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Objetivos Gerais: Esta aula prática tem por objetivo demonstrar ao aluno, através de experimentos simples, uma das propriedades fisico- químicas das biomembranas, além da identificação, ao microscópio de luz e em eletromicrografias, das especializações da membrana plasmática, dos elementos constituintes do citoesqueleto, organelas microtubulares e a organização do citoesqueleto nas células musculares estriadas. PARTE 1 Propriedades fisico-químicas das biomembranas A célula consegue manter, em seu interior, uma composição extremamente diferente do meio que a rodeia graças à compartimentalização gerada pela membrana plasmática e outras biomembranas internas. Assim, admite-se que as membranas biológicas apresentam propriedades fisico-químicas especializadas em controlar seletivamente ou diferencialmente a entrada e a saída de soluto e solvente. Nesta parte da aula o aluno deverá executar um experimento simples que demonstra uma dessas propriedades da membrana biológica: Efeito do solvente orgânico na permeabilidade seletiva das as membranas. Procedimento: 1. Identifique dois tubos de ensaio com número 1 e 2. 2. Coloque 4 ml de água no tubo 1 e 2 ml de água tubo 2 3. Adicione 2 ml de acetona no tubo 2 4. Adicione em cada um dos tubos um “cubinho” (+ 1cm3 ) de beterraba devidamente seco em papel absorvente. 5. Aguarde até o final da aula (cerca de duas horas) para observar os resultados. Após a observação dos resultados responda: O que se pode concluir quando se compara os resultados obtidos nos dois tubos? Como a acetona atuou sobre as células para resultar o observado? PARTE 2 Especializações da Membrana plasmática 1. Lâmina de intestino delgado: procure identificar em preparação de intestino delgado, usando a objetiva de 40X, e depois a de imersão, as vilosidades intestinais cujas células apresentam microvilosidades (ao microscópio de luz denominadas borda estriada ou borda em escova). Qual o papel dessa especialização da membrana plasmática neste tipo celular? Esquematize apenas um detalhe da vilosidade. AULA PRÁTICA 3 –Membrana Plasmática: Estrutura e Especializações Citoesqueleto: caracterização dos componentes 2. Lâmina de epidídimo: procure identificar em preparação de epidídimo, os estereocílios. Localize-os, incialmente, com a objetiva 10X, e com a objetiva 40X e de imersão observe maiores detalhes dos aspectos morfológico e estrutural dos estereocílios. Qual o papel dessa especialização da membrana plasmática nesse tipo celular? Esquematizar apenas um detalhe do corte de epidídimo. Observação de eletromicrografias. Na bancada estará disponível um álbum contendo eletromicrografias dentre as quais algumas se referem à membrana plasmática e suas especializações. Observe-as, identifique as estruturas e procure correlaciona-las com as lâminas que você analisou. Sites que podem ser úteis: http://www.anatomyatlases.org/MicroscopicAnatomy/MicroscopicAnatomy.shtml http://www.ulb.ac.be/sciences/biolhc/ http://www.uni- ainz.de/FB/Medizin/Anatomie/workshop/EM/EMAtlas.html Nestes sites você encontrará várias imagens de microscopia de luz e microscopia eletrônica que podem lhe auxiliar a entender sobre a estrutura celular. PARTE 3 - CITOESQUELETO a) Lâmina de Traqueia: procure identificar os cílios na superfície apical das células epiteliais da traqueia em corte transversal. Qual é o papel dessas estruturas na traqueia? Esquematize apenas em aumento 40X. Responda: 1. É possível observar o cílio como estrutura individualizada? 2. Como se chama a estrutura intensamente corada na base de cada cílio? 3. Qual é a diferença fundamental entre essas estruturas? Esquematize essas diferenças. b) Organização do citoesqueleto (microfilamentos) das células musculares. Observação de corte de Língua de coelho corada pelo método do Tricrômico de Gömöri. Nesta lâmina o aluno perceberá uma abundância de fibras musculares esqueléticas estriadas. As estrias transversais presentes nestas células são devidas à disposição organizada dos microfilamentos do citoesqueleto. Esquematize. Responda: 1. Quais são os elementos do citoesqueleto responsável pela aparência estriada das fibras musculares esqueléticas estriadas? 2. Como ocorre a movimentação destes componentes para que ocorra a contração do músculo? c) Eletromicrografias Serão distribuídos nas bancadas alguns álbuns de eletromicrografias, e caberá ao aluno verificá-las de acordo com as instruções do docente. Nessas eletromicrografias deverão conter os principais elementos do citoesqueleto. Analise e estabeleça comparações entre as estruturas observadas. Não se esqueça de que na Internet você tem uma grande quantidade de informações que podem lhe auxiliar neste tema. Basta navegar nos sites de busca com as palavras-chave: Cytoskeleton; actin filament; microtubules; intermediary filament. Nome:_____________________________________________________Turma:_________ Assunto da aula: _____________________________________________________________Data: _____________ Material: ___________________________ Coloração: _________________________ Aumento: _______________ Material: ___________________________ Coloração: _________________________ Aumento: _______________ Material: ___________________________ Coloração: __________________________ Aumento: ___________ Material: ___________________________ Coloração:__________________________ Aumento: _______________ Nome:_____________________________________________________Turma:_________ Assunto da aula: _____________________________________________________________Data: _____________ Material: ___________________________ Coloração: _________________________ Aumento: _______________ Material: ___________________________ Coloração: _________________________ Aumento: _______________ Material: ___________________________ Coloração: __________________________ Aumento: ___________ Material: ___________________________ Coloração:__________________________ Aumento: _______________
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