Relatório sobre a técnica de coloração Gram

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UNIVERSIDADE VILA VELHA - UVV
BIOMEDICINA
PRÁTICA DE COLORACÃO DE GRAM
MICROBIOLOGIA
LUCIANA TOMY NAKA
MARIA LUIZA M. MACHADO
VILA VELHA
MARÇO DE 2022
1) INTRODUÇÃO
A coloração de Gram é um método muito importante para caracterizar e classificar inicialmente as bactérias. Diretamente ligado à estrutura celular e aos componentes presentes na bactéria, permite que as mesmas sejam visualizadas e distinguidas através do microscópio.
2) OBJETIVO
Este relatório tem por objetivo apresentar o método de coloração de Gram e a relação com a parede celular das bactérias, bem como a classificação dessas quando coradas.
3) DESENVOLVIMENTO
Primeiramente ocorreu a esterilização da alça de platina para prosseguir com a coleta da colônia de bactérias já feita na prática anterior.
Após isso, foi aberta a Placa de Petri da cultura já mencionada, atrás do Bico de Bunsen e em seguida o colhimento bacteriano.
Na lâmina escolhida foi pingada uma solução salina, sucedido pelo esfregaço bacteriano, e posteriormente, colocada acima do bico de Bunsen para secagem da mesma.
Em seguida, começaram as etapas para a coloração de Gram, iniciadas pelo tingimento da lâmina com Violeta genciana, tendo que esperar 1 minuto para um bom início de fixação. Após o tempo determinado, foi pingado Ludol na mesma lâmina, e após mais 1 minuto de espera, enxaguado respectivamente com Água Deionizada, Álcool 95% e água outra vez. A última etapa de coloração consistiu em passar o corante final, Safranina, e esperar 30 segundos, em seguida, aplicando água para limpar e tirar o excesso de corante.
Com a lâmina já preparada, partimos para a análise microscópicas.
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4) RESULTADOS
As bactérias analisadas eram Gram positivas (permaneceram coradas em violeta) e quanto ao seu formato eram Coccus (formato esférico).
Por serem Gram positivas, suas paredes celulares continham uma espessa camada de Peptideogicano, o que permitiu maior retenção do primeiro corante, e mais uma fina camada de ácido teicóico. Quando submetido à etapa do Álcool 95%, as Gram positivas, continuam tingidas após os poros se ressecarem e fecharem, devido à camada grossa de peptiodeoglicano, enquanto nas Gram negativas, a cor sai facilmente por conta da camada fina de peptiodeogilano e da destruição de sua cama de LPS.