POP - Dosagem de hemoglobina

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO
(POP)
	
	Código: P10
	Estágio em Análises Clínicas II
	Emissão: 20/11/2021
	Páginas: 4
	Dosagem de hemoglobina
	Revisão:
	1. Introdução
 A hemoglobina, conhecida como Hb, é um componente dos glóbulos vermelhos do sangue que tem como função principal o transporte de oxigênio para os tecidos. A dosagem de hemoglobina é um exame que faz parte do hemograma e mede a quantidade de hemoglobina, que é a proteína presente nas hemácias. A hemoglobina e sua dosagem vão indicar a capacidade do sangue de transportar oxigênio suficiente para os tecidos. Quando a hemoglobina está abaixo do normal indica que o indivíduo está com anemia, que é quando o corpo do indivíduo não recebe oxigênio o suficiente (PAGANA, 2001).
 Avaliar a concentração de hemoglobina presente no soro ou plasma apenas visivelmente é muito difícil, por isso existem diversos métodos que contribuem para a facilidade e precisão dessa dosagem. O método mais comum para realização deste exame é a do cianometahemoglobina que utiliza o espectrofotômetro para resultado da dosagem (OLIVEIRA, 2004).
	2. Princípio do teste:
 O teste de dosagem de hemoglobina tem como princípio medir a quantidade de hemoglobina de um paciente através do sangue. O método de cianometemoglobina é o mais usado e tem como princípio a oxidação do íon ferroso da hemoglobina, oxihemoglobina e carboxihemoglobina pelo ferrocianeto, formando a metahemoglobina. A hemoglobina oxidada vai combinar com o cianeto de potássio e produzir a cianometemoglobina que é medida colorimetricamente no espectrofotômetro.
	3. Aplicação clínica: 	
 Em geral, a dosagem de hemoglobina é pedida como parte do hemograma, que pode ser pedido por muitas razões. Contudo, esse teste ajuda a avaliar a gravidade de anemia ou de policitemia, e também para monitorar a resposta a algum tratamento.
	4. Amostra:
Sangue total com EDTA.
4.1. Interferentes:
· Sangue mal coletado e mal homogeneizado;
· Contaminação da amostra;
· Armazenamento errado de amostras ou reagentes;
· Reagente com mudança de coloração.
	5. Equipamento de proteção individual:
Jaleco, óculos de proteção, luvas, calça sem rasgos, tênis fechado e máscara*.
*O uso da máscara é obrigatório durante a pandemia da Covid-19.
	6. Padrões, controles, reagentes e outros insumos:
· Reativo de cor;
· Kit Hemoglobina Padrão;
· Sangue.
	7. Equipamentos:
· Micropipetas de 100µL e 1000µL;
· Ponteiras;
· Canetas de identificação;
· Tubos de ensaio ou de hemólise;
· Cronômetro ou relógio;
· Pipeta graduada de vidro com pipetador;
· Estante de tubos;
· Espectrofotômetro;
· Água destilada;
· Papel toalha;
· Béquer.
	8. Procedimento detalhado:
· Pipetar 5 mL do reagente de cor em um tubo de ensaio ou hemólise identificado;
· Pipetar 20 uL de sangue no tubo já com o reagente de cor;
· Homogeneizar bem;
· Esperar de 3 a 5 minutos em temperatura ambiente;
· Zerar o espectrofotômetro a 540 nm com água destilada;
· Medir absorbância do Padrão de hemoglobina;
· Medir absorbância da amostra;
· Calcular.
*Se o procedimento for de duplicata, fazer todo o procedimento 2 vezes.
*Reação de cor estável por 60 minutos.
	9. Cálculos:
FC = [HbP]
 AbsP
Hb (g/dL) = FC x Abs Teste 
Legenda: 
· FC = Fator de calibração
· Abs = Absorbância
· P = Padrão
· Hb = Hemoglobina
	10. Valores de Referência:
· Crianças de 6 a 12 anos: 11,5 a 15,5 g/dL;
· Homens: 14 a 18 g/dL;
· Mulheres: 12 a 16 g/dL;
· Grávidas: 11 g/dL.
 10.1. Interpretação:
· A desidratação pode causar aumento temporário dos níveis de hemoglobina;
· O nível de hemoglobina diminui um pouco durante a gravidez;
· Os níveis de hemoglobina são máximos por volta das 8 horas da manhã e mínimos próximo às 20 horas;
· Pessoas que vivem em locais de grande altitude apresentam níveis mais altos de hemoglobina, em resposta à quantidade menor de oxigênio disponível no ar nessas regiões.
· O nível de hemoglobina é um pouco mais baixo em idosos, mulheres e crianças.
Valores acima do normal podem resultar de:
· Desidratação;
· Produção excessiva de hemácias na medula óssea;
· Doença pulmonar grave;
· Outras causas.
Valores abaixo do normal indicam anemia, que pode ser resultado de:
· Deficiência de ferro, de vitamina B12 ou de folato;
· Defeitos hereditários da hemoglobina, como anemia falciforme e talassemias;
· Outros problemas hereditários como defeitos enzimáticos;
· Cirrose hepática;
· Sangramento excessivo;
· Destruição excessiva das hemácias;
· Doença renal;
· Outras doenças crônicas;
· Anemia aplástica;
· Câncer afetando a medula óssea.
	11. Linearidade e Limites de detecção:
· A reação é linear até 20g/dL.
· A sensibilidade, que indica o limite de detecção do método, corresponde à média mais 3 vezes o desvio padrão, sendo igual a 0,330 g/dL.
	12. Referências bibliográficas: 
PAGANA, Kathleen D. & Pagana, Timothy J. Mosbys Diagnostic and Laboratory Test Reference 5th Edition: Mosby, Inc., Saint Louis, MO. 2001.
OLIVEIRA, Raimundo Antônio Gomes Oliveira. Anemias e Leucemias: Conceitos Básicos e Diagnóstico por técnicas laboratoriais. Ed. Roca, 2004.
	Elaborado por: Rebeca Boaventura Falcão
	Aprovado e liberado por: