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Ana Clara Silva Freitas. Módulo: Saúde da Mulher Laboratório de Práticas Integradas UNIME 2021.2 Ana Clara Silva Freitas. Citopatologia É a ciência que estuda as doentas através das modificações celulares, considerando as suas características citoplasmáticas e nucleares. O exame de rastreamento é o Paponicolau (preventivo), também conhecido como esfregaço cervicovaginal. Esse, é um teste realizado para detectar alterações nas células do colo do útero. Vantagens do preventivo: método rápido, baixíssimo custo, alta confiabilidade, altamente padronizado e flexibilidade. Desvantagens do preventivo: exigência de especialização, dedicação e esforço. Como o exame é realizado: Para a coleta do material, é introduzido um instrumento chamado espéculo na vagina (conhecido popularmente como “bico de pato”, devido ao seu formato); O médico faz a inspeção visual do interior da vagina e do colo do útero; A seguir, o profissional provoca uma pequena escamação da superfície externa e interna do colo do útero com uma espátula de madeira e uma escovinha; As células colhidas são colocadas numa lâmina para análise em laboratório especializado em citopatologia. Recomendações: • O método de rastreamento do câncer do colo do útero e de suas lesões precursoras é o exame citopatológico. O intervalo entre os exames deve ser de três anos, após dois exames negativos, com intervalo anual. • O início da coleta deve ser aos 25 anos de idade para as mulheres que já tiveram atividade sexual. • Os exames devem seguir até os 64 anos e serem interrompidos quando, após essa idade, as mulheres tiverem pelo menos dois exames negativos consecutivos nos últimos cinco anos. • Para mulheres com mais de 64 anos e que nunca realizaram o exame citopatológico, deve-se realizar dois exames com intervalo de um a três anos. Se ambos forem negativos, essas mulheres podem ser dispensadas de exames adicionais. Amostra insatisfatória para a avaliação: É considerada insatisfatória a amostra cuja leitura esteja prejudicada pelas razões expostas abaixo, algumas de natureza técnica e outras de amostragem celular, podendo ser assim classificada: 1. Material acelular ou hipocelular (menos de 10% do esfregaço). 2. Leitura prejudicada (mais de 75% do esfregaço) por presença de: sangue, piócitos, artefatos de dessecamento, contaminantes externos ou intensa superposição celular. Amostra satisfatória para avaliação: Designa amostra que apresente células em quantidade representativa, bem distribuídas, fixadas e coradas, de tal modo que sua observação permita uma conclusão diagnóstica. Ana Clara Silva Freitas. Células presentes na amostra Podem estar presentes células representativas dos epitélios do colo do útero: • Células escamosas. • Células glandulares (não inclui o epitélio endometrial). • Células metaplásicas. OBS: Todo resultado liberado pelo laboratório de microbiologia é consequência da qualidade de amostra recebida. Citologia normal do trato feminino O princípio básico da citologia é identificar as alterações na morfologia celular, observando-se o citoplasma e o núcleo das células coradas pela técnica de Papanicolau. As características citoplasmáticas indicam o grau de diferenciação celular, que, quando se alteram, podem mostrar diferenças em sua quantidade e forma, coloração, apresentar vacuolizações, depósito anormal de proteínas como a queratina, entre outras. O núcleo, por sua vez, quando se analisam o aspecto, a coloração, o tamanho e a forma da membrana nuclear, indica se a célula está normal, saudável ou se está sofrendo alterações inflamatórias, pré- neoplásicas e até mesmo neoplásicas. A seguir, serão descritas as principais células e os demais componentes que podem ser observados em um esfregaço citopatológico cérvico-vaginal, no seu padrão de normalidade. Células