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LABORATÓRIO LAMARCK ANÁLISES CLÍNICAS E CITOPATOLÓGICAS PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO P.O.P TAREFA: UROCULTURA + ANTIBIOGRAMA EXECUTANTE: Biomédico. FINALIDADE: Exame para diagnosticar infecções bacterianas do trato urinário, identificação dos micro-organismos e teste de sensibilidade aos antibióticos. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS: - Placa de urocultura - Bico de Bunsen - Alça calibrada de 0,01 mL (10 µL) ou 0.001 mL(1µL) DESCRIÇÃO DO PROCEDIMENTO: · Homogeneizar a urina sem centrifugar; · Imergir a alça calibrada de 0,01 mL (10 µL) ou 0.001 mL(1µL) na urina de forma vertical – Analisar a presença de material na alça; · Semear a placa em ágar Cled e MacConkey – este procedimento deve ser realizado atras do bico de bunsen; · Incubar em estufa de 35ºC de 18 a 24 horas; · Se o resultado da cultura for negativo após as 24 horas e na sedimentoscopia foi observado a presença de bactérias ou número elevado de leucócitos, incubar por mais 24 horas. Padrão de estriamento para realização de contagem semiquantitativa das bactérias Técnica de semeadura quantitativa em placas • Na presença de cocos gram + É recomendado a semeadura em ágar sangue para análise de S.agalactiae Verificação de hemólise Interpretação · Crescimento com alça de 0,001mL -1 µL (1:1000) – 1 colônia x 1000= 1000 UFC/ mL · Com alça de 0,01 mL (1:100) –10 µL – 1 colônia x 100 = 100 UFC/ mL Resultado · Negativo para culturas inferiores a 100.000 UFC/ml. · Positivo para culturas acima de 100.000 UFC/ml. Antibiograma · Prova de sensibilidade aos antibióticos; · Utilizado para microrganismos cuja sensibilidade às drogas normalmente não seja previsível; · Realizado em um isolado bacteriano de cultura recente. Técnica · Com um swab estéril, semear a solução no Agar Mueller-Hinton. · Aguardar 5 minutos à temperatura ambiente para que o inócuo seja completamente absorvido pelo ágar. · Colocar o disco com o auxílio de uma pinça previamente flambada. – Os discos devem ter uma distância de 2,5cm – Máximo de 12 discos em placas de 15 cm e 5 discos em placas de 9 cm · Após 15 minutos da colocação dos discos, as placas são invertidas e incubadas · Incubar de 18 a 24 horas à 35 +/- 1º C · Medir o diâmetro dos halos. · Classificá-los quanto a resistência, sensibilidade intermediária e sensibilidade. Resultado Leitura e interpretação Leitura realizada no fundo da placa com auxílio de uma régua REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA: UROCULTURA. Disponível em: file:///C:/Users/pc/Desktop/Controle%20de%20Qualidade/07%20-%20Gest%C3%A3o%20da%20Qualidade/ac2_07.pdf. Ultimo acesso em: 18 de Fevereiro de 2022 ANTIBIOGRAMA. Disponível em: http://www.profbio.com.br/aulas/ac2_06.pdf. Ultimo acesso em: 18 de Fevereiro de 2022. Nome Assinatura Data Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: ___/___/___
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