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SPLICING E EDIÇÃO DO RNA O QUE SÃO ÍNTRONS? COMO OCORRE? PROCESSO DE SPLICING REGIÕES ENTRE OS ÉXONS ÍNTRONS SÃO AS REGIÕES CLARAS ENTRE OS ÉXONS 4 TIPOS DIFERENCIADOS PELA MANEIRA DE REMOÇÃO GRUPO I E II AUTO SPLICING PRÉ-mRNA NUCLEAR SPLICEOSSÔMICO tRNA ENZIMÁTICO PRÉ- mRNA OCORRE NO SPLICEOSSOMO, COMPOSTO POR RNAs NUCLEARES MENORES E PROTEÍNAS REQUEREM 3 SÍTIOS DE SEQUÊNCIAS CONSENSO CRITICAS SÍTIO SPLICING 5' SÍTIO SPLICING 3' PONTO DE RAMIFICAÇÃO NUCLEOTÍDEO DE ADENINA, LOCALIZADO DE 18 A 40 NUCLEOTIDEOS UPSTREAM ANTES DO SÍTIO DO SPLICING 3' A MAIORIA DOS ÍNTRONS DO RNA MENSAGEIRO COMEÇA COM GU E TERMINA COM AG INDICA QUE A SEQUÊNCIA TEM FUNÇÃO PRIMORDIAL SE HOUVER ALTERAÇÃO, VAI IMPEDIR O SPLICING UM ÍNTRON VAI FICAR ENTRE 1 ÉXON UPSTREAM E UM ÉXON DOWNSTREAM 2. REAÇÃO DE TRANSESTERIFICAÇÃO: QUANDO A EXTREMIDADE 5' DO ÍNTRON SE PRENDER AO PONTO DE RAMIFICAÇÃO. SE LIGA O FRUPO FOSFATO COM O CARBONO 2' DO AÇUCAR APÓS O CORTE NO SPLIGING 5' E 3', SURGE UMA LIGAÇÃO COVALENTE ENTRE O ÉXON 1 E ÉXON 2 O ÍNTRON É LIBERADO NUMA ESTRUTURA DE LARIAT, "LAÇO" A LIGAÇÃO QUE SEGURA O LARIAT É ROMPIDA, E O ÍNTRON LINEAR É DEGRADADO O mRNA UNIDO É EXPORTADO PARA O CITOPLASMA E TRADUZIDO COSISTE NAS INTERAÇÕES DO RNA MENSAGEIRO E RNAS NUCLEARES MENORES (snRNA) INTERAÇÕES ENTRE OS RNAS NUCLEARES MENORES INTERAÇÕES DEPENDEM DE PAREAMENTO DE BASES COMPLEMENTARES SPLICING DO RNA OCORRE NO SPLICEOSSOMO, QUE É MONTADO SEQUENCIALMENTE PELAS INTERAÇÕES mRNA E snRNA E ENTRE snRNA U1 E U2 SÃO RNAS NUCLEARES MENORES (snRNAS) U1 E U2 INTERAGEM COM REGIÃO DO ÍNTRON E PONTO DE RAMIFICAÇÃO A PARTIR DISSO VÃO SE LIGAR OUTROS snRNAs MENORES E OUTROS SERÃO LIBERADOS APÓS ISSO OCORRE O CORTE NAS REGIÕES DE SPLICING 5' LIGAÇÃO NO PONTO DE RAMIFICAÇÃO CORTE 3' LIBERA ÍNTRON NA ESTRUTURA LARIAT IMEDIATAMENTO APÓS O SPLICING COMPLEXO DE JUNÇÃO DE ÉXON (EJC) É DEPOSITADO EM APROXIMADAMENTE 20 NUCLEOTÍDIOS UPSTREAM DE CADA ÉXON-ÉXON NO mRNA PROMOVE A EXPORTAÇÃO DO mRNA DO NÚCLEO PARA O CITOPLASMA ÍNTRONS AUTO-SPLICING OU AUTOREMOVÍVEIS CAPACIDADE DE SE REMOVER DE UMA MOLÉCULA DE RNA DIVIDIDOS EM 2 GRUPOS GRUPO I GRUPO II rRNA (protista), GENES MITOCONDRIAIS( fungos), bacterias e bacteriófagos genes das eubactérias, da archea e das ORGANELAS EUCARIÓTICAS OS 2 GRUPOS SE DOBRAM EM ESTRUTURAS SECUNDÁRIAS PARA QUE OCORRA O AUTOSPLICING ALGUNS ESTUDOS TENDEM A RELACIONAR OS ÍNTRONS DOS PRÉ RNAS MENSAGEIROS SEMELHANTES AO DO GRUPO II VIAS DE PROCESSAMENTO ALTERNATIVAS ENTRA EM CONFLITO COM CONCEITO DE GENE ENQUANTO O CONCEITO DE GENE É " SEQUENCIA DE DNA QUE CODIFICA RNA E TRANSCREVE UMA SEQUÊNCIA DE AMINOÁCIDOS EXISTE A POSSIBILIDADE DE 1 ÚNICO PRÉ- mRNA PRODUZIR DIFERENTES PROTEINAS UNICO PRÉ-mRNA PROCESSADO DE DIFERENTES MANEIRAS TIPOS ALTERNATIVOS DE mRNA PRODUÇÃO DE DIFERENTES PROTEÍNAS GRAÇAS A ISSO, PODE PRODUZIR DIFERENTES RNAS MENSAGEIROS B. QUANDO TEM DIFERENTES TAMANHOS DE ÉXONS, OS RNAS MENSAGEIROS TERÃO TAMANHOS DIFERENTES A. PELO SPLICING ALTERNATIVO PODEMOS RETIRAR 1 ÉXON JUNTO DO ÍNTRON INTERESSANTE PODE USAR UM MESMO GENE PARA REALIZAR A TRANSCRIÇÃO, MAS A DEPENDER DO PROCESSAMENTO PODE GERAL RNAS MENSAGEIROS DIFERENTES NAS CÉLULAS DA TIREÓIDE A CLIVAGEM OCORREU APÓS O ÉXON 4, RETIRANDO ASSIM OS ÉXONS 5 E 6 NAS CÉLULAS DO CÉREBRO, O ÉXON 4 FOI ELIMINADO JUNTO COM OS ÍNTROS OBSERVAÇÕES COMUM NOS EUCARIOTOS MULTICELULARES > 90% DE TODOS OS GENES HUMANOS SOFREM SPLICING ALTERNATIVO A FORMA DE SPLICING É DIFERENTE ENTRE OS TECIDOS HUMANOS: OS TECIDOS DO CÉREBRO E DO FÍGADO X OUTROS TECIDOS O SPLICING VARIA ATÉ DE UMA PESSOA PARA OUTRA SEQUENCIAMENTO DO GENOMA ( NÚMERO DE GENES/COMPLEXIDADE DO GENOMA) -É COMPLEXO PELO PROCESSO ALTERNATIVO - UNICO GENE .> MÚLTIPLAS PROTEÍNAS EDIÇÃO DE RNA A SEQUÊNCIA CODIFICADORA DE UMA MOLÉCULA DE mRNA É ALTERADA APÓS A TRANSCRIÇÃO, ENTÃO A PROTEÍNA TEM UMA SEQUÊNCIA DE AMINOÁCIDOS DIFERENTE DA SEQUÊNCIA CODIFICADA PELO GENE SE ESSA MUDANÇA NÃO VEM DO MOLDE DE DNA, COMO ELA É ESPECÍFICADA? RNAs GUIAS mRNA PAREIA COM RNA GUIA APÓS ISSO O mRNA SOFRE CLIVAGENS E NOVOS NUCLEOTÍDEOS SÃO ADICIONADOS OU BASES ALTERADAS COM O RNA GUIA DE MOLDE O RNA GUIA