do epitélio escamoso O epitélio vaginal é descamativo e possui um baixo pH. Tais fatores impedem a entrada de bactérias, estabelecimento de fungos filamentosos e infecção por vírus, desde que não existam lesões na região. Ademais, o canal vaginal é constituído por um epitélio pavimentoso estratificado não-queratinizado. Ana Clara Silva Freitas. Na idade reprodutiva, sob estimulação hormonal, o epitéllo escamoso sofre maturação completa e descamação celular. As células que compõem esse epitélio têm sua classificação baseada na origem histológica e são compostas de células basais, parabasais, intermediárias e superficiais, encontradas na ectocérvice. Basais e parabasais: são células jovens. São mais redondas, sofrem bastante mitose e mantêm a renovação do epitélio escamoso, por isso possuem núcleos mais condensados Atrófico. Intermediárias e superficiais: são células maduras. São mais redondas e possuem um citoplasma maior. Segue a baixo as características isoladas de cada uma: 1. Basais: são pequenas, possuem forma redonda e apresentam núcleo volumoso e central. Podem aparecer no esfregaço citológico, principalmente após o parto, por diminuição hormonal brusca, que leva à descamação intensa e, também em casos de atrofia grave. Núcleo menor. Ana Clara Silva Freitas. 2. Parabasais: são maiores, apresentam-se arredondadas, com citoplasma mais abundante que as basais, e bordas bem-delimitadas, sendo o citoplasma basófilo, denso e de coloração azul- - esverdeada, mas também podem ser observadas células coradas de cinza, rosa e mais raramente laranja. São verificadas, principalmente, em esfregaços atróficos, quando o epitélio encontra-se pouco diferenciado, corno no pós-parto, na pós-menopausa e na infância. Núcleo maior. 3. Intermediárias: têm forma poligonal, citoplasma abundante e normalmente cianófilo. O núcleo apresenta forma arredondada e cromatina finamente granular. Possuem alto teor de glicogênio presente nessas células e ácido láctico, que mantém o ph ácido vaginal. Durante a gravidez, pelo alto teor de glicogênio, essas células adquirem um formato navicular, ocorrendo arredondamento da borda citoplasmática e deslocamento do núcleo para a periferia. Núcleo menos denso e menos corado. 4. Superficiais: Por serem destituídas de junções celulares, descamam facilmente e de forma isolada. Apresentam citoplasma abundante, poligonal, de aspecto delicado, transparente e rico em pré- queratina. De acordo com sua afinidade por corantes da técnica de Papanicolaou, podem ser cianófilas ou eosinófilas. O núcleo é pequeno, denso, central e picnótico. Núcleo mais denso e mais corado. Ana Clara Silva Freitas. Imagem complementar: Diferentes tipos de células escamosas - A: células superficiais (setas); B: células intermediárias; C: células parabasais; D: células metaplásicas. OBS 1: Mulheres grávidas têm mais células intermediárias, devido a presença de estrógeno não patológico. OBS 2: Quando a mulher está perto de menstruar aparecem: + células intermediárias, + glicogênio, + lactobacilo. Ana Clara Silva Freitas. Estrutura uterina (Colo externo) HPV e Neoplasia da Cérvice Uterina A classificação de Bethesda, proposta em 1988 e revisada em 1991, 2001 e 2008, subdivide as células escamosas anormais em quatro grupos: 1.ASC, células escamosas atípicas: possuem resposta exuberante e, geralmente está associada com uma inflamação. São divididas em: ASC-US (atípicas de significado indeterminado) e ASC-H (possui significado indeterminado e não pode excluir lesão de alto grau). As ASC-US apresentam-se com aumento nuclear de 2, 5 a 3 vezes em relação ao tamanho do núcleo da ceélula intermediária normal. Possuem variação na forma nuclear, além de aumento discreto na relação núcleo/citoplasma. Ana Clara Silva Freitas. As ASC-H são escamosas imaturas, com atípianuclear leve ou moderada, incluindo as características de metaplasiaatípica, reparo celular atípico e epitélio atrófico comatipias. Apresentam-se mais comumente espalhadas na lamina, com células isoladas ou com pequenos grupos que contém menos de 10 células. 