
cerca de 10- 100 pares de bases de 
comprimento; 
• Os locos VNTR são particularmente 
convenientes como marcadores para a 
identificação humana (multi-alélicos). 
 Ex: uma sequência de 33 bases de DNA 
pode ser repetida várias vezes em na 
amostra do DNA dos indivíduos 
representados. O indivíduo A e o indivíduo 
B possuem números diferentes de DNA 
das bases repetidas. Assim, fragmentos do 
DNA com diferentes números do DNA 
repetidos mostram diferentes bandas 
 
STRs 
• Microssatelites; 
• Consistem em unidades de repetição com 
2 a 4 pares de nucleotídeos, repetidos entre 
2 a 40 vezes; 
• Dispersos por todo o genoma, assim, são 
presentes em DNA não codificante e 
codificante; 
• Muito polimórficos, assim, são ideais na 
identificação pessoal humana, por gerarem 
muitas informações e auxiliarem na 
discriminação entre os diferentes 
indivíduos; 
• Um perfil genético de um indivíduo, 
trata-se então da informação do número de 
repetições STR relativa a todos os 
marcadores analisados; 
 
 
• Cada indivíduo carrega 2 cópias deste 
polimorfismo (marcadores genéticos), com 
o número de repetições iguais 
(homozigotos) ou com número diferente de 
repetições (heterozigotos) em cada par 
homólogo do cromossomo; 
• Marcadores importantes no teste de 
paternidade por causa da herança que eles 
carregam; 
• Sabe-se que para ter um perfil único de 
uma pessoa são necessários cerca de 13 
marcadores STRs, número descoberto pela 
base de dados do FBI, chamada de CODIS, 
um sistema que armazena perfis de DNA 
de laboratórios criminais dos EUA e que 
buscam na base de dados com o objetivo 
de auxiliar na investigação criminal; 
• Eles estão distribuídos ao longo de vários 
cromossomos no genoma humano e 
recebem nomes diferentes; 
• Ocorre a comparação de perfis genéticos 
com aqueles já encontrados em outros 
crimes. Portanto, o banco de dados tem 
como objetivo auxiliar no processo de 
provar a inocência ou culpa do indivíduo e 
comparar restos mortais e materiais 
biológicos, além de fornecer informações 
para a investigação criminal; 
• Aplicações: são utilizados como 
marcadores moleculares, auxiliando na 
identificação de pessoas em investigações 
policiais ou judiciais ou em testes de 
paternidade. 
 
 
 
 
Metodologia 
→ Análise de fragmento 
(sequenciador automático): 
• A análise de fragmentos através de 
eletroforese capilar é uma técnica 
amplamente empregada na pesquisa 
genética (microssatélites e identificação 
humana); 
• Essa técnica baseia-se na determinação 
do tamanho de fragmentos amplificados 
por PCR, utilizando primers marcados com 
fluorescência, por comparação com um 
marcador de tamanho conhecido 
(sizestandard); 
• O uso de diferentes fluorescências 
permite a análise vários fragmentos (lócos) 
ao mesmo tempo; 
• Após a PCR, os fragmentos são 
submetidos a uma eletroforese capilar, nos 
sequenciadores automáticos de DNA; 
• Assim, ele: identifica um perfil genético 
(único para cada indivíduo) e é rápido e 
específico. 
 Ex: teste de paternidade para um lócus. 
Deve-se comparar os códigos de barra da 
mãe e da criança com o código de barra 
dos dois prováveis pais. A criança deve ter 
50% do padrão de barras da mãe e 50% do 
padrão de barras do pai. O material 
genético pode ser colhido de qualquer 
amostra biológica, como pele, cabelo e 
sangue 
 
(O pai da criança é o homem B)