ADICIONA NUCLEOTIDIOS AOS PRÉ-mRNA QUE NÃO FORAM CODIFICADOS PELO DNA ENZIMAS EXEMPLO EM HUMANO A ENZIMA DESAMINA CITOSINA EM URACILA ACABA TRANSFORMANDO A GLUTAMINA EM UM CODON DE PARADA GERA UMA PROTEINA ENCURTADA E QUANTO AOS RNA POLIMERASE I E III? RNA POLIMERASE I RNA RIBOSSOMAIS RNA POLIMERASE III RNA TRANSPORTADOR PODE ESTAR EM GRUPOS OU DISPERSO NO GENOMA ESTRUTURA COMUM. ESTRUTURA DE TREVO NÃO ADICIONAM POLI A OU CAP PODEM PRECISAR DE REMOÇÃO DE ÍNTRONS O BRAÇO T"PISSI"C (DA DIREITA) É COMPOSTO BASES DE 3 NUCLEOTIDIOS EM SUA ALÇA. TIMINA, PSEUDO URODINA (BASE MODIFICADA CHAMADA DE PISSI) E A CITOSINA O BRAÇO ANTICÓDON FICA NA PORÇÃO INFERIOR DO RNA TRANSPORTADOR. O 3 NUCLEOTIDEOS NA EXTREMIDADE DESSE BRAÇO VÃO INTERAGIR COM O CÓDON DO RNA MENSAGEIRO CHAMADO DE CÓDON NO RNA MENSAGEIRO E ANTICODON NO RNA TRANSPORTADOR BRAÇO DHU: BASE MODIFICADA DIHIDROURIDINA (H) COMO PODE TER ESSAS BASES MODIFICADAS NO tRNA SE NÃO VEM DO DNA? TODAS AS BASES MODIFICADAS NOS tRNAs SÃO PRODUZIDAS POR ALTERAÇÃO QUÍMICA DAS QUATRO BRASES RNA PADRÃO (ADENINA, URACILA, CITOSINA, GUANINA ALTERAÇÕES REALIZADAS PELAS ENZIMAS MODIFICADORAS DE tRNA RIBOTIMIDINA: QUANDO ADICIONA UM GRUPO METIL NA URACILA PSEUDOURIDINA: MODIFICA A BASE PROCESSAMENTO DE tRNAS NÃO EXISTE UM PADRÃO DE PROCESSAMENTO DE tRNAS. OS EUCARIOTICOS SÃO SEMELHANTES AOS DAS BACTERIAS A MAIORIA SÃO TRANSCRITOS COMO PRECURSORES MAIORES QUE SERÃO CLIVADOS, APARADOS E MODIFICADOS. ASSIM PRODUZ OS RNAS TRANSPORTADORES MADUROS OS ÍNTRONS SÃO MENORES QUE OS DO PRÉ RNA MENSAGEIRO NÃO HÁ REGIÕES DE CONSENSO ENTRE ÍNTRON E ÉXON COMO NOS PRÉ RNAS MENSAGEIROS ALGUNS POSSUEM ÍNTRONS DE TAMANHOS VARIADOS EXEMPLO: LEVEDURA SEMPRE TEM 1 UNICO INTRON ENCONTRADO NO SITIO E' DO ANTICODON, QUE É REMOVIDO PELO SPLICING ACOPLADO AO RNA MENSAGEIRO E TRANSPORTADOR NO PROCESSO DE SINTESE PROTEICA PROCESSAMENTO EUCARIONTES PEQUENOS RNAS NUCLEOLARES Tópico Flutuante EUCARIONTES POSSUEM 2 TIPOS DE GENES DE rRNA GENE MAIOR CODIFICA 187S, 28S E 5,8S GENE MENOR CODIFICA O 5S rRNA
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