2.LSIL, lesões intra-epitelialescamosa de baixo grau. Anteriormente denominada displasia leve ou neoplasia intraepitelialde baixo grau (NIC I). Coilócito: significa cavitação, erosão e cratera. São células maduras com grande halo perinuclear de contornos acentuados. A periferia do citoplasma apresenta orla densa. 3.HSIL, lesões intra-epitelialescamosa de alto grau. Incluindo displasia moderada e NIC II, displasia grave e NIC III/carcinoma in situ. Caracterizadas por células epiteliais imaturas, tais como as parabasais, as basais e as metaplásicas. Há um aumento da relação núcleo/citoplasma, variação no formato e no tamanho nucleares, cromatina fina ou grosseira, confere ao núcleo hipercromatismo e nucléolos pequenos. Além disso, a membrana nuclear é irregular e espessada. Ana Clara Silva Freitas. 4.Carcinoma escamoso invasivo: é uma neoplasia epitelial maligna do colo uterino. Essa, é responsável pelo rompimento da membrana basal, infiltra o estroma adjacente e tem capacidade de metástase. Além disso, é a neoplasia mais frequente do colo uterino e é o segundo tipo de câncer mais comum entre as mulheres. No esfregaço é observado células neoplásicas com disformia e/ou pleomorfismo; com núcleo grande ou picnótico, irregulares e, hipercrômico exibindo citoplasma eosinófílico/queratinizado bem definido. Infecções Sexualmente Transmissíveis Para o diagnóstico laboratorial é preciso ter conhecimento da cinética reprodutivo dos vários tipos de espécimes. Com isso, é preciso saber o que, como e quando coletar. Desordens microbiológicas: Gardnerellavaginalis/Mobiluncusspp; Chlamydia spp; Trichomonasvaginalis; Candidaspp. Desordens virais: HSV-2 (herpes); HIV/Aids; HPV. Ana Clara Silva Freitas. Gardnerellavaginalis/Mobiluncusspp Corrimento vaginal é homogêneo, fluido, amarelado ou acinzentado, com ausência de prurido, queimação ou sintomas urinários; Esfregaço citológico caracteriza-se por ausência ou escassez de lactobacilos: ▪Aumento do pH vaginal e do número de leucócitos; ▪Cariopicnose: exacerbação da maturação celular; ▪Células normais, cianofílicasou eosinofílicas, cariopicnóticas, citoplasmas finos e transparentes; ▪Bactérias encontram-se dispersas como poeira entre as células epiteliais descamadas; ▪Cocobacilosacumulo na superfície e bordas, obscurecendo a membrana celular (Clue-Cells/células alvo/células-guia). Chlamydia spp Família: Chlamydiaceae Organismos intracelulares obrigatórios Penetram, ocupam seus vacúolos e são liberadas, contaminando novas células Confundidos com vírus, porém possuem características bacterianas Trichomonas vaginalis Protozoário exclusivamente humano: ▪Anaeróbio facultativo, flagelado, unicelular e provido de grande mobilidade. Núcleo é excêntrico, oval, localizado próximo aos flagelos; Ana Clara Silva Freitas. Crescimento e movimentação são suprimidos no pH vaginal ácido normal e seu desenvolvimento ocorre em pH ideal 5,5 a 6,0; A principal via de contaminação é por contato sexual, mas secreções, roupas íntimas, toalhas úmidas ou objetos contaminados, além de água de piscinas; Sintomática: ▪Corrimento vaginal abundante, purulento, amarelo-acastanhado, amarelo-esverdeado ou esbranquiçado, fétido, bolhoso e pruriginoso, dispareunia e, eventualmente, disúria Exame ginecológico/clínico: ▪Irritação vulvar, com hiperemia e edema nas paredes vaginais e do colo uterino, que pode apresentar aspecto característico de “morango”; ▪Resultado do processo inflamatório com distensão dos vasos sanguíneos superficiais e focos hemorrágicos difusos. Candida sp Prurido intenso na região afetada; Ardor; Dispareunia (dor durante a relação