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Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _01_ DATA: _19/_03_/_2022__ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ANÁLISE AMBIENTAL DADOS DO (A) ALUNO (A): Nome: GUNAR VINGRE DA SILVA MOTA MATRÍCULA:01325855 Curso:BIOMEDICINA Polo:BELÉM Professor (a) orientador (a): ANDREI SANTOS Orientações gerais: O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e concisa; O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; Espaçamento entre linhas: simples; Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). Tema de aula: TÉCNICA DOS TUBOS MÚLTIPLOS Relatório: 1. MÉTODO PRESUNTIVO A. Identificar quais meios de cultura são utilizados para a realização do método presuntivo. Os principais meios de culturas utilizados no método presuntivo, são: 1) O caldo Lactosado que é um meio recomendado para cultivo de coliformes e Salmonela a partir de amostras de água, alimentos, produtos lácteos e outros materiais. No experimento foi utilizado com o tubo de Durham para verificação de formação de gases por microrganismos 2) Caldo Verde Bile Brilhante (confirmatório) é usado para a detecção de bactérias coliformes em água, alimentos e laticínios em um ambiente de laboratório e não se destina ao uso no diagnóstico de doenças ou outras condições em humanos. 3) O Meio E Coli (EC) é utilizado para a detecção de coliformes a 37°C e Escherichia coli em temperaturas elevadas (44,5 e 45,5°C). O Meio EC é utilizado em testes de temperatura elevada para distinguir organismos do grupo coliformes totais que também pertencem ao grupo dos coliformes Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _01_ DATA: _19/_03_/_2022__ fecais. O teste para coliforme fecal que utiliza o Meio EC é aplicável para investigações em água de consumo humano, poluição de córregos, fontes de água natural, sistemas de tratamento de esgoto, água para banho, água salgada e monitoramento de água em geral. B. Descrever quais as proporções e diluições são obtidas após adicionar a amostra de água a ser analisada. Nesta atividade, foram utilizados 6 tubos para análise de água com as seguintes diluições para um volume final de 10 mL de amostra: 1) 2 tubos com diluições de 1:1, com amostra de 5 mL e 5 mL de solvente; 2) 2 tubos com diluições de 1:10, com amostra de 1 mL e 9 mL de solvente; 3) 2 tubos com diluição de 1:100, com amostra de 0,1 mL e 9,9 mL de solvente. Nesta diluição foi utilizado a seguinte proporção: volume do soluto = (1 parte do soluto x Volume total da mistura)/número de partes (1:10 = 11) C. Qual a importância da presença do tubo de Durham na identificação dos coliformes totais? Vale ressaltar que na avaliação das amostras de água deveríamos realizar os testes presuntivo e confirmativo, contudo, o teste presuntivo apresentou um valor negativo, por não haver a produção de gás e nem o crescimento de microrganismo em amostra de tubo de caldo E.Coli durante o período de incubação, a investigação foi consumada nessa fase e o resultado é julgado negativo. Figura 1. Resultado para o método presuntivo, com valor negativo para o tubo de Durham (tubo claro) e para o tubo de caldo E.Coli (tubo escuro). Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _01_ DATA: _19/_03_/_2022__ 2. MÉTODO CONFIRMATÓRIO A. Descrever qual a importância dessa técnica para a identificação microbiológica da água. Contagens de microrganismos pelo Número Mais Provável (NMP) são técnicas que permitem avaliar estatisticamente a quantidade de microrganismos presentes em uma amostra e estimar a proporção viável metabolicamente ativa. Ou seja, essa técnica pode ser utilizada para estimar a população total ou de um grupo específico de microrganismos, sendo o conjunto de respostas positivas ou negativas considerado para o cálculo estimado final. B. Qual o meio de cultura é utilizado para a realização dessa técnica? Caldo Verde Bile Brilhante foi usado para a detecção de coliformes em água, neste relatório. C. Relatar como é realizada a análise do número mais provável (NMP), utilizada para obtenção do resultado do teste confirmatório. A determinação do número mais provável (NMP) de coliformes em uma amostra é efetuada a partir de aplicação da técnica de tubos múltiplos. Para a conformidade do padrão microbiológico de potabilidade é obrigatório a ausência de coliformes totais em 100 mL de amostra na saída do tratamento, portanto, o teste deve ser realizado em amostras não diluídas. Nesta atividade, utilizou-se 15 tubos com as seguintes diluições com aguá da companhia local: 1) separou-se 5 tubos com água não diluída; 2) separou-se 5 tubos com diluição de 1:10, com 10 mL de amostra em 90 mL de diluente; 3) separou-se 5 tubos com diluição de 1:100, com 10 mL da mistura de 1:10 em 90 mL de diluente. Na estimativa, utiliza-se a equação de cálculo = Índice NMP por valor de 100mL x o menor fator de diluição. Por não haver a produção de gás e nem o crescimento de microrganismo em amostra de tubo de caldo E.Coli durante o período de incubação, já se esperava que a investigação de NMP tivesse resultado negativo. Os testes confirmatórios foram realizados pela técnica de filtração em membrana. Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _01_ DATA: _19/_03_/_2022__ Referências Brandão MLL, Rosas CO, Medeiros VM, Warnken MB, Bricio SML, Silva AML, et al. Comparação das técnicas do NMP e de filtração em membrana na avaliação da qualidade microbiológica de água mineral natural. Rev Inst Adolfo Lutz. São Paulo, 2012; 71(1):32-9. Brasil. Ministério da Saúde. Resolução RDC n. 173, de 13 de setembro de 2006. Dispõe sobre o Regulamento Técnico de Boas Práticas para Industrialização e Comercialização de Água Mineral Natural e Água Mineral. Diário Oficial [da] República Federativa do Brasil, Brasília, DF, v. 178, 15 set 2006, Seção 1, p. 60. Ritter AC, Tondo EC. Avaliação microbiológica de água mineral natural e de tampas plásticas utilizadas em uma indústria da Grande Porto Alegre/RS. Alim Nutr, Araraquara. 2009;20(2):203-8. Relatório de Aulas Práticas em EAD
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