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Licenciatura em Tecnologia Biomédica Laboratorial 3º Ano - II º Semestre Química Clínico II Tema: Líquido amniótico Discentes: Adérito Arlindo Boca Amílcar Mirénio Jorge Guelume Ana Francisca Tsambe Félix Alexandre Tadeu Docente: Dr. Felício Mabote Maputo, Março 2022 Introdução O líquido amniótico é o fluído biológico que envolve o feto durante a gestação. Contido no interior da bolsa amniótica, ele protege o embrião de choques mecânicos e mantém a temperatura estável, além de fornecer nutrientes para seu desenvolvimento. Por conter células e metabólitos do feto, a análise do líquido amniótico pode ser utilizada para diagnóstico de maturidade fetal, de anomalias cromossômicas, defeitos do tubo neural e distúrbios genéticos. Objectivos Geral Adquirir conhecimentos sobre o líquido amniótico. Específicos Descrever o processo de formação do líquido amniótico; Caracterizar o líquido amniótico; Mencionar as funções do líquido amniótico; Identificar os meios de diagnóstico laboratorial. Formação do líquido amniótico A formação da bolsa amniótica ou âmnio tem início uma ou duas semanas após a concepção, juntamente com a produção do líquido amniótico, que aumenta de volume com a progressão da gestação, com a contribuição do organismo materno e fetal. O líquido amniótico é formado pela placenta, que fornece água e solutos, e outra quantidade de líquido provém da urina e do trato respiratório do feto, do cordão umbilical, além do âmnion. Líquido amniótico Funçoes do líquido amniótico Proteção mecânica do feto; Manter a temperatura ideal para o feto; Permitir a circulação adequada para a troca de água e compostos orgânicos e inorgânicos com a mãe; Além de conter proteínas e peptídeos fundamentais para o processo de desenvolvimento do embrião. Composição do líquido amniótico O líquido amniótico é composto por 98% a 99% de água, e o restante por células fetais de diversos tecidos e substâncias bioquímicas produzidas pelo feto. Dentre as substâncias bioquímicas encontradas no líquido amniótico estão: proteínas, eletrólitos, bilirrubina, enzimas, hormônios, lipídios e compostos nitrogenados não proteicos. Factores proinflamatórios (interleucina 6, IL-6, IL-8, IL-1b) e anti-inflamatórios (IL-10), além de diversos fatores de crescimento, que estão associados ao desenvolvimento fetal. Volume O volume em qualquer dado momento é uma função de vários movimentos de fluidos inter-relacionados, incluído fetal: Deglutição de liquido amniótico Micção; Transporte intramembranoso (através do âmnio e da vasculatura fetal subjacente; E excreção do fluido pulmonar. Cont… Idade gestacional volume Em 16 semanas 200 a 300 ml Em 26 semanas, 400-1.400 ml Em 34 semanas 300-2.000 ml em 34 semanas 300-2.000 mL Em 40 semanas 300-1.400 ml Polihidrâmio ou hidrâmnio É um acúmulo de líquido amniótico acarretando volumes superiores a 2.000 ml . O polihidrâmio está associado a complicações tais como: Distúrbios do tubo neural, anomalias cromossômicas’ Anomalias gastrointestinais ou do sistema nervoso central do feto; Infecções congênitas, arritmias cardíacas, Diabetes materno ou gestação múltipla. Cont…Imagem Sobredistensão uterina Dificuldade na palpação abdominal Movimentação fetal Distúrbios* de contratilidade Oligohidrâmnio Quantidades reduzidas de líquido amniótico ou oligohidrâmnio (volume inferior a 500 ml) podem ser decorrentes de: Deformidades no trato urinário; Maior deglutição fetal; Falhas nas membranas; Redução do flúxo sanguíneo na placenta ou por ruptura prematura do âmnio. A deficiência do líquido amniótico pode causar hipoplasia pulmonar e malformações, como consequência da compressão do feto pelo útero. Cont… Amniocentese Técnica que consiste na retirada de uma pequena quantidade de líquido amniótico por punção aspirativa da bolsa amniótica. É considerada um procedimento simples, rápido e seguro, especialmente quando realizada após a 14ª semana de gestação. Há um pequeno risco de lesão do feto com a agulha, que pode causar infecções e, mais raramente, risco de aborto espontâneo. Cont… Indicações Idade gestacional Suspeita de anormalidade cromossómica 14 a 18 semanas Isoimunização 20 a 28 semanas Infecção 34 a 42 semanas Prematuridade pulmonar 34 a 42 semanas Colheita e processamento da amostra Desinfectar todo o abdômen da mãe com gaze estéril embebida em solução antisséptica (clorexidina ou iodopovidina); Com ultrassom, verificar a posição da placenta e do feto dentro do útero antes de iniciar o procedimento; Aplicar anestésico local para minimizar o desconforto materno Inserir agulha fina através da parede abdominal, do útero e da bolsa amniótica para aspirar o líquido amniótico ; Cont… Quantidade da amostra Varia de 10 a 20 ml (máximo 30 ml), em várias seringas, para evitar a contaminação de toda a amostra com sangue materno e células. Desta forma, é aconselhável descartar os primeiros 2 ou 3 ml colhidos. Imediatamente após a colheita, o líquido deve ser aliquotado em tubos plásticos estéreis, e um deles deve ser protegido da luz, para a determinação de bilirrubinas. Amostra do líquido amniótico Exame Macroscópico Cor Condição associada Incolor a palha Normal Amarelo Eritroblastose Verde Hipoxia fetal Vermelho escuro castanho Morte Fetal Exame microscópico Testes para a:valiar a maturidade Fetal: Exame das células de descamação fetal; Coloração de azul de nilo; A coloração com azul-de-nilo diferencia entre células orangiófilas (descamação da pele fetal) e células azuis. Uma percentagem maior de 10% de células orangiófilas indica maturidade fetal. Maturidade (Semanas) % de células laranja <34 <1 34-38 1-10 38-40 10-50 >40 >50 Cont… Exame Microbiologico Não refrigerar amostra; Coloração de Gram; Cultura Detecção de Antígenos bacterianos Testes de aglutinação de latex Estudos laboratoriais Dosagem de alfafetoproteina Anormalidades congénitas Alfa-fetoproteina elevada no soro materno, colhido entre 16 e 18 semanas detectam defeitos do tubo neural (ex.: espinha bífida) em um grande numero de acometidos, mas não em todos os casos. Doseamento da bilirubina A presença de bilirrubina no líquido amniótico é um indicador da eritroblastose fetal. Como a concentração de bilirrubina no líquido amniótico é geralmente baixa (~0,01 para 0,03 mg/dL) para ser medida por técnicas fotométricas padrão, um método espectrofotométrico direto é utilizado. Cont… O teste é referido como ensaio ΔA450. Nesse procedimento, a diferença na absorbância direta medida entre 365 e 550 nm do fluido amniótico é utilizada para preparar uma curva de calibração. Para interpretar os resultados obtidos com esse método, a idade gestacional do feto deve ser conhecida, como a quantidade de bilirrubina presente no líquido amniótico, relacionada com a idade gestacional. Composição do líquido amniótico No início da gestação, a composição do fluido amniótico se assemelha a um complexo dialisado do soro materno. À medida que o feto cresce, as alterações do líquido amniótico são afetadas de várias maneiras . Notadamente, concentração de sódio e, diminuição da osmolalidade e concentração de ureia, creatinina e aumento do ácido úrico. Composição do líquido amniótico Valores médios Composição 15 sem. 24 sem. 40 sem. Teste de agitação ou estabilidade da espuma Também conhecido como Shake test ou teste de Clements, é um teste de triagem para determinação de surfactante pulmonar no líquido amniótico. O teste fundamenta-se na capacidade dos fosfolipídios de reduzir a tensão superficial do líquido amniótico e formar bolhas, mesmo na presença de álcool, que é um agente antiespumante. Cont… Neste teste, 0,5 mL de líquido amniótico deveser adicionado em 3 tubos contendo 0,5 mL de etanol com concentrações de 25%, 50% e 75%, respectivamente. Os tubos são agitados durante 15 segundos e deixados em repouso por 15 minutos, para então ser analisada a presença de espuma contínua na borda dos tubos. É indicativo de maturidade fetal a presença de espuma estável na borda dos 3 tubos. A presença de espuma estável apenas no tubo 1 indica imaturidade fetal e a persistência nos tubos 1 e 2 sugere maturidade intermediária. Contagem de corpos lamelares A técnica manual consiste em centrifugar o líquido amniótico a 1.500 rpm/10 minutos e determinar a DO do sobrenadante em 650 nm. Nesse comprimento de onda, uma DO de 0,150 ou mais corresponderia a uma relação lecitina/ esfingomielina ≥ 2,0, e indicaria a presença de fosfatidilglicerol. O mecônio causa interferência discreta na determinação dos corpos lamelares por esta metodologia. O que esta altar? Citações dos textos e imagens; Referencias bibliográficas usadas (tratado de analises clinicas e Tienz) Conclusão e perguntas de reflexão. Sugestões, acréscimo e divisão do trabalho. Urgente
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