sexual); Lesões podem ser expansíveis: ▪Períneo; ▪Perianal; ▪Inguinal. Lesões puntiformes Ana Clara Silva Freitas. OBS 1: A candidíase pode ser classificada como uma IST. Contudo a sua transmissão não é exclusivamente por via sexual. OBS 2: Pode estar associada à Trichomonas vaginalis. Fatores de predisposição ▪Diabetes mellitus; ▪Gravidez; ▪Uso de contraceptivos (anticoncepcionais) orais; ▪Uso de antibióticos; ▪Uso de medicamentos imunosupressivos (que diminuem as defesas imunitárias do organismo); ▪Obesidade; ▪Uso de roupas justas ou derivadas de plásticos; ▪Patógenos primários; ▪HIV, HTLV, Tuberculose. Herpes Simples Família Herpesvirus Espécie: Herpes simplex virus1 (HSV-1): ▪Facial. Espécie: Herpes simplex virus2 (HSV-2): ▪Genital. Sintomas: eritemas localizados que se desenvolvem para erupções bolhosas; Prevenção: Não existe vacina. Evitar contato direto ou indireto. Tratamento: ▪Aciclovir (local e/ou sistêmico) para acelerar a parada do ciclo viral; ▪Esperar o ciclo viral se encerrar; OBS: o vírus, após o desaparecimento da sintomatologia entra em LATÊNCIA. DNA-vírus (180 a 220 nm): ▪Capsídeo icosaédrico (162 capsômeros) e de envoltório lipídico. Capazes de formar inclusões intranucleares e infectar o homem: ▪Afinidade dermoneurotrópica; ▪Podem causar infecções líticas, persistentes, latentes ou transformadoras. Ana Clara Silva Freitas. HSV-1 acomete, principalmente, lábios e face; HSV-2 acomete predominantemente a região genital; Replicação do vírus ocasiona lise da célula hospedeira, por inibir sua síntese macromolecular, degradar o DNA e provocar a ruptura do citoesqueleto, promovendo senescência celular; Pode infectar células escamosas imaturas, metaplásicase endocervicais; Citomegalia e cariomegalia: ▪Deslocamento da cromatina para a periferia; ▪Aspecto espesso à membrana nuclear. Detecção de células gigantes multinucleadas ▪Decorrentes da fusão das membranas citoplasmáticas das células infectadas, com núcleos de vários tamanhos e formas; ▪Padrão cromatínicosemelhante a “vidro fosco” HIV O HIV ataca células do sistema imunológico: ▪Linfócitos T CD4. Sintomas: ▪Fases iniciais (período de incubação) não apresentam sintomas aparentes; ▪Fases tardias (desenvolvimento da AIDS): Linfoadenomegalia por todo corpo, emagrecimento, febre, sudorese e perda de memória. OBS: Mais propício a infecções secundárias ou doenças oportunistas. Ana Clara Silva Freitas. Papiloma Vírus Humano (HPV) Verrugas são causadas pelo papilomavírushumano (HPV) São mais de 80 variedades Tratamento: ▪Cauterização; ▪Esperar a finalização do ciclo viral. OBS: Em casos de evolução são aplicados antivirais tópicos e sistêmicos Prevenção: Subtipos 6, 11, 16 e 18 Resumo das IST’s mais comuns: Ana Clara Silva Freitas. Diagnóstico laboratorial Pesquisa de anticorpos específicos de um determinado vírus ▪Resposta imunológica; ▪Imunoglobulinas; ▪IgG; ▪IgM . Reações de aglutinação Imunoenzimáticos Teste utilizado para detectar a presença de antígenos (Ag) ou anticorpos (Ac) específicos em fluidos corporais ou sobrenadantes de cultura através de uma reação imunológica e enzimática ▪ELISA: une a especificidade de uma ligação Ag-Ac com a sensibilidade de uma reação enzimática. É um método tanto qualitativo quanto quantitativo. Ana Clara Silva Freitas. ▪Testes rápidos: são versáteis, rápidos se serem realizados, baratos de serem produzidos e sua execução é simples. Immunobloting Método utilizado para a imunodetecção de proteínas após sua separação por eletroforese em gel e transferência de um extrato proteico para uma membrana adsorvente; Permite detectar, caracterizar e semi-quantificarmúltiplas proteínas, principalmente aquelas que estão em baixas quantidades na amostra; Eletroforese (poliacrilamida/agarose) ; Transferênciapara membrana; Bloqueio; Adição de anticorpos/sondas específicos(as); Detecção da reação;