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Ji-Paraná, 13 de março de 2019. Disciplina: Biotecnologia Curso: Biomedicina Professora: Natália Faria Romão Exercícios 1: Sequenciamento de DNA e Genoma 1. Qual o objetivo das técnicas de sequenciamento? ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ 2. (USP-SP, 2009) Uma vez de sequenciar as bases nitrogenadas de todos os cromossomos de uma planta com um genoma muito grande, pesquisadores selecionaram partes desse genoma para sequenciar. Somente as sequencias de DNA que correspondem ao conjunto dos RNAs mensageiros transcritos no fruto que serão estudados. O DNA a ser sequenciado foi sintetizado em laboratório, tendo como molde as moléculas de RNA extraídas dos frutos. a) Se os cientistas fossem sequenciar todo o genoma dessa planta, haveria diferença se o material genético viesse do fruto ou da folha da planta? Explique. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ b) No estudo das sequencias que tiveram como molde o RNA mensageiro, faria diferença se esse RNA mensageiro fosse extraído das folhas ou dos frutos? Justifique. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 3. (PUC-MG, 2013) Quase todo o genoma humano tem alguma função, diz pesquisa. Parece que a ciência finalmente está começando a abrir a caixa-preta do genoma. Um novo olhar sobre o conjunto do DNA humano indica que ao menos 80% de seus 3 bilhões de “letras” químicas têm alguma função. E sim, isso é surpreendente – porque, desde que o genoma humano foi soletrado pela primeira vez, há 12 anos, a impressão que ficou é que 95% dele era “DNA-lixo”. Fonte: Folha de S.Paulo online, 05 de setembro de 2012. Sobre o DNA humano, assinale a afirmativa INCORRETA. a) A partir do sequenciamento genético total do DNA humano, é possível avaliar o prognóstico de várias enfermidades distintas, incluindo diferentes tipos de câncer, problemas cardíacos, diabetes e Alzheimer. b) Um gene corresponde a uma região particular de uma molécula de DNA e cada um determina a produção de uma molécula específica de RNA transcrevendo para ela seu código genético. c) Após a transcrição da maioria dos genes, alguns trechos do RNA denominados íntrons são removidos e fitas de RNAm, compostas por éxons, são liberadas do núcleo e podem ser traduzidas como proteínas. d) Nosso DNA é constituído fundamentalmente por cromossomos, e cada cromossomo possui apenas uma molécula de DNA. 4. Explique basicamente a técnica de sequenciamento pelo Método químico ou Sanger. ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ 5. Um di-desoxiribonucleotídeo: a) Apresenta 2 oxigênios a menos em sua base nitrogenada. b) Não apresenta grupamentos –OH no carbono 3’ da pentose. c) Apresenta duas desoxiribose a menos em sua estrutura d) Apresenta duas moléculas de desoxirribose e) Apresenta o grupamento OH no carbono 3’ da pentose. 6. Cite 2 vantagens e 2 desvantagens do método de sequenciamento Sanger. ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ 7. Observe a figura a baixo e descreva a sequência de DNA formada a partir deste gene que foi submetido ao sequenciamento manual pelo método Sanger. E lembre-se sempre de que você deve colocar o sentido da fita: ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ 8. Descreva basicamente o método de pirosequenciamento. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 9. Cite 2 vantagens e 2 desvantagens do método pirosequencimento. ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ 10. Observe a imagem: a) Descreva a sequência de nucleotídeos obtida desse sequenciamento. __________________________________________________________________________ 11. Cite as aplicabilidades do sequenciamento de genes e genomas. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________
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