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Transcrição Síntese de RNAm a partir de um molde de DNA Um gene que não é transcrito, simplesmente não é expresso. Caraterísticas gerais: Ocorre por um mecanismo semelhante ao da síntese de DNA. - Apenas um filamento de DNA é usado como molde para a síntese de RNA. - Não precisam de um primer (iniciador) existente. - A molécula de RNA sintetizada é complementar à fita de DNA que lhe deu origem e idêntica à outra fita de DNA, sendo as timinas substituídas por uracilas. - A síntese ocorre no sentido 5´------3’, com adição de ribonucleotídeos ao grupo 3’OH na ponta da cadeia. - RNA molécula de fita simples, mais instável, presença de mais um OH. Uracila no lugar da timina. Adenina se liga à uracila. Classes de RNA RNA ribossomal: recruta a mólécula de RNA transportador que possui uma molécula correspondente ao códon inicial do RNA mensageiro; RNA Transportador: transportam aminoácidos para que seja realizada a tradução; microRNAs, pequenos RNA de intrerferência (siRNA); RNA mensageiro: participa da transcrição. QUEM EXECUTA A TRANSCRIÇÃO: PROCARIOTO • Holoenzima RNA Polimerase: α2ββ´ωσ σ: Reconhece e se liga a região promotora do gene, iniciando a transcrição α2ββ´ω: cerne multimérico que promove o alongamento da transcrição EUCARIOTO: QUEM É TRANSCRITO? Apenas um dos filamentos do DNA, o filamento molde e que contém o promotor do gene, em geral é transcrito em RNA. GENE • GENE: Segmento de DNA que inclui íntrons, éxons e as regiões de controle de transcrição (promotor, enhancers, UTRs) necessários para a produção de um RNA ou uma proteína funcional. • ORF (Open Reading Frame): Sequência codificadora de um gene, ou seja, sequência dentro de um gene (Start códon e stop códon) que é transcrita e traduzida em proteína. • CÓDON: São as trincas de nucleotídeos, três nucleotídeos Códon 1 será sempre AUG. • ÍNTRONS: São regiões não codificantes • EXONS: Regiões codificantes • Processo de maturação: Remoção dos íntrons para que a molécula de RNA fique apenas com as regiões de exóns. PROMOTOR Sequências de DNA que determinam o local de início da transcrição; • A escolha da fita molde de DNA depende da orientação e localização do promotor do gene Promotor do DNA dos Procariotos • Promotor do DNA dos Eucariotos • Promotor do DNA dos Procariotos e Eucariotos ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO: Iniciação, Alongamento e Término • Molde de DNA • Ribonucletídeos (A,G,C,U) • RNA Polimerase: realiza a transcrição, produz nucleotídeos de RNA Transcrição em procarioto Iniciação: (parte amarela:) Alongamento: Adição de nucleotídeos. Término Sequências que atuam como sinal para o término da transcrição. 3´UTR Ao término da transcrição, o RNA procariótico é imediatamente traduzido em proteínas, pois o DNA está no citoplasma. TRANSCRIÇÃO EM EUCARIOTOS 1. Muitos genes 2. DNA genômico organizado em cromatina 3. Acentiltransferase: mecanismo que vai facilitar ou dificultar o acesso da informação que está contina naquela região. 4. Proteínas de remodelação da cromatina 5. Fatores de transcrição: proteínas responsáveis pelo posicionamento correto da RNA polimerase no promotor 6. Acentuadores (enhancers); estão ali para manter mais forte a ligação e garantir que o RNA polimerase faça a leitura do gene até o final. 7. RNAm é processado INICIAÇÃO A enzima RNA polimerase se liga ao DNA e se liga à região promotora e abre a fita. Fatores de Transcrição: Proteínas responsáveis pelo posicionamento correto da RNA- polimerase no promotor, de forma a iniciar a transcrição de um gene. Esses componentes da imagem formarão um complexo e serão importantes para aumentar a afinidade pelo promotor e também consiga manter a sua afinidade até o final do gene. Alongamento A transcrição ocorre até que encontre a sequência de término. Adição do Cap 5´ . Função: proteger essa região e amenizar os processos da tradução que será realizada posteriormente. Término Sequência AAUAAA ou AUUAAA na ponta 3´ do pré-mRNA que irá indicar o fim da transcrição. Pré RNA mensageiro, pois ainda não foi tratado. A RNA polimerase se desgruda a fita de RNA mensageiro vai para o núcleo e o DNA é fechado. PROCESSAMENTO DO PRÉ-mRNA EM EUCARIOTOS A) Adição do Cap (7-metilguanosina) na ponta 5´ do pré-mRNA b) Adição da Cauda poli (A) na ponta 3´ do pré-mRNA c) Splicing (Remoção dos íntrons e recomposição dos éxons) PROCESSAMENTO DO PRÉ-mRNA EM EUCARIOTOS A) Adição do Cap (7-metilguanosina) na ponta 5´ do pré-mRNA b) Adição da Cauda poli (A) na ponta 3´ do pré-mRNA c) Splicing (Remoção dos íntrons e recomposição dos éxons) PROCESSAMENTO DO PRÉ-mRNA EM EUCARIOTOS Cap 5´: protege o mRNA da degradação durante a sua síntese Cauda poli (A) 3´: protege o mRNA da degradação durante o seu transporte do núcleo para o citoplasma. PROCESSAMENTO DO PRÉ-mRNA EM EUCARIOTOS Íntron: sequências de nucleotídeos que não codificam aminoácidos Éxon: sequências de nucleotídeos codificantes de aminoácidos e consequentemente proteínas Splicing Spliceossomo: snRNA (U1, U2, U4, U5, U6) Splicing Alternativo Um mesmo pré-mRNA pode ser recomposto em diferentes modos para produzir diferentes mRNAs que são traduzidos em diferentes proteínas. Proteína A Proteína B Proteína C
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