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• Tubos SEM anticoagulante = tubo SECO. • Possui ativador de coágulo; • Vermelho (sem gel) / amarelo (com gel). As precauções universais estabelecem que qualquer material biológico é considerado potencialmente de risco. Medidas de biossegurança devem ser adotadas na manipulação das amostras. Sangue 1. Sangue total; 2. Plasma; 3. Soro. Para realizar as análises in vitro, devemos separar a parte líquida da parte sólida São medicamentos produzidos pelo fracionamento industrial do plasma humano. Depois decolhido, o sangue total é processado nos Serviços de Hemoterapia e dá origem a até quatro hemocomponentes: concentrado de hemácias, concentrados de plaquetas, plasma e crioprecipitado. Atualmente, não existe um acordo internacional de codificação por cores dos tubos de coleta, mas a maioria dos fabricantes segue uma padronização a fim de evitar erros pré-analíticos. • Contém citrato de sódio; ⎯ Anticoagulante utilizado para a obtenção de plasmas para provas de coagulação: ⎯ Tempo de coagulação; ⎯ Retração de coágulo; ⎯ Tempo parcial de Tromboplastina; ⎯ Tempo de protrombina • Tubo vermelho: tubo seco (sem anticoagulante); ⎯ Utilizado para coleta de soro; ⎯ Não contém gel no fundo do tubo. Após a separação, o soro deve ser transferido para um tubo novo; ⎯ Parede do tubo revestida com partícula de sílica (ativador de coágulo); ⎯ Utilizado na sorologia, análises imunológicas, bioquímicas, hormonais. • Tubo amarelo = tubo seco (sem anticoagulante); ⎯ Utilizado para coleta de soro; ⎯ Possui gel separador no fundo do tubo. Não precisa transferir o soro para outro tubo, após a separação; ⎯ Gel: propriedade tireotrópica, densidade intermediária entre coágulo e soro. Na centrifugação, o gel move-se para cima e fica entre o soro e o coágulo, formando uma barreira estável; ⎯ Parede do tubo revestida com partícula de sílica (ativador de coágulo); ⎯ Utilizado na sorologia, análises imunológicas, bioquímicas, hormonais. • Tubo verde (anticoagulante heparina); ⎯ Utilizado na dosagem bioquímica e genética; ⎯ Existem tubos com gel. ⎯ Heparina ativa enzimas antiplaquetárias e impede a coagulação do sangue ao inibir a trombina e o fator Xa. • Tubo roxo (anticoagulante EDTA); ⎯ Utilizado na hemato para coleta de sangue total e de plasma; Coleta de sangue Coleta adequada Resultado Tratamento Usuário satisfeito Coleta inadequada Amostra recusada - recoleta Usuário insatisfeito Como podemos fazer essa separação? centrifugação Qual a diferença entre plasma e soro? Plasma - o plasma é composto por água, Além de água, estão presentes componentes, orgânicos, inorgânicos, lipídios e fibrogenos. Soro - o soro é o plasma sem fribrogenio e fatores de coagulação • Tubos COM anticoagulante; • Cada anticoagulante um mecanismo de ação; • Cada anticoagulante uma função ⎯ Utilizado na bioquímica para dosagem de lipídeos e lipoproteínas, por exemplo; ⎯ EDTA é quelante de cálcio e por isso impede a coagulação • Tubo cinza (anticoagulantes fluoreto de sódio e EDTA); ⎯ Utilizado na dosagem de glicose e lactato. ⎯ Fluoreto de Sódio: inibidor glicolítico; inibe enolase, enzima da via glicolítica. Glicose não é consumida pelas células, sendo estabilizada; ⎯ EDTA: atua como anticoagulante, já que o fluoreto de sódio é um anticoagulante mais fraco. Objetivo: evitar contaminação por aditivos nos tubos subsequentes e alterações nos resultados de alguns analitos. Exemplo: coletar no tubo de heparina antes do tubo de citrato. Pode ter heparina no tubo de citrato e interferir nos resultados de coagulação. 1. Hemocultura ou tubo sem aditivo; 2. Tubo para coagulação (citrato); 3. Tubo para sorologia; 4. Tubo para heparina; 5. Tubo para hematologia (EDTA K2 ou EDTA K3); 6. Tubo para glicemia (fluoreto de sódio). • Hemólise / lipemia (plasma ou soro sólido); • Coágulos em amostra com anticoagulante; • Não cumprimento do jejum obrigatório; • Tubo de coleta inadequado; • Volume de sangue inadequado; • Condições inadequadas de transporte; • Discrepâncias entre requisição e etiqueta da amostra; • Amostra sem identificação ou identificação errônea; ü Amostra contaminada / recipiente com vazamento. • Tubos devem permanecer na posição vertical até a coagulação do sangue; • Os tubos devem ser homogenizados, por inversão, de 5 a 8 vezes após a coleta; • Influência da exposição à luz: bilirrubina, betacaroteno, vitamina A, vitamina B6. • Identificação de material de risco biológico; • Recipiente adequado para o transporte; • Amostras transportadas sem centrifugação, devem ser monitoradas e os tempos de 2 h devem ser respeitados; • A temperatura de transporte varia. A grande maioria pode ser em TA, ou seja, entre 22ᴼ e 25ᴼC. • Alguns parâmetros requerem transporte refrigerado. Ex.: amônia; Separação do soro ou plasma das células sanguíneas deve ser realizada o mais rápido possível. O ideal é em até 2 horas. • Plasma (tubo com anticoagulante): 1. Centrifugação: 3500 rpm por 10 min • Soro (tubo sem anticoagulante): 1. Retração do coágulo: 10 min a TA; 2. Centrifugação: 3500 rpm 10 min. • Temperatura: A maioria deve ser centrifugado a TA (temperatura ambiente). Ex.: glicose, marcadores hepáticos. Alguns devem ser refrigerados. Ex.: amônia. • Tubos com gel separador não podem ser centrifugados em baixas temperaturas, uma vez que as propriedades de fluxo do gel se relacionam com a temperatura; • Rotação e tempo: Dependem do tipo de tubo utilizado. Regras: • Sempre tubos em pares, do mesmo tipo de material e com o mesmo volume; • Sempre colocar os tubos com o mesmo volume de lados opostos; • Nunca abrir a centrífuga antes de terminar de rodar. • Temperatura do laboratório deve estar entre 22ᴼ e 25ᴼC; • Refrigeração da amostra (entre 2ᴼ e 8ᴼC) inibe metabolismo das células e estabiliza certos constituintes termolábeis; • Algumas amostras não podem ser refrigeradas ou o tempo deve ser curto. Ex.: 2 horas para potássio; • Algumas amostras podem ser congeladas outras não. Não existe uma regra geral para todas as amostras ou para todos os parâmetros analisados. Cada caso deve ser considerado individualmente, segundo as recomendações dos kits de dosagem dos parâmetros.
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