Contagem de células e esfregaço sanguíneo - Patologia Clínica Veterinária

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Patologia ClínicaPatologia Clínica
D A T A 2 9 - 1 1 - 2 0 2 1
Contagem de células e esfregaço sanguíneo:
Contagem automatizada - impedância ou
sistema a laser.
Contagem manual.
Contagem de células por impedância:
Wallace coulter em 1956.
Contagem de partículas.
Número de células: leucócitos totais,
eritrócitos e plaquetas.
VCM e hemoglobina.
Pulsos elétricos diferentes.
Contagem de células nucleadas -
metarubrícitos são contados junto, por
exemplo.
Realização do esfregaço sanguíneo para
diferenciação e correção do valor total dos
leucócitos.
Contagem de células por citometria de fluxo:
Aparelhos hematológicos mais avançados.
Contagem é realizada de maneira individual.
Realiza o diferencial leucocitário em 3 partes:
granulócitos, linfócitos e monócitos.
Diferencial em 5 partes leva em consideração
o volume, a condutividade e a dispersão de
luz: neutrófilos, eosinófilos, basófilos,
linfócitos e monócitos, podendo incluir
blastos e linfócitos atípicos. 
Fluxo contínuo laminar de partículas - passam
de maneira individual em frente a esse feixe
de laser. 
Contagem de células por citometria de fluxo
por fluorescência:
Contagem de células marcadas por anticorpos
monoclonais específicos ligados a
fluorcromos.
Realiza a contagem de reticulócitos.
Realiza a contagem de eritrócitos nucleados.
Mais confiável. 
Aplicações clínicas:
Análise de conteúdo de DNA.
Quantificação de reticulócitos.
Análise da subpopulação linfocítica.
Diagnóstico e acompanhamento de leucemias
e linfomas.
Diagnóstico e acompanhamento de mieloma
múltiplo.
Mielodisplasia/ doenças mieloproliferativas.
Detecção de anticorpos antiplaquetários.
Disfunção plaquetária.
Quantificação de células progenitoras (stem
cell).
Detecção de células neoplásicas não
hematopoéticas.
Monitoramento quimioterápico / doença
residual mínima.
Avaliação imunológica de paciente
transplantado e de ifnusão linfocitária.
Contagem manual:
Câmara de Neubauer ou Hemocitômetro.
Correção do número - compatível a
microlitro.
Câmara padronizada 1mm x 1mm.
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Volume = base x altura x profundidade.
Volume de quadrado principal = 0,1mm x 10 =
1 mm³
Volume usado no laudo do hemograma =
1,0mm = 1ul.
Umidificar as extremidades para lamínula
fixar. 
Macrodiluição:
Hemácias:
20 uL de sangue total.
4 ml de solução diluente.
Solução fisiológica, marcano, gower, heyen.
Contagem da esquerda para direita. 
Cálculo fator de correção:
20 uL de sangue + 4ml NaCl 0,9% = 4,02 ml =
1/201.
Eritrócitos /uL = ec x 10 (altura) x 201
(diluição) x s (número de quadrados médios).
Ou erit´rocitos/uL = Ec x 10.050
Macrodiluição: Leucócitos:
20 uL de sangue total.
0,4 ml de solução diluente Turk.
Diluente promove hemólise.
20 uL de sangue + 400 uL de Turk = 420 uL =
1/21.
Leucócitos/iL = Lc x 10 (altura) x 21 (diluição)}
/4 (número de quadrados).
Ou leucócitos/uL = Lc x 52,5.
Leucócitos = média do número contado em 4
quadrados principais (4cm2), preciso apenas
de 1cm² então divide o número total por 4.
Volume do quadrado principal: 0,1 mm³ x10 =
1mm³.
Volume usado no laudo do hemograma:
1mm³ = 1uL.
Média de células em 0,1mm³ x 10 x diluição =
concentração de células em 1mm³.
Média de células em 0,1mm³ =
(50+48+49+51)/4 = 49,5.
49,5 x 10 x 20 = 9.900 leucócitos/mm³
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Macrodiluição: Leucócitos:
20 uL de sangue total.
0,4 ml de solução diluente Turk.
Diluente promove hemólise.
Hemácias = multiplica por 5 para fechar 1cm²
(5 quadrantes contados de 25 totais = 1cm²).
Volume de quadrado principal = 0,1mm³ x10 
 1mm³.
Volume usado no laudo do hemograma =
1mm³ = 1uL.
Média de células em 0,1mm³ x10 x diluição =
concentração de células em 1mm³.
(108x25) x 10 x 100 = 2.700.000 hemácias/mm³.
Macrodiluição de plaquetas:
20 uL de sangue total.
2 ml de solução diluente (Brecher).
20 uL de sangue + 2ml de Brecher = 2,02 ml =
1/101.
Plaquetas/uL = Pc x 10 (altura) x 101 (diluição)
x 5 (número de quadrados médios).
Ou plaquetas/uL = Pc x 5.050
Esfregaço sanguíneo:
Avaliação da morfologia dos eritrócitos e
leucócitos.
Realização do diferencial de leucócitos.
Visualização de inclusões celulares e
hemoparasitas.
Técnica:
Coloração: 
Coloração de panótico rápido - fixador e 2
corantes.
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Secar amostra após corante. 
A campo: pelo menos fixar esfregaço.
Bovinos: máquina automática não faz bem a
